冻存活检组织实验
实验方法原理 切取肿瘤，将肿瘤块浸于 DMSO，然后分量冻存于液氮中。实验材料 活检标本试剂、试剂盒 DBBS收集液二甲基亚砜仪器、耗材 塑料冻存管解剖刀解剖镊培养皿实验步骤 一、材料无菌 1. 活检标本 2. 1.2 ml 塑料冻存管（Nagle Nunc）3. DBBS4. 收集液5. 二甲基亚砜（如果放在一个无菌容器中，为半灭菌的）6. 器皿（解剖刀、解剖镊、培养皿等，同为原代培养）二、操作步骤1. 除去坏死组织、脂肪和纤维组织后，将肿瘤切成约 1~2 mm 的小块。同原代培养，将肿瘤块放入 DBBS 中浸洗。2. 在每个冻存管中放入 4 或 5 个肿瘤块。3. 将 1 ml 含有 10%DMSO 的生长培养液加入到放有肿瘤块的冻存管中，在室温下放置 30 min。4. 将冻存管按 1°C/min 冷冻（见方案 20.1），然后将......阅读全文
冻存活检组织实验
实验方法原理 切取肿瘤，将肿瘤块浸于 DMSO，然后分量冻存于液氮中。实验材料 活检标本试剂、试剂盒 DBBS收集液二甲基亚砜仪器、耗材 塑料冻存管解剖刀解剖镊培养皿实验步骤 一、材料无菌 1. 活检标本 2. 1.2 ml 塑料冻存管（Nagle Nunc）3. DBBS4. 收集液5. 二甲
冻存活检组织实验
实验方法原理切取肿瘤，将肿瘤块浸于 DMSO，然后分量冻存于液氮中。实验材料活检标本试剂、试剂盒DBBS收集液二甲基亚砜仪器、耗材塑料冻存管解剖刀解剖镊培养皿实验步骤一、材料无菌 1. 活检标本 2. 1.2 ml 塑料冻存管（Nagle Nunc）3. DBBS4. 收集液5. 二甲基亚砜
新鲜组织冻存SOP
（1）冰冻当天进入医院局域网，查询当日手术间冰冻安排表，大致了解当日的冰冻情况，并提前通知当日负责冰冻送片的初检医生，避免遗漏。（2）取材前确定标本冰冻报告已发出，核对标本病理号、住院号，准确记录其病理号、住院号、姓名（至少有其中2项）于冻存组织登记本上。（3）在新鲜标本专用取材台上取材，并使用专用
冻存组织用EP管好还是用细胞冻存管好
1. 新鲜组织标本放入液氮要用冻存管，EP管密封性不好，液氮容易漏进去，而且也耐受不了-198°的低温，容易爆管2. 普通冻存管就可以，不用特意再去灭酶处理，因为RNA酶污染主要是内源性的，外界的很少，主要来自于人的皮肤、呼吸，戴好口罩手套就可以了，冻存管这些，影响很小忽略不计3. 组织在液氮里冻硬
细胞冻存实验
方案20.1 冷冻细胞 实验方法原理 细胞生长至对数晚期，以培养基制备高浓度细胞悬液，加入细胞保护剂，等份转移至冻存管中，缓慢冷
细胞冻存实验
实验方法原理 在不附加任何条件下直接冻存细胞时，细胞内外环境中的水会结成冰晶，能导致细胞发生一系列变化，如机械损伤、电解质升高、渗透压改变、脱水、pH 改变、蛋白质变性等等，最终导致细胞死亡。但如向细胞培养液中加入保护剂甘油或二甲基亚砜（DMSO），可使冰点降低，在缓慢的冻结条件下，能使细胞内水分在
细胞冻存实验
细胞冻存实验可以用于：（1）妥善贮存细胞；（2）维持细胞生存；（3）节约人力、物力、时间及减少污染机会；（4）维持细胞发生遗传性状的稳定。实验方法原理细胞生长至对数晚期，以培养基制备高浓度细胞悬液，加入细胞保护剂，等份转移至冻存管中，缓慢冷冻。细胞冻存时向培养基中加入保护剂，即终浓度5%.15%的甘
细胞冻存实验
方案20.1 冷冻细胞 实验方法原理 细胞生长至对数晚期，以培养基制备高浓度细胞悬液，加入细胞保护剂，等份转移至冻存管中，缓慢冷
细胞冻存实验
