RNaseA／Tl保护和RNaseH聚焦法实验——RNase保护法
基因分子鉴定的一个重要方面就是其 RNA 转录物 5' 和 3' 端的精确作图。首先被 Maniatis 研究组使用的 RNase 保护测定法就是基于这个目的发展起来的。由于杂交是在溶液中实现的，因此也称为溶液杂交。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编：郑晓飞。实验方法原理RNA与互补的 [ 32P ] 标记的探针在溶液中复件后形成的 RNA-RNA 杂合分子对单链专一的 RNase 具有抗性。此法可以对 RNA 分子末端进行定位或对含内含子的交界定位。与 Northern blot 相比，它是一种十分有效而且灵敏度很高的并可用于测定 mRNA 丰度的方法。杂交过程中加入过量的探针能使所有互补序列形成标记的杂合分子。未杂交探引和已杂交探针的单链部分则被消化而清除。“被保护的”探针通过变性的聚丙烯酰胺凝胶来检测并定量。最初是用 DNA 单链作为探针，但是单链 DNA 的制备耗时多。又因为标记 RNA非常......阅读全文
RNase－A/Tl保护和－RNase－H－聚焦法实验——RNase保护法
基因分子鉴定的一个重要方面就是其 RNA 转录物 5' 和 3' 端的精确作图。首先被 Maniatis 研究组使用的 RNase 保护测定法就是基于这个目的发展起来的。由于杂交是在溶液中实现的，因此也称为溶液杂交。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编：郑晓飞。实验方法原理RNA与
RNase－A/Tl保护和－RNase－H－聚焦法实验——RNase－H－聚焦法
实验方法原理RNA与互补的 [ 32P ] 标记的探针在溶液中复件后形成的 RNA-RNA 杂合分子对单链专一的 RNase 具有抗性。此法可以对 RNA 分子末端进行定位或对含内含子的交界定位。与 Northern blot 相比，它是一种十分有效而且灵敏度很高的并可用于测定 mRNA 丰度的方法
RNase－A/Tl保护和－RNase－H－聚焦法实验
实验方法原理 RNA与互补的 [ 32P ] 标记的探针在溶液中复件后形成的 RNA-RNA 杂合分子对单链专一的 RNase 具有抗性。此法可以对 RNA 分子末端进行定位或对含内含子的交界定位。与 Northern blot 相比，它是一种十分有效而且灵敏度很高的并可用于测定 mRNA
RNase－A/Tl保护和－RNase－H－聚焦法实验
RNase保护法 RNase H 聚焦法 实验方法原理 RNA与互补的 [ 32P ] 标记的探针在溶液中复件后形成的 RNA-RNA 杂合分子对单
RNase－inhibitors－and－RNases
Question 1.What are the differences among RNase H, RNase A, RNase B and RNase C?2.In your cDNA kits, RNase H is added in the second strand reaction t
RNAse－A－Treatment－of－Mouse－Cells
IntroductionRNAse A treatment of permeabilized cells followed by immunostaining is a method which allows to show if the localization of a protein into
RNase－and－DEPC－Treatment:－Fact－or－Laboratory－Myth
Researchers are usually trained in RNA isolation and analysis methods by one another or by technical manuals. Experimental procedures are often not qu
Roche公司的RNase－Protection－Assay－(RPA)－protocol
Roche公司的RNase Protection Assay (RPA) Using DIG-Labeled RNA Probes下载网址：http://www.roche-applied-science.com/PROD_INF/BIOCHEMI/no1_03/PDF/p22_23.pdf还有一份
RNA酶保护试验((RNase－Protection－Assay,RPA)方法
一、试剂准备1． GACU POOL：取100mM ATP、CTP、GTP各2.78μl、100mM UTP 0.06μl，加DEPC H2O至100μl。2. 杂交缓冲液IPES 0.134g、0.5M EDTA（pH8.0）20μl、5M NaCl 0.8ml、甲酰胺8ml，加DEPC H2O至
RNA酶保护试验((RNase－Protection－Assay,RPA)简介
