浅谈全内反射荧光显微术及其在生物学中的应用

摘要:全内反射荧光显微术是近年来新兴的一种光学成像技术,它利用全内反射产生的隐失场来照明样品,从而致使在百纳米级厚的光学薄层内的荧光团受到激发,荧光成像的信噪比大大提高。近年来,全内反射荧光显微术已被生物物理学家们广泛应用于单分子的荧光成像中。本文简要介绍了全内反射荧光显微技术的基本知识及其在生物学方面的一些应用。 关键词:全内反射荧光显微术隐失波 生物单分子 引言:世界上第一台光学显微镜的产生,使人们能够观察到肉眼不能观察到的东西。经过几百年的发展,经过物理学家的不断努力,显微镜的性能不断提高,成像质量大为改进。许多新的光学显微镜也应运而生,如偏振光显微镜、相差显微镜、倒置显微镜等。但是,在细胞生物学方面传统光学显微镜始终不能解决生物样本显微中的几个重要问题:1.显微图像的信噪比不高2.光源对生物样本照射的损伤3.光学衍射所致的分辨极限(R ≥0. 61λ/nsinθ)。而这三个问题恰恰是生物单分子探测中亟待解决的问题。 ......阅读全文

延迟荧光技术及其在活体浮游植物测量中的应用(一)

摘要:本文介绍了一种活体浮游植物在线监测技术——延迟荧光测量技术及基于延迟荧光技术的DF藻类延迟荧光测量系统。活体藻类监测技术通过在线监测藻类的延迟荧光,自动记录活的浮游植物的生物量和组成,适用于浮游植物的自动在线持续监测。结合其他系统所测得的生态因子参数,分析浮游植物的季节变化模式,作为动态变化环

反射式共聚焦显微镜在皮肤恶性黑素瘤中的应用进展

皮肤恶性黑素瘤是一种起源于黑素细胞的恶性肿瘤, 占全部恶性肿瘤的 3%, 发病率占皮肤恶性肿瘤的第 3 位。 研究显示, 恶性黑素瘤的发病率呈明显上升趋势。 早期、 准确诊断可明显提高皮肤恶性肿瘤5 年存活率。 肿瘤的预后和浸润深度密切相关, 因此早期诊断恶性黑素瘤一直是研究热点。 然而恶性黑素瘤的

徕卡荧光显微镜的荧光显微术的特点

荧光显微术是普通显微术的重大发展。它具有独特的优越性。荧光显微术是在黑暗的背景下观察标本的彩色图像,有良好的反衬,故观察清楚、方便,易于鉴别,眼睛也不易疲劳。由于荧光染色素的浓度极稀(仪1:100000)便能发出明亮的荧光,因此一般油机体众说是无毒的,为活体观察,如研究功能器官的过程和细微结构,某些

扫描探针显微镜及其在纳米结构材料表征中的应用

p.p1 {margin: 0.0px 0.0px 0.0px 0.0px; line-height: 19.0px; font: 13.0px 'Helvetica Neue'}      扫描探针显微镜(scanningprobemicroscopy,SPM)是纳米材料表征中最常用、最有力的工具

非损伤微测技术及其在细胞生物学研究中的应用

非损伤微测技术及其在细胞生物学研究中的应用——(1)技术简介作者:旭月(北京)科技有限公司 美国扬格非损伤技术中心联系人:宋瑾,jin@youngerusa.com,010-82622628(电话),010-82622629(传真) 摘要:非损伤微测技术是一种选择性微电极技术,可以不损伤样品而获得进

各荧光检测方法简介(流式、荧光显微镜、共聚焦、全内反...

很多细胞实验都要检测荧光,为方便大家选择合适的方法,在此简单说一下各种荧光检测方法的特点。不足的地方,欢迎大家补充:1、流式,优点是速度快,非常适合做大数量统计,且样品只被检测一次,完全不用担心荧光淬灭的问题。缺点是只能检测荧光的有无、强度大小,无法提供空间定位信息,无法做荧光定位变化的实验;由于样

活细胞荧光成像的新型标记法及其在STED中的应用(二)

图5.EGFR在细胞中转运的实时记录。(a)示意图,用于解释如何利用FAPL探针来实时追踪EGFR相关的细胞膜转运过程。(b)COS7细胞中表达的EGFR用DRBG-488标记(绿色),溶酶体用lysosometracker(红色)标记。(c)对表达SNAP-EGFR–CFP的MDCK细胞进行共聚焦

活细胞荧光成像的新型标记法及其在STED中的应用(三)

