荧光原位杂交及其在人类基因组研究中的应用（一）
荧光标记的染色体原位杂交技术提供了一种快速而有效的手段，将DNA片断和特定的真核生物细胞的染色体区带联系了起来，并将这些DNA片断排序，这是研究 DNA顺序在染色体上位置的最直接的方法。最早，人们根据Gall和Pardue在1969年的工作，于70年代，建立起了同位素原位杂交技术，但当时只 是用于DNA顺序在多线染色体上的定位或是重复顺序在中期染色体上的定位。1981年，Gerhard和Harper等首先证明有可能将从个体基因中得到 的单拷贝顺序（SCP，single copy probe）通过同位素原位杂交技术定位到中期染色体上。在此基础上，80年代初起，荧光标记的原位杂交技术开始起步并得到运用且不断地发展。 1. FISH技术简介 FISH技术包括下列几个步骤：a.探针的准备和标记；b.探针和染色体的杂交；c.信号检测；d.杂交信号与分带染色体的比较 1.1&nb......阅读全文
荧光原位杂交及其在人类基因组研究中的应用（一）
荧光标记的染色体原位杂交技术提供了一种快速而有效的手段，将DNA片断和特定的真核生物细胞的染色体区带联系了起来，并将这些DNA片断排序，这是研究 DNA顺序在染色体上位置的最直接的方法。最早，人们根据Gall和Pardue在1969年的工作，于70年代，建立起了同位素原位杂交技术，但当时只
荧光原位杂交及其在人类基因组研究中的应用（三）
3.FISH在人类基因组研究中的应用 FISH作为确定基因片段在染色体上位置最直接的方法，在人类基因组研究中的应用日益广泛深入。所研究的基因片段通常克隆在质粒，phage，cosmid核YAC中，可以用FISH技术知道其在分带染色体上的位置，也可以以次手段进行某种遗传病的诊断。3. 1 SCP（
荧光原位杂交及其在人类基因组研究中的应用（二）
1.3信号的检测在洗去未杂交和错配对的探针分子之后，载片培养在免疫荧光试剂中，使其在探针杂交的位置上产生荧光信号，偶联了荧光素分子的抗生物素蛋白被用来标记已掺入到探针分子中的生物素。地谷新，二硝基苯，AFF和硫磺酸盐则可以用相应地标上了荧光素地抗免疫球蛋白来标记。 最常用地荧光素分子有FITC，r
荧光定量PCR仪技术及其在医学中的应用（一）
1 概述 荧光定量多聚酶链式反应是一种新的核酸定量技术。该技术将荧光能量传递技术（fluorescence resonance energy transfer，FRET）应用于常规多聚酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR仪中，从而进行定量检测。FRE
荧光原位杂交在非整倍体植入前诊断中的应用实验－一
试剂、试剂盒 冰乙酸甲醇牛血清白蛋白柠檬酸钠低渗液胃蛋白酶HCl福尔马林SSC甲醛缓冲液仪器、耗材 显微载玻片培养瓶巴斯德吸管微量移液器架金刚石笔洗耳球解剖显微镜倒置显微镜小型喷灯毛细吸管恒温箱微型离心机漩涡振荡器离心管实验步骤 一、用于 FISH 分析的 PB1、PB2 和卵裂球（从卵母细胞和胚胎
延迟荧光技术及其在活体浮游植物测量中的应用（一）
摘要：本文介绍了一种活体浮游植物在线监测技术——延迟荧光测量技术及基于延迟荧光技术的DF藻类延迟荧光测量系统。活体藻类监测技术通过在线监测藻类的延迟荧光，自动记录活的浮游植物的生物量和组成，适用于浮游植物的自动在线持续监测。结合其他系统所测得的生态因子参数，分析浮游植物的季节变化模式，作为动态变化环
活细胞荧光成像的新型标记法及其在STED中的应用（一）
如何免除活细胞标记中的清洗（washout）步骤？SNAP-tag等标记方法为活细胞显微成像带来了革命性的变化，也因此被Nature杂志评为2004年最热门的科研技术之一。但是传统的SNAP-tag标记仍然有很大的缺陷。将带有荧光探针的底物BG加入细胞后需要多次清洗细胞，才能将未结合的BG去除从而消
荧光定量PCR仪技术及其在医学中的应用
刘向国 谢国明 (重庆医科大 重庆市 400016)摘 要 荧光定量PCR仪技术是一种新的核酸定量技术，该技木在PCR仪反应系统中引人了荧光标记探针，具有可实时监测，高灵敏性，高特异性和高精确性的特点，极大地克服了原有PCR仪技术的不足，扩大了PCR仪的应用范围。关键词 定量pcr；荧光；基因Flu
抗独特型抗体及其在医学研究中的应用（一）