RNA酶保护试验((RNase Protection Assay,RPA)是通过液相杂交的方式,用反义RNA探针与样品杂交，以检测RNA表达的技术。1。原理：双链RNA（杂交的）能够抵抗RNA酶的降解。2。应用：检测RNA表达3。与Northern杂交和RT-PCR比较，RPA有以下几个优点：1．
RNA酶保护实验(RNase－Protection－Assay,RPA)简介
简介： RNA酶保护试验(RNase Protection Assay，RPA)是通过液相杂交的方式,用反义RNA探针与样品杂交，以检测RNA表达的技术。 1. 原理：双链RNA（杂交的）能够抵抗RNA酶的降解。 2. 应用：检测RNA表达 3. 与Northern杂交和RT-PCR比较
RNA酶保护实验(RNase－Protection－Assay,RPA)简介
简介：RNA酶保护试验(RNase Protection Assay，RPA)是通过液相杂交的方式,用反义RNA探针与样品杂交，以检测RNA表达的技术。1. 原理：双链RNA（杂交的）能够抵抗RNA酶的降解。2. 应用：检测RNA表达3. 与Northern杂交和RT-PCR比较，RPA有以下几个优
用RNase－III制备siRNA库来诱发RNAi(2)
Figure 1. Silencing Gene Targets by RNase III Derived siRNA Cocktails. A 200 bp dsRNA (15 µg) for each gene of interest was digested with 2.5 U RN
用RNase－III制备siRNA库来诱发RNAi(1)
小分子干扰RNA (Small interfering RNA ，siRNA ) 是一种非常有效的工具，能够在包括哺乳动物细胞在内的多个体系中抑制特定基因的表达，从而研究某个基因的功能或者是相关信息。但是这种强有力的方法的难题之一是需要设计，合成siRNA s 和验证其效果，从而找到最有效的
RNA干涉实验——采用RNaseⅢ制备siRNA分子实验
实验方法原理首先在体外以长为 200~1000 bp 的 cDNA 为模板转录合成正义与反义的单链 RNA 分子，然后通过退火形成长的 dsRNA 分子，再用Diccr 核酸酶进行切割得到 siRNA 分子的混合物，通过纯化去除没有被切割的双链 RNA 分子和 DNA 模板以后，siRNA 分子就可
固相RNase清除剂使用说明书
固相RNase清除剂使用说明书（M3090-250） 产品特色：◆ 无毒：本产品中试剂成分均为常规安全化学品，区别以往实验室传统方法所用的DEPC。（DEPC是一种强致癌剂——引用分子克隆原文）。◆ 高效：它含有多种成分，能高效灭活固体表面的RNase污染，保障RNA工作环境的清洁。产品原液能在5分
RNA酶保护试验((RNase－Protection－Assay,RPA)的优缺点
RNA酶保护试验((RNase Protection Assay,RPA)是通过液相杂交的方式,用反义RNA探针与样品杂交，以检测RNA表达的技术。与Northern杂交和RT-PCR比较，RPA有以下几个优点：1． 检测灵敏度比Northern杂交高。由于Northern杂交步骤中转膜和洗膜都将造
10mg/mlRnase（无DNase）（DNase－free－RNase）配制方法
溶解10mg的胰蛋白RNA酶于1ml的10mmol/L的乙酸钠水溶液中（pH 5.0）。溶解后于水浴中煮沸15min，使DNA酶失活。用1mol/L的Tris－HCl调pH至7.5，于-20℃贮存。（配制过程中要戴手套）
用RNase－Ⅲ－消化长片断双链RNA制备siRNA的技术特点
其他制备siRNA的方法的缺陷是需要设计和检验多个siRNA序列以便找到一个有效的siRNA。而用这种方法——制备一份混合有各种siRNAs “混合鸡尾酒” 就可以避免这个缺陷。选择通常是200—1000碱基的靶mRNA模版，用体外转录的方法制备长片断双链dsRNA ，然后用RNase Ⅲ (or
用RNase－Ⅲ－消化长片断双链RNA制备siRNA的方法特点
其他制备siRNA的方法的缺陷是需要设计和检验多个siRNA序列以便找到一个有效的siRNA。而用这种方法——制备一份混合有各种siRNAs “混合鸡尾酒” 就可以避免这个缺陷。选择通常是200—1000碱基的靶mRNA模版，用体外转录的方法制备长片断双链dsRNA ，然后用RNase Ⅲ (or
古老的RNase－III抗病毒防御系统有望引发RNA治疗变革
尽管人类主要依赖更加复杂的更加强大的抗病毒防御系统，但是早期的生命形式在十亿年前形成的让它们自己抵抗病毒感染的原始防御系统仍然能够在人细胞中发现到。如果科学家们能够设计出有益的病毒，让这些病毒利用这种古老的系统直接运送药物到患病组织中，那么这种系统尽管比较简单，但可能成为下一个精准医疗时代的基础
PURELAB－flex（配生物过滤器）可以清除内毒素、RNase、DNase和...
