荧光原位杂交及其在人类基因组研究中的应用(二)

1.3信号的检测在洗去未杂交和错配对的探针分子之后,载片培养在免疫荧光试剂中,使其在探针杂交的位置上产生荧光信号,偶联了荧光素分子的抗生物素蛋白被用来标记已掺入到探针分子中的生物素。地谷新,二硝基苯,AFF和硫磺酸盐则可以用相应地标上了荧光素地抗免疫球蛋白来标记。 最常用地荧光素分子有FITC,rrhodamine和Texas Red等。1.4分带和信号定位染 色体地分带可以在杂交前,也可以在杂交后。高分辨的染色体标本是取得最好的带形的基础。常用的分带方法有G(giemsa)带、 Q(quinacrine)带、R(reverse)带,包括色霉素chromomycin A3/偏端霉素distamycin A法;hoechst33258/propidium iodide[3,8-二氨基-5-[3-(二乙基-甲基氨)丙基]6-苯菲碘]法;DAPI[DAPI:4,6-diamidino-2- phenyl......阅读全文

实时荧光定量PCR仪在药物研究中的应用

  新药开发研究,人用药物及其他药物  针对一些感染性疾病的药物,如各种病毒病、细菌病等,在新药的开发过程中,快速了解药物对疾病进程的影响可以为新药开发节约大量的人力、时间和资金,与以前所用的Elisa等方法相比,实时荧光定量PCR技术可以快速、准确、定量、灵敏地测定血液或组织中病原体的含量,因此有

荧光定量PCR在中医药研究中的应用

摘要:荧光定量PCR是一种新的核酸定量技术,该技术在PCR仪反应系统中引入了荧光标记探针,通过荧光信号积累实时监测整个PCR进程,使PCR扩增和终产物检测全处在封闭的条件下进行,从而具有实时监测、无污染、快速、灵敏、精确、特异等特点,极大的克服了原有PCR仪技术的不足,其最主要的优势是能对待测样本起

荧光原位杂交的荧光原位杂交

荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)是在20世纪80年代末在放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性分子细胞遗传技术,以荧光标记取代同位素标记而形成的一种新的原位杂交方法。探针首先与某种介导分子(reporter molecule)结

扫描电镜在材料研究中的应用二

利用高温样品台,可以观察材料在加热过程中组织转变的过程,研究不同材料在热状态下转变的差异。在材料工艺性能研究方面,可以直接观察组织形态的动态变化,弥补了以前只能通过间接观察方法的不足。例如,耐火材料和铁氧体的烧结温度都在1000℃以上,实验中可以观察材料的原位变化,待冷却下来后,结合能谱仪和EBSD

AFM在二维材料研究中的应用

AFM在二维材料研究中的应用新型二维材料自2004年石墨烯被发现以来,探寻其他新型二维晶体材料一直是二维材料研究领域的前沿。正如石墨烯一样,大尺寸高质量的其他二维晶体不仅对于探索二维极限下新的物理现象和性能非常重要,而且在电子、光电子等领域具有诸多新奇的应用。原子力显微镜(AFM)一直被广泛用于二维

扫描电镜在药物研究中的应用二

观察微泡细胞外微泡 (EMV) 是由细胞在体外和在生物体内自然释放的膜状纳米大小的细胞器。微泡可以在各种人体体液中找到:血浆,尿液,母乳和羊水。 由于观察到它们携带功能性蛋白质,RNA分子和抗原,它们可以被理解为一种新的细胞 - 细胞通讯方式。先前的研究工作表明,从牛奶的mRNA和miRNA中获得的

活细胞荧光成像的新型标记法及其在STED中的应用(三)

细胞骨架如微管、微丝等一直是生命科学研究的重点。近期Johnsson等科学家将SiR直接标记于与微管和微丝分别特异性结合的小分子docetaxel和jasplakinolide,即形成SiR-tubulin和SiR-actin,实现了在不对细胞或组织进行任何转染或基因组修饰的条件下直接进行活细胞成像

活细胞荧光成像的新型标记法及其在STED中的应用(一)

如何免除活细胞标记中的清洗(washout)步骤?SNAP-tag等标记方法为活细胞显微成像带来了革命性的变化,也因此被Nature杂志评为2004年最热门的科研技术之一。但是传统的SNAP-tag标记仍然有很大的缺陷。将带有荧光探针的底物BG加入细胞后需要多次清洗细胞,才能将未结合的BG去除从而消

活细胞荧光成像的新型标记法及其在STED中的应用(四)

荧光显微镜在研究活细胞中蛋白质分子的定位、相互作用及动力学等生命活动中起着不可或缺的作用。将荧光蛋白如绿色荧光蛋白和目的蛋白融合表达,然后利用荧光蛋白发出的特异性荧光来观察和追踪目的蛋白分子在科学研究中得到了广泛的应用。但是荧光蛋白具有量子产量低、成熟速度受限、光谱容易受到环境因素影响及容易形成聚集