针对外来抗原的抗体分子（Ab1)可变区上Id可刺激机体产生相应的抗Id抗体（Ab2)。Ab2β具有与外来抗原相似的氨基酸排列顺序或空间构型，它能够在体内模拟始动抗原的作用。应用Ab2β的这一特性，可有目的地制备Ab2β，将其作为抗原的替代物用于基础和临床医学研究。 一、抗独特抗体的制备 （一
荧光标记基团的选择及其在荧光定量PCR中的应用
PCR实验室产品选择指南 荧光 基团是吸收一定波长的光子后发射特定波长的光波，可以作为抗体等分子的标记物，实时荧光定量PCR中的Taqman探针常用荧光基团FAM标记荧光基团和TAMRA标记。 荧光基团 吸收特定波长的光子后荧光染料(通常称为“荧光基团”或简称为“荧光素”)的化
荧光原位杂交在非整倍体植入前诊断中的应用实验
试剂、试剂盒冰乙酸甲醇牛血清白蛋白柠檬酸钠低渗液胃蛋白酶HCl福尔马林SSC甲醛缓冲液仪器、耗材显微载玻片培养瓶巴斯德吸管微量移液器架金刚石笔洗耳球解剖显微镜倒置显微镜小型喷灯毛细吸管恒温箱微型离心机漩涡振荡器离心管实验步骤一、用于 FISH 分析的 PB1、PB2 和卵裂球（从卵母细胞和胚胎分离后
荧光原位杂交技术（FISH）在疾病分型诊断中的应用
生命科学的发展，生物技术的进步使我们对疾病本质的认识不断地深入，也使我们拥有更多新的治疗方法和药物应对疾病的威胁。如何准确有效地利用这些新的治疗方法和药物治愈疾病是我们迫切需要研究的内容。如何对疾病进行正确的分型和诊断却是上述工作的基础。只有全面地把握病情，并在此基础上进行准确的判断和分析，才能为
荧光定量PCR仪技术及其在医学中的应用（二）
3 在医学中的应用3．1 病原体测定PCR技术的问世使病原体检测能够快速、方便地进行。由于PCR技术假阳性率太高，只要有微量病原体存在就可得到阳性结果，这并不能作为诊断依据， 只有当一定数量的病原体存在时才有临床意义。因此，对模板准确定量显得特别重要，应用荧光技术PCR仪就能够快速、准确地得到结果。
实时荧光定量PCR的研究进展及其应用（一）
多聚集链反应（polymerase chain reaction,PCR）技术发明至今已近20年了，在这期间技术得到了不断的发展，近年来出现的实时荧光定量PCR（real-time quantitative PCR）技术实现了PCR从定性到定量的飞跃，它以其特异性强、灵敏度高、重复性好、
实时荧光定量PCR的研究进展及其应用（一）
(张蓓，沈立松 上海第二医科大学附属新华医院上海儿童医学中心实验诊断中心)摘要:多聚酶链反应飞速的发展使其成为了分子生物学实验室重要的工具，实时荧光定量PCR(real-timequantitative PCR)技术以其敏感性高、重复性好、速度快和污染少使PCR技术又向前迈进了一步。本文
荧光原位杂交在非整倍体植入前诊断中的应用实验－三
洗脱步骤以下是我们实验室常用的两种洗脱步骤，无需甲酰胺且省时。快速洗脱程序 I该洗脱程序适合 1~3 种颜色的探针混合物和 MdtiVysionPGT(13、18、21、X 和 Y 染色体)。1.将装有 0.4XSSC/0.3%NP-40(pH7.4) 溶液的染色缸放入 73°C 水浴中预热，在对标
荧光原位杂交在非整倍体植入前诊断中的应用实验－二
三、探针制备、杂交及洗脱探针混合物1.三色探针混合：先将盛探针的三个离心管离心，然后用涡旋振荡器振荡理想的探针及 LSI 探针杂交缓冲液 10s。配 IOjuL 的探针杂交液，也就是 13、18 和 21 号染色体探针各取 lfxL，加到盛有 7；xLLSI 探针杂交缓冲液的微量离心管中，振
荧光原位杂交的应用
该技术不但可用于已知基因或序列的染色体定位，而且也可用于未克隆基因或遗传标记及染色体畸变的研究。在基因定性、定量、整合、表达等方面的研究中颇具优势。 FISH最初用于中期染色体。从正在分化的细胞核中制备的这种染色体是高度凝缩的，每条染色体都具有可识别的形态，它们染色后将显现出特征性的着丝粒位置
荧光定量PCR技术及其应用（一）
荧光定量PCR（也称TaqMan PCR,以下简称FQ-PCR）是美国PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出来的一种新的核酸定量技术，该技术是在常规PCR基础上加入荧光标记探针来实现其定量功能的，与变通PCR相比，FQ-PCR具有许多优点。本文拟就该技术的特点、原理和方法以及应用作一简