细胞骨架如微管、微丝等一直是生命科学研究的重点。近期Johnsson等科学家将SiR直接标记于与微管和微丝分别特异性结合的小分子docetaxel和jasplakinolide,即形成SiR-tubulin和SiR-actin,实现了在不对细胞或组织进行任何转染或基因组修饰的条件下直接进行活细胞成像

活细胞荧光成像的新型标记法及其在STED中的应用(四)

荧光显微镜在研究活细胞中蛋白质分子的定位、相互作用及动力学等生命活动中起着不可或缺的作用。将荧光蛋白如绿色荧光蛋白和目的蛋白融合表达,然后利用荧光蛋白发出的特异性荧光来观察和追踪目的蛋白分子在科学研究中得到了广泛的应用。但是荧光蛋白具有量子产量低、成熟速度受限、光谱容易受到环境因素影响及容易形成聚集

活细胞荧光成像的新型标记法及其在STED中的应用(一)

如何免除活细胞标记中的清洗(washout)步骤?SNAP-tag等标记方法为活细胞显微成像带来了革命性的变化,也因此被Nature杂志评为2004年最热门的科研技术之一。但是传统的SNAP-tag标记仍然有很大的缺陷。将带有荧光探针的底物BG加入细胞后需要多次清洗细胞,才能将未结合的BG去除从而消

活细胞荧光成像的新型标记法及其在STED中的应用(五)

SNAP-tag技术在STED超高分辨率显微成像中的应用近十年中,显微成像技术得到了飞跃的发展,填补光学显微镜(~200 nm)到电子显微镜(~0.1 nm)分辨率缺口,打破光学衍射极限的超高分辨率显微镜也越来越趋于成熟化。其中,德国马普研究所的Stefan Hell教授凭借其研发的受激发射

显微切割术的应用

显微切割术的特点是可从构成复杂的组织中获得某一特定的同类细胞或单个细胞,尤其适用于肿瘤的分子生物学研究,如肿瘤的克隆性分析,肿瘤发生和演进过程中各阶段细胞基因改变的比较研究和肿瘤细胞内某些酶活性的定量检测等。该技术的不足之处是使用手工操作的技术难度大;用LCM虽然操作简便,耗时少,取材准确,但需特殊

荧光物质在生物学研究中的应用

  生物分子标记:荧光物质如荧光蛋白(GFP)和各种有机荧光染料常用于标记特定蛋白质、核酸等生物大分子。这种标记技术使得研究人员能够在细胞内或组织中追踪这些分子的位置和运动。  细胞结构与功能分析:荧光标记技术可以用于研究细胞器的结构与功能,例如用不同颜色的荧光探针对线粒体、内质网等进行标记,观察它

3D打印技术在髋臼骨缺损全髋翻修术中的应用

随着我国人口老龄化进程的加快、关节假体材料与设计的不断革新,初次髋关节置换数量迅速增长,随之而来的髋关节翻修术也与日俱增。髋关节翻修的常见原因包括假体无菌性松动、感染、聚乙烯内衬磨损、骨溶解、假体周围骨折等。在髋关节翻修术中,骨缺损的处理可谓是最具挑战性的难题。骨缺损以髋臼侧多见,髋臼侧骨性结构缺失

显微CT在药品中的应用

前言在药物传递系统中,了解、评估和控制材料分布的能力对于药物科学中的配方开发、工艺设计和最佳治疗功能至关重要。药品中物质空间分布,特别是结构复杂的物质空间分布,对药物释放具有特定的功能和意义。从本质上讲,药物传递系统的开发需要解决有效药物成分(API)和辅料的结构设计和空间分布控制,两者都直接关系到

流式细胞术在移植中的应用

实验步骤             展开

流式细胞术在移植中的应用

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激光粒度仪在粒度检测中的应用浅谈

谈到粒度,激光粒度仪怎能缺席?目前,在各行各业的粒度检测领域,激光粒度仪应用广泛。从传统的石油化工、建材家居,到制药、食品、环保,甚至在新兴的锂电、半导体、石墨烯等行业,都能看到激光粒度仪活跃的身影。那么激光粒度仪在粒度检测中到底是怎样应用的呢?我国颗粒学泰斗专家周素红研究员的论述,无疑将给我们带来

浅谈激光粒度仪在烟气测试中的应用

       我国的能源构成以煤炭为主,其消费量占一次能源总消费量的70%左右,这种局面在今后相当长的时间内不会改变。火电厂以煤作为主要燃料进行发电,煤直接燃烧释放出大量SO2,造成大气环境污染,且随着装机容量的递增,SO2的排放量也在不断增加。加强 环境保护工作是我国实施可持续发展战略的重要保证。