实验方法原理细胞生长至对数晚期，以培养基制备高浓度细胞悬液，加入细胞保护剂，等份转移至冻存管中，缓慢冷冻（图 20.8）。细胞用胰酶消化后，加入含有细胞保护剂的培养基，分装至冻存管中，然后将其夹到铝条上，用纸质管包裹，放入隔热储存管中。将储存管及其内容物于-70℃或-80℃存放4h或过夜，最后将含有
细胞的冻存与复苏实验_液氮冻存法
实验方法原理目前长时间保存细胞的方法是将细胞低温冻结保存在液氮中（－196 ℃），保存时间可长达一年甚至几年，用时解冻，大多数细胞仍能生长繁殖，为妥善起见，细胞冻存一年后应复苏培养后再冻存。冻存细胞时应加入保护剂，否则，细胞内外的水会结成冰晶，使细胞发生机械损伤。加入保护剂后，可使冰点降低，在缓慢冻
复苏冻存细胞实验
方案20.2 复苏冻存细胞实验 实验方法原理 快速复苏细胞，缓慢稀释，以高细胞密度重新接种（图20.9）。
复苏冻存细胞实验
实验方法原理快速复苏细胞，缓慢稀释，以高细胞密度重新接种（图20.9）。实验步骤材料无菌培养瓶（如果需要离心时）生长培养基吸量管，1ml，10ml注射器和19号针头（如果你使用玻璃冻存管）非灭菌保护性手套和面罩37℃无菌水，10cm深，盛于清洁、用乙醇擦拭过的带盖的水桶中镊子70%乙醇棉签1%萘黑（
人体活检组织实验
实验方法原理 与医院人员协商，提供已标记的装有培养基的容器，安排好从手术室或病理医生处取样品。仪器、耗材 样品管实验步骤 1. 提供含收集培养基的容器，标注明确，送进手术准备室或病理实验室。2. 做好准备，随时取材。3. 手术后装入收集容器，或派人收集后迅速送达，并告知确切的切取时间。4.
细胞冻存和复苏实验
细胞冻存和复苏可以：（1）用于生物学保种；（2）用于医学上干细胞研究；（3）用于传代培养。实验方法原理细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融，实验证明这样可以最大限度的保存细胞活力。目前细胞冻存多采用甘油或二甲基亚砜作保护剂，这两种物质能提高细胞膜对水的通透性，加上缓慢冷冻可使细胞内的水分渗出细胞外，减
细胞冻存和复苏实验
细胞冻存和复苏 实验方法原理 细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融，实验证明这样可以最大限度的保存细胞活力。目前细胞冻存多采用甘油或二甲基亚砜作保护剂，这两种
细胞冻存和复苏实验
细胞冻存和复苏 实验方法原理 细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融，实验证明这样可以最大限度的保存细胞活力。目前细胞冻存多采用甘油或二甲基亚砜作保护剂，这两种
细胞冻存与复苏实验
实验原理：冻存和复苏的原则：慢冻快融。当细胞冷到零度以下，可以产生以下变化：细胞器脱水，细胞中可溶性物质浓度升高，并在细胞内形成冰晶。如果缓慢冷冻，可使细胞逐步脱水，细胞内不致产生大的冰晶；相反，结晶就大，大结晶会造成细胞膜、纲胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重
细胞冻存的实验器材介绍
（一）仪器1. 净化工作台2. 离心机3. 恒温水浴箱4. 冰箱（4℃、-20℃、-70℃）5. 倒置相差显微镜6. 培养箱7. 液氮冰箱（二）玻璃器皿1. 吸管（弯头、直头）2. 培养瓶3. 玻璃瓶（250ml、100ml）4. 废液缸（三）塑料器皿1. 吸头2. 枪头3. 胶塞4. 移液管（10
细胞冻存步骤的专业实验流程
我们知道，在细胞培养 检测实验在实验仪器、培养基等等工作上都要耗费不少的人力和体力。好在很久以前就有高人发明了细胞保存这个实验步骤，将暂时多出来的细胞冰冻保存，以极大程度保存细胞活力。一、细胞冷冻保存1. 材料：生长良好之培养细胞、新鲜培养基、DMSO (Sigma D-2650)、无菌塑料冷冻保存