PURELAB flex（配生物过滤器）可以清除内毒素、RNase、DNase和细菌 内毒素内毒素是革兰氏阴性活菌外膜脱落的脂多糖。 细菌细胞死亡时释放出内毒素。内毒素与细胞相互作用，造成多种不利影响（参考文献1Dawson和参考文献2 Nagano）。 内毒素对试管内受精（参考文献3 Dumoul
荧光PCR法检测RNasin性能效果
实验目的：对RNasin性能效果进行检测及评估。实验材料及设备：模板RNA：大鼠肌肉组织RNA引物：Rat β-acting：Forward CCCATCTATGAGGGTTACGCReverse TTTAATGTCACGCACGATTTC RNase：50mg/ml（simgen）RNasin：4
荧光PCR法检测RNasin性能效果
实验目的：对RNasin性能效果进行检测及评估。 实验材料及设备： 模板RNA：大鼠肌肉组织RNA 引物：Rat β-acting：Forward CCCATCTATGAGGGTTACGC Reverse TTTAATGTCACGCACGATTTC RNase：50mg/ml（simgen）
揭秘口蹄疫病毒L蛋白拮抗宿主先天性免疫新机制
近日，山东省农科院畜牧兽医研究所联合中国农科院等单位，在《病毒学杂志》发表研究论文，揭示了口蹄疫病毒（FMDV） L蛋白拮抗宿主先天性免疫新机制。 OAS/RNase L信号通路在宿主先天性免疫系统中发挥着重要作用。当病毒的RNA进入宿主细胞后，寡聚腺苷酸合成酶（OAS）能够识别并结合病毒RN
如何协调两种酶从染色体上去除RNADNA杂合结构？
由分子生物学研究所的Brian Luke和Helle Ulrich教授领导的两个研究小组已经破译了如何协调两种酶RNase H2和RNase H1从染色体上去除RNA-DNA杂合结构。 RNA-DNA杂合体对于促进正常的细胞活动（如基因调控和DNA修复）很重要，但过多也有DNA受损的风险，并可
新发现！细菌RNA代谢调控新机制
近日，中国科学院水生生物研究所张承才团队关于细菌中RNA代谢调控机制的研究取得了进展。相关研究成果以《蓝藻中RNase E受一个保守蛋白调控》（A conserved protein inhibitor brings under check the activity of RNase E in
水生所揭示细菌RNA代谢调控新机制
近日，中国科学院水生生物研究所张承才团队关于细菌中RNA代谢调控机制的研究取得了进展。相关研究成果以《蓝藻中RNase E受一个保守蛋白调控》（A conserved protein inhibitor brings under check the activity of RNase E in
DEPC水处理的75％酒精如何配制
1. RNase-free玻璃瓶的获取：用含终浓度0.1%DEPC的超纯水（DEPC水）浸泡玻璃瓶过夜，2. 制备RNase-free水：RNase-free玻璃瓶装上0.1%DEPC的超纯水高温高压灭菌。3. 75%乙醇（DEPC水配制）：RNase-free-水：无水乙醇（未开封的）按1:3配制
科学家从结构上揭示酵母核糖核酸酶P加工tRNA前体机制
作为一种通用酶，核糖核酸酶P（RNase P）是一种通用核酶，已在生命的三个王国中发现。它加工tRNA前体（pre-tRNA）的5'端。RNase P是一种核糖核蛋白复合物，由单个具有催化能力的RNA组分和可变数量的蛋白组成。与仅含有一种小蛋白辅因子的细菌RNase P不同的是，古细菌R