激光粒度仪在粒度检测中的应用浅谈

编者按:谈到粒度,激光粒度仪怎能缺席?目前,在各行各业的粒度检测领域,激光粒度仪应用广泛。从传统的石油化工、建材家居,到制药、食品、环保,甚至在新兴的锂电、半导体、石墨烯等行业,都能看到激光粒度仪活跃的身影。那么激光粒度仪在粒度检测中到底是怎样应用的呢?我国颗粒学泰斗专家周素红研究员的论述,无疑将给

浅谈重镇药在方剂中的配伍应用

  重镇药在《神农本草经》中多被列为上、中二品,主要为金石和介壳类药物,如朱砂、紫石英、钟乳石、禹余粮、赤石脂、磁石、代赭石、龙骨、牡蛎、石决明、珍珠母、琥珀等。此类药物虽然药性有寒热之异,但均以质重沉降下行,镇纳潜降为功能特点,部分药物还具有固涩之能,在古方中被广泛使用,且受到一些医家的推崇。

激光扫描共聚焦显微镜在细胞生物学中的应用

激光扫描共聚焦显微镜是近十年发展起来的医学图像分析仪器,与传统的光学显微镜相比,大大地提高了分辨率,能得到真正具有三维清晰度的原色图像。并可探测某些低对比度或弱荧光样品,通过目镜直接观察各种生物样品的弱自发荧光。能动态测量Ca2+ 、pH值,Na+、Mg2+等影响细胞代谢的各种生理指标,对细胞动力

荧光镜检术荧光显微镜

荧光镜检术-荧光显微镜荧光镜检术是用短波长的光线照射用荧光素染色过的被检物体,使之受激发后而产生长波长的荧光,然后观察。荧光镜检术广泛应用于生物,医学等领域。1.荧光镜检术一般分为透射和落射式两种类型。(1)透射式:激发光来自被检物体的下方,聚光镜为暗视野聚光镜,使激发光不进入物镜,而使荧光进入物镜

平面反射镜在投影仪中的应用

  投影仪的平面反射镜是由平板玻璃砖抛光后真空镀膜而成,要特别注意维护和保养。  投影仪上的平面反射镜是由平板玻璃砖抛光后真空镀膜而成。表面非常平整光滑,光洁度非常高。光的反射率在85%以上。因而光损失较少,反射的图像不变形走样,是投影仪上重要的光学元件之一。在使用过程中要特别注意维护与保养。其维护

无刷电机在全温摇床中的应用

全温摇床作为大型冷冻摇床设备在,科研、教育、生物、农业等领域的应用非常广泛,对细胞培养、发酵、杂交、生物化学及酶和细胞组织的研究起到非常重要的作用,是实验室中必不可少的实验设备之一。它主要集恒温培养与振荡器于一体,具有一机两用的功能。那么它的振荡功能就显的尤为重要。其中非常重要的一个配件就是电机,下

光散射技术及其在GPC中的应用

光散射发展史 当一束光通过一不均匀介质时,不仅可以在沿着入射光方向观察到透射光强,在入射方向以外的各个方向也能够观察到光强,这种光我们称之为散射光。1802年, Ritcher观察到了光照射金溶胶所形成的的散射光;1869年,丁达尔(Tyndall)发现当一束光通过透明的胶体是,从侧面可看到一条光柱

光散射技术及其在GPC中的应用

光散射技术及其在GPC中的应用凝胶渗透色谱(GPC)是测定高分子材料分子量及其分布最常用、快速和有效的方法。GPC分离以体积排阻为主要原理。无论是单浓度检测器,还是浓度监测器和粘度检测器联用的GPC分析结果都是相对信息,或与样品的化学结构有关或与仪器的校正曲线有关。为了精确测量分子量,GPC/SEC

光散射技术及其在GPC中的应用

光散射发展史 当一束光通过一不均匀介质时,不仅可以在沿着入射光方向观察到透射光强,在入射方向以外的各个方向也能够观察到光强,这种光我们称之为散射光。1802年, Ritcher观察到了光照射金溶胶所形成的的散射光;1869年,丁达尔(Tyndall)发现当一束光通过透明的胶体是,从侧面可看到一条光柱

蛋白酶及其在食品中的应用

1 蛋白酶的生产现状蛋白酶是最重要的一种工业酶制剂,能催化蛋白质和多肽肽键水解。它广泛存在于动物内脏、植物茎叶、果实和微生物中。各种生物体都能合成它,但唯有微生物蛋白酶具有生产价值,蛋白酶也是研究的比较深入的一种酶,已做成结晶或得到高度纯化物的蛋白酶达100多种,其中不少酶的一级结构以及立体结构也已