荧光定量PCR技术及其应用（一）
荧光定量PCR（也称TaqMan PCR,以下简称FQ-PCR）是美国PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出来的一种新的核酸定量技术，该技术是在常规PCR基础上加入荧光标记探针来实现其定量功能的，与变通PCR相比，FQ-PCR具有许多优点。本文拟就该技术的特点、原理和方法以及应用作一简
荧光原位杂交的技术应用
作为一种可视化特定DNA序列的分子细胞遗传学技术，荧光原位杂交技术目前被广泛应用于染色体畸变。如非整倍体、染色体重组。其基本流程包括探针标记、探针的变性、样本变性、杂交和荧光信号采集。荧光原位杂交技术在基因定性、定量，整合、表达等方面的研究中颇具优势，目前已经被广泛应用于遗传病诊断、病毒感染分析、产
－荧光原位杂交的技术应用
作为一种可视化特定DNA序列的分子细胞遗传学技术，荧光原位杂交技术目前被广泛应用于染色体畸变。如非整倍体、染色体重组。其基本流程包括探针标记、探针的变性、样本变性、杂交和荧光信号采集。荧光原位杂交技术在基因定性、定量，整合、表达等方面的研究中颇具优势，目前已经被广泛应用于遗传病诊断、病毒感染分析、产
荧光原位杂交的主要应用
作为一种可视化特定DNA序列的分子细胞遗传学技术，荧光原位杂交技术目前被广泛应用于染色体畸变。如非整倍体、染色体重组。其基本流程包括探针标记、探针的变性、样本变性、杂交和荧光信号采集。荧光原位杂交技术在基因定性、定量，整合、表达等方面的研究中颇具优势，目前已经被广泛应用于遗传病诊断、病毒感染分析、产
荧光原位杂交的技术应用
（一）基因（或DNA片段）染色体定位和基因图谱绘制目前应用的基因定位的主要方法是FISH。分离到的DNA序列直接通过FISH,同时采用多种颜色荧光素的标记探针，结合中期染色体和间期细胞方面的信息，可快速确定一-系列DNA序列之间的相互次序和距离，完成基因制图。用不同颜色炎光索标记2个不同的DNA链，
荧光原位杂交的技术应用
作为一种可视化特定DNA序列的分子细胞遗传学技术，荧光原位杂交技术目前被广泛应用于染色体畸变。如非整倍体、染色体重组。其基本流程包括探针标记、探针的变性、样本变性、杂交和荧光信号采集。荧光原位杂交技术在基因定性、定量，整合、表达等方面的研究中颇具优势，目前已经被广泛应用于遗传病诊断、病毒感染分析、产
荧光原位杂交技术的应用
该技术不但可用于已知基因或序列的染色体定位，而且也可用于未克隆基因或遗传标记及染色体畸变的研究。在基因定性、定量、整合、表达等方面的研究中颇具优势。 FISH最初用于中期染色体。从正在分化的细胞核中制备的这种染色体是高度凝缩的，每条染色体都具有可识别的形态，它们染色后将显现出特征性的着丝粒位置
延迟荧光技术及其在活体浮游植物测量中的应用（二）
结合其他水文、气象与光学等水体生态因子，分析浮游植物的季节变化模式，作为动态变化环境的函数。最终建立随季节而变化的生态因子和浮游植物生长之间的函数关系，可以充分地模拟各种水华的过程，精确探测藻类和水华的形成和消亡，从而达到预防水华发生的目的[1]。3 延迟荧光技术应用案例：3.1 匈牙利巴拉顿湖在线
反向遗传学技术及其在FMDV－研究中的应用
刘光清 刘在新 谢庆阁(中国农业科学院兰州兽医研究所农业部畜禽病毒学重点开放实验室,兰州730046)摘 要: 反向遗传技术是一种新兴的分子生物学技术, 已广泛应用于生命科学研究的各个领域。综述反向遗传技术研究进展,并讨论该技术在口蹄疫病毒研究中的应用。关键词: 反向遗传学 反向遗传技术 全长c
CRISPRCas9技术及其在肿瘤研究中的应用
CRISPR的前世今生1987年，日本科学家在研究大肠杆菌的时候发现其基因组上存在一些看起来“奇怪”的重复结构：有一段29碱基的序列反复出现了5次，且两两之间被32个碱基形成的序列隔开了！但这个发现在当时并没有引起科学界的很大关注，毕竟在自然界的生物体内，各种奇奇怪怪的发现实在太多。然后仅仅几年后，
LED光源在荧光显微成像中的应用简述（一）
荧光显微镜中的LED光源具有便利与绿色环保的优点。这些LED能够保持研究成分的有效性，特别是对成像和敏感样品的保存。LED技术在我们的生活中发挥越来越重要的作用。在过去的50年里，该技术的应用已从简单的电子产品指示灯扩展到替代白炽灯以节约大量能源。LED具有高强度、使用寿命长、可控制性及光谱输出稳定