脐血来源多能祖细胞的冻存与复苏实验_CBMNCs冻存
实验材料CB-MNCs试剂、试剂盒FBS二甲基亚砜（DMSO)仪器、耗材冻存管慢速冷冻盒（如Mr.Frosty程序降温盒）或控速降温仪耐液氮储存盒实验步骤(a)准备冻存液：90%FBS+10%DMSO;放冰上或4℃冰箱冷却，至少30min。(b)CB-MNCs细胞计数。(c)用冷的冻存液重悬细胞，调
细胞的冻存
实验方法原理 已长满的细胞经胰蛋白酶处理后，重悬于冻存液中。两种试剂即甘油和 DMSO 是常用的细胞保护剂，它们在细胞保存液中起到防止细胞内冰晶形成的目的。血清的浓度经常增加至 20%。实验步骤 1) 吸干已长满细胞的细胞瓶内培养液。细胞不应在高密度状态下冻存，并应在冻存的 24 小时内换液。2)
细胞的冻存
细胞的冻存 实验方法原理 已长满的细胞经胰蛋白酶处理后，重悬于冻存液中。两种试剂即甘油和 DMSO 是常用的细胞保护剂，它们在细胞保存液中起到防止细胞内冰晶形
如何冻存细胞
一、材料 （一）仪器 1.净化工作台 2.离心机 3.恒温水浴箱 4.冰箱（4℃、-20℃、-70℃） 5.倒置相差显微镜 6.培养箱 7.液氮冰箱 （二）玻璃器皿 1.吸管（弯头、直头） 2.培养瓶 3.玻璃瓶（250ml、100ml） 4.废液缸 （三）塑料器皿 1
细胞的冻存
细胞的冻存实验主要用于：（1）长时间保存细胞系；（2）防止细胞保存液内产生冰晶。实验方法原理已长满的细胞经胰蛋白酶处理后，重悬于冻存液中。两种试剂即甘油和 DMSO 是常用的细胞保护剂，它们在细胞保存液中起到防止细胞内冰晶形成的目的。血清的浓度经常增加至 20%。实验材料细胞试剂、试剂盒胰蛋白酶冻存
如何冻存细胞
一、材料 （一）仪器 1.净化工作台 2.离心机 3.恒温水浴箱 4.冰箱（4℃、-20℃、-70℃） 5.倒置相差显微镜 6.培养箱 7.液氮冰箱 （二）玻璃器皿 1.吸管（弯头、直头） 2.培养瓶 3.玻璃瓶（250ml、100ml） 4.废液缸 （三）塑料器皿 1
MSCs培养物的扩增和冻存实验_冻存间充质干细胞的复苏
实验材料MSCs试剂、试剂盒无菌CCMPBSA仪器、耗材塑料组织培养皿 15 cm微量移液器枪头用于Eppendorf P10P100和P1000非灭菌调至37°C的FisherScientificIsotemp水浴箱实验步骤(a)准备2个15 cm培养皿，加人25 ml预热的CCM。(b)从液氮罐
MSCs培养物的扩增和冻存实验_间充质干细胞（MSCs)的冻存
实验材料MSCs试剂、试剂盒α-MEMFBS组织培养级二甲亚砜（DMSO)冻存液：含30%FBS和5%DMSO的α-MEM。过滤除菌（为进一步确保安全和使冻存液澄清。高浓度血清和DMSO混合时冻存液会变混浊）仪器、耗材聚丙烯离心管15ml和50mlPBSA0.22μm滤膜的真空过滤器50ml冻存管2
什么是细胞冻存？细胞冻存的好处有那些
细胞冻存是将细胞放在低温环境，减少细胞代谢以便长期储存的一种找术。其好处是可以存储自己免疫能力比较好的细胞为以后的健康做储备。
MSCs培养物的扩增和冻存实验
间充质干细胞（MSCs)的传代培养 间充质干细胞（MSCs)的冻存 冻存间充质干细胞（MSCs)的复苏 实验方法原理
MSCs培养物的扩增和冻存实验
实验方法原理 实验材料 MSCs试剂、试剂盒 无菌完全培养培养基（CCM）、PBSA、胰蛋白酶 EDTA仪器、耗材 聚丙烯离心管15 mL和50 mL、塑料组织培养皿直径15 cm、塑料微量移液器枪头实验步骤 (a)检査所得的MSCs。如果培养物中小的、贴壁、纺锤形的成纤维细胞样细胞汇合至60%时，