活细胞荧光成像的新型标记法及其在STED中的应用(五)

SNAP-tag技术在STED超高分辨率显微成像中的应用近十年中,显微成像技术得到了飞跃的发展,填补光学显微镜(~200 nm)到电子显微镜(~0.1 nm)分辨率缺口,打破光学衍射极限的超高分辨率显微镜也越来越趋于成熟化。其中,德国马普研究所的Stefan Hell教授凭借其研发的受激发射

原位杂交(In-Situ-Hybridization,ISH)与荧光原位杂交(二)

5.洗膜 取出塑料袋,用剪刀剪开,小心取出滤膜,立即浸入盛有2×SSC和 0.5%SDS溶液的盘中,室温下漂洗5min。再将滤膜移入2×SSC和0.1%SDS溶液中,室温下洗涤15min(轻轻摇动)。然后将滤膜移入 0.1×SSC和0.5%SDS溶液中;68℃轻轻摇动保温2h,更换缓冲液后继

概述荧光原位杂交的技术应用

  作为一种可视化特定DNA序列的分子细胞遗传学技术,荧光原位杂交技术目前被广泛应用于染色体畸变。如非整倍体、染色体重组。其基本流程包括探针标记、探针的变性、样本变性、杂交和荧光信号采集。  荧光原位杂交技术在基因定性、定量,整合、表达等方面的研究中颇具优势,目前已经被广泛应用于遗传病诊断、病毒感染

荧光原位杂交技术的应用介绍

作为一种可视化特定DNA序列的分子细胞遗传学技术,荧光原位杂交技术目前被广泛应用于染色体畸变。如非整倍体、染色体重组。其基本流程包括探针标记、探针的变性、样本变性、杂交和荧光信号采集。荧光原位杂交技术在基因定性、定量,整合、表达等方面的研究中颇具优势,目前已经被广泛应用于遗传病诊断、病毒感染分析、产

荧光原位杂交技术的应用介绍

作为一种可视化特定DNA序列的分子细胞遗传学技术,荧光原位杂交技术目前被广泛应用于染色体畸变。如非整倍体、染色体重组。其基本流程包括探针标记、探针的变性、样本变性、杂交和荧光信号采集。荧光原位杂交技术在基因定性、定量,整合、表达等方面的研究中颇具优势,目前已经被广泛应用于遗传病诊断、病毒感染分析、产

多重端粒荧光原位杂交实验(二)

(2)来自永生化淋巴细胞株1.增殖细胞,直至全培基到50mL。.2.收获细胞前的18〜24h,更换新鲜培养液。3.收获时,将20mL生长良好的细胞移到50mL离心管中。4.加200ΜL浓度为10μ×g/mL秋水酰胺,轻轻混匀。5.37℃条件下孵育50〜60min。6.180g离心5min。箱或水浴箱

核仁小RNA的功能及其在癌症研究中的作用(二)

snoRNAs在癌症中的作用snoRNAs参与的癌症的分子病理学研究snoRNAs在癌症中的作用起始于一项研究:在脑膜瘤中,与正常脑组织相比snoRNAs的表达大幅下调[20]。最近研究发现,在非小细胞肺癌中多种snoRNAs呈现出不同的表达状态[21]。其它的研究证明snoRNAs U50

荧光原位杂交技术的研究历史

荧光原位杂交技术问世于20世纪70年代后期。1977年,荧光标记的抗体被应用于识别特异性DNA—RNA杂交I I。1980年,J.G.Baunlan等将应用化学偶联的方法将荧光素结合到RNA探针上用于直接快速的特异性靶序列检测。

位势形变及其在降水诊断中的应用研究获进展

  暴雨灾害是我国主要气象灾害之一,准确的暴雨预报对于减少暴雨造成的人员伤亡和经济损失具有重要意义。为了有效提高暴雨预报水平,中国科学院大气物理研究所云降水物理与强风暴重点实验室(LACS)研究员高守亭、冉令坤等基于非均匀饱和湿空气理论和中尺度波流相互作用理论提出了一系列对暴雨有良好指示意义、物理意

抗独特型抗体及其在医学研究中的应用(三)

  (三)抗独特型抗体与肿瘤免疫  表达于肿瘤细胞的肿瘤相关抗原刺激小鼠产生相应的抗体(Ab1),用这种Ab1免疫另一小鼠可诱导产生针对Ab1的抗独型抗体,其中Ab2β(模拟肿瘤相关抗原)注入荷肿瘤的动物或病人可诱导出称之为抗-抗-独特型抗体的Ab3,由于这种Ab3与最初肿瘤相关抗原所诱导的Ab1具

抗独特型抗体及其在医学研究中的应用(一)

