外显子捕获与扩增（二）
材料缓冲液与溶液按合适比例稀释贮存液。无二价阳离子的磷酸缓冲液（PBS）酶及缓冲液胰酶-EDTA 溶液核酸与寡核苷酸DNA用于转染的质粒 DNA 制备见本方案阶段 1, 步骤 10~12。用作对照的质粒载体（步骤 3)培养基含 10% 热灭活胎牛血清的 Dulbecco's modified Eagle's 培养基（DMEM)离心转头Sorvall H1000B 转头或等同规格转头专用设备电穿孔转染设备以及 0.4 cm 宽的电转染槽组织培养平皿（100 mm)宽口加样器头细胞与组织COS-7 细胞细胞须在含 10% 热灭活胎牛血清的 DMEM 培养至 75%—85% 致密。关于细胞的处理细节，包括胰酶消化，见 Spector 等（1998b)。方法1. 用无二价阳离子的 PBS 洗涤单层 C0S-7 细胞。通过胰酶-EDTA 处理将细胞从平皿表面消化下来。4°C、250 g(Sorvall H1000B 转头上......阅读全文
新方法！可实现常温常压下二氧化碳捕获与释放
从中国科学技术大学获悉，该校的刘波教授和南方科技大学的徐强教授与国际研究团队合作，利用二氧化碳作为客体分子首次模拟了二氧化碳水合物结构，成功地利用廉价的硫酸胍与二氧化碳共结晶形成了稳定的包合物，实现了二氧化碳的可逆捕获与释放。这一研究成果在《细胞报告物质科学》上发表，有望成为一种高潜力的碳捕获和存储
DNA靶向测序panel：七个你不可不知的问答
在之前举办的NGS系列讲座中，我们邀请专家为您介绍了从样本制备到数据解读报告的全面NGS技术应用。讲座收到了众多反馈与咨询，在此我们总结出最受关注的7大问题，与您分享。1 QIAGEN的靶向基因扩增试剂盒能用在哪些NGS平台？GeneRead DNAseq Targeted Panels V2适用于
新方法准确检测Lynch综合征相关突变
贝勒医学院等机构的研究人员近日开发出一种更准确的方法，检测PMS2基因中的突变。这个基因的突变与遗传性非息肉结肠直肠癌（Lynch综合征）和Turcot综合征相关。研究结果在线发表于《the Journal of Molecular Diagnostics》上。 为了提高PMS2基因突变检测的
PCR扩增产物鉴定与纯化
实验原理琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR扩增产物。（原理参照琼脂糖凝胶电泳检测DNA实验）本实验使用了TaKaRa公司的胶纯化试剂盒（Agarose Gel DNA Purification Kit），该试剂盒是从琼脂糖凝胶中回收并纯化DNA片段的试剂盒。试剂盒采用了独特的凝胶融解系统，结合DNA制
PCR扩增产物鉴定与纯化
实验原理 琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR扩增产物。（原理参照琼脂糖凝胶电泳检测DNA实验） 本实验使用了TaKaRa公司的胶纯化试剂盒（Agarose Gel DNA Purification Kit），该试剂盒是从琼脂糖凝胶中回收并纯化DNA片段的试剂盒。试剂盒采用了独特的凝胶融解系统，结合DN
PCR扩增产物鉴定与纯化
实验原理 琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR扩增产物。（原理参照琼脂糖凝胶电泳检测DNA实验） 本实验使用了TaKaRa公司的胶纯化试剂盒（Agarose Gel DNA Purification Kit），该试剂盒是从琼脂糖凝胶中回收并纯化DNA片段的试剂盒。试剂盒采用了独特的凝胶融解系统，结合DN
PCR扩增产物鉴定与纯化
实验概要通过琼脂糖凝胶电泳检测PCR扩增产物，并对获得的产物进行割胶纯化回收，为接下来的DNA重组和转化实验提供外源DNA片段。实验原理琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR扩增产物。（原理参照琼脂糖凝胶电泳检测DNA实验） 本实验使用了TaKaRa公司的胶纯化试剂盒（Agarose Gel DNA Purifi
基因扩增检验的实验室规范（二）
(三)扩增区下述工作在本区内进行：DNA或cDNA扩增。此外，已制备的DNA模板和合成的cDNA(来自样本制备区)的加入和主反应混合液(来自试剂贮存和制备区)制备成反应混合液等也可在本区内进行。在巢式PCR测定中，通常在第一轮扩增后必须打开反应管，因此巢式扩增有较高的污染危险性，第二次加样必须在本区
多孔高分子材料捕获与转化二氧化碳研究获进展