  针对外来抗原的抗体分子(Ab1)可变区上Id可刺激机体产生相应的抗Id抗体(Ab2)。Ab2β具有与外来抗原相似的氨基酸排列顺序或空间构型,它能够在体内模拟始动抗原的作用。应用Ab2β的这一特性,可有目的地制备Ab2β,将其作为抗原的替代物用于基础和临床医学研究。  一、抗独特抗体的制备  (一

pcr技术应用论文:荧光定量PCR技术在肿瘤研究中的应用

陈文学 邹学森 陈岳青 黄秀珍 钟礼瀑 (江西省肿瘤医院 肿瘤研究所, 江西 南昌 330029) [摘要] 荧光定量PCR技术具有简便、灵敏、准确等优点,目前已经在乙肝和性病的诊断和治疗中得到了广泛的应用,但在肿瘤方面的应用还处在研究和开发阶段。本文综述近年国内外相关荧光定量PCR技术在肿瘤研究中

荧光原位杂交在实体肿瘤学方面的应用介绍

  在FISH技术之前的所有测定基因扩增的方法,都是采用经典的分子生物学方法,与FISH相比,这些方法不仅费时费力,而且也不能在细胞水平上观察到基因扩增的状态。FISH技术更大的优点是可以在间期细胞核上观察到DNA扩增的直接证据,而且间期细胞核所显示出的扩增DNA荧光信号的数量多少及荧光强度常与DN

关于荧光原位杂交技术在血液肿瘤学方面的应用

  临床上对血液肿瘤的FISH检测主要集中在:染色体异位形成的融合基因的检测,如ber/abl 易位DNA探针、t( 15; 17)易位DNA探针和t( 18; 21 )易位DNA探针等;基因缺失检测可以发现一些关键基因的缺失,有助于疾病的诊断及预后判断;使用荧光原位杂交技术可对微小残留病灶进行检测

激光衍射技术在吸入制剂研究中的应用(二)

 图2. 鼻喷剂一个揿次整个过程 图3. 鼻喷剂一个揿次三个阶段的分别的粒度分布及累计数据 从图3也可以看出,初始阶段平均粒径在68微米左右,而稳定后粒径变小达到37微米,而消散阶段粒径进一步变大达到45微米左右。而图4则给出了连续4个揿次的喷射数据,这样不仅可以看到每个揿次的粒径变化、粒径平均值等

激光衍射技术在吸入制剂研究中的应用(二)

图10. 马尔文喷雾粒度仪测试液雾示意图 而吸入式样品池下面是接泵或者呼吸装置,这样液雾通过上面人工喉进入激光测试区域,然后通过吸入样品池被泵抽走。图11是一个持续液雾雾化的粒径分布结果,图中横坐标为时间,纵坐标为粒径大小,三种颜色的曲线分别为雾滴粒径的D10、D50以及D90。可

实时荧光定量PCR的研究进展及其应用

多聚集链反应(polymerasechainreaction,PCR)技术发明至今已近20年了,在这期间技术得到了不断的发展,近年来出现的实时荧光定量PCR(real-timequantitativePCR)技术实现了PCR从定性到定量的飞跃,它以其特异性强、灵敏度高、重复性好、定量准确、速度快、全

荧光原位杂交体植入的应用实验

荧光原位杂交体植入的应用实验PBl、PB2 标本的制备 1.在 50 mL 培养瓶准备新鲜固定液(甲醇:冰乙酸=3:1),在冰柜中保存备用。 2.将毛细吸管在小型喷灯的火焰上拉出内径约 50pm 的尖,内径太大可能会丢失极体。 3.加几滴固定液再处理预先处理过的玻片以清除可能存在的油脂或灰尘,用无尘

关于荧光原位杂交技术的应用介绍

  该技术不但可用于已知基因或序列的染色体定位,而且也可用于未克隆基因或遗传标记及染色体畸变的研究。在基因定性、定量、整合、表达等方面的研究中颇具优势。  FISH最初用于中期染色体。从正在分化的细胞核中制备的这种染色体是高度凝缩的,每条染色体都具有可识别的形态,它们染色后将显现出特征性的着丝粒位置

光散射技术及其在GPC中的应用

光散射发展史 当一束光通过一不均匀介质时,不仅可以在沿着入射光方向观察到透射光强,在入射方向以外的各个方向也能够观察到光强,这种光我们称之为散射光。1802年, Ritcher观察到了光照射金溶胶所形成的的散射光;1869年,丁达尔(Tyndall)发现当一束光通过透明的胶体是,从侧面可看到一条光柱

光散射技术及其在GPC中的应用

光散射技术及其在GPC中的应用凝胶渗透色谱(GPC)是测定高分子材料分子量及其分布最常用、快速和有效的方法。GPC分离以体积排阻为主要原理。无论是单浓度检测器,还是浓度监测器和粘度检测器联用的GPC分析结果都是相对信息,或与样品的化学结构有关或与仪器的校正曲线有关。为了精确测量分子量,GPC/SEC