近日，中科院大连化学物理研究所材料的动力学模拟与设计研究组（11T4组）学生谢勇、王婷婷等在邓伟侨研究员的带领下，开发出一种共轭微孔高分子材料，能够在常温常压下捕获可观的CO2，同时可在常温常压下催化CO2与环氧烷烃反应，生成高附加值的环碳酸酯。该成果发表于最近出版的N
中国首发纳米孔RNA直接测序揭示其在全长转录本中的作用
近日发表在RNA Biology上的研究中，来自中国科学院北京生命科学研究院、动物研究所及中国科学院大学等多家单位的科学家们首次通过5’-Cap捕获法对蝗虫的 RNA直接测序，揭示了Piwi 外显子化模式的广泛建立以及蝗虫转录组中的转座子（TEs）对RNA剪接的重要作用。 转座子（TEs）在后
单克隆抗体捕获步骤工艺开发的快速入门（二）
基本的简化工艺开发 上样准备-样品在上样到MabSelect SuRe层析柱前必须经过过滤。至少必须使用无菌过滤器；另外，在无菌过滤前可以使用吸附深度过滤器。在细胞培养物收获后，应该尽快完成运行。在细胞培养物运行前需要被保存的情况，应该经过无菌过滤并保存在4℃，或者冷冻保存（如可能）。 Run #0
空气捕获二氧化碳成本大降
一家DAC工厂中的风扇墙。图片来源：碳工程公司从空气中提取二氧化碳并利用它制造合成燃料似乎是应对气候变化的最终解决方案：人们可以简单地一次又一次地利用同样的二氧化碳分子，而不是通过化石燃料向大气中增加更多的二氧化碳。但是这项技术是很昂贵的——根据最近的估计，捕获每吨二氧化碳大约需要600美元。
登革热IgM－ELISA试剂盒说明书(捕获法)（二）
实验步骤将所有的试剂成分和样品都平衡至室温。实验前反复倒置以混合试剂和样品。试剂准备： 1）1X洗涤液的配制：用生物学或高纯度水将10倍浓缩型的洗涤液稀释成1X的洗涤液。为了制备即用型的洗涤缓冲液，我们可以将120ml 10倍浓缩的洗涤液加入到1080ml蒸馏水或去离子水中，冲洗掉所有晶体，
外显子应用机理
应用聚合酶链反应-单链构象多态性(polymerasechainreaction-singlestrandconformationpolymorphsim,PCR-SSCP)及DNA直接测序技术检测68例SAD患者和65名正常老年人的早老素-1基因第5外显子。
什么是外显子？
断裂基因中的编码序列。外显子(expressed region)是真核生物基因的一部分。它在剪接(Splicing)后会被保存下来,并可在蛋白质生物合成过程中被表达为蛋白质。外显子是最后出现在成熟RNA中的基因序列,又称表达序列。
Science：外显子组测序让“生命密码”解读更容易
简单来说，外显子组就是遗传代码中蛋白质编码的组分，占整个基因组的1%-2%。测序仪每跑一次仅能读取一定数量的碱基，但通过测序外显子组，研究人员能更快地生成更多的碱基。与全基因组相比，它也可以用更低的成本做出更好的分辨率。 位于荷兰内梅亨的拉德伯德大学医学中心转译基因组学教授 J
NimbleGenSeqCap用于加拿大一4000外显子组测序项目
最近罗氏NimbleGen的SeqCap EZ Exome产品被加拿大多伦多一医院基因组服务中心选中，用于一个癌症生物标记物研究。该中心将开展一项4000个外显子组测序项目，用于发现癌症相关的生物标记物。 第一批购买的产品还包括一台Caliper Sciclone NGS Work
目的基因片段的PCR扩增与克隆
1.PCR技术 PolymeraseChainReaction聚合酶链反应它是一种模拟天然DNA复制过程，在有DNA模板、DNA聚合酶（Taq酶）、RNA引物和四种dNTP的情况下，通过高温变性（90℃－95℃，1－2min）,低温退火（25℃－37℃，1－2min）,中温延伸（60℃－75℃，90
mRNA－显示蛋白的筛选与扩增实验
基本方案 实验方法原理 实验材料 纯化的 mRNA 显示蛋白
mRNA－显示蛋白的筛选与扩增实验
实验方法原理 实验材料 纯化的 mRNA 显示蛋白试剂、试剂盒 NaOHHClNaClMgCl2 乙醇1-丁醇苯酚 氯仿 异戊醇EDTAPCR 缓冲液ATP 琼脂糖ATP-适配体筛选结合缓冲液ATP-适配体筛选洗脱缓冲液鲑精 DNABSA3'引物5'引物Taq DNA 聚合酶仪器、耗
恒温核酸扩增技术与传统PCR对比
和传统的PCR技术相比，恒温核酸扩增不仅仅是缩短了核酸扩增的时间，更重要的是核酸扩增摆脱了对硬件的束缚。PCR技术原理是利用94℃高温使DNA双链解开，并在耐高温的DNA聚合酶的作用下扩增DNA片段。PCR反应至少需要2个不同的温度使DNA片段得到特异性的扩增。恒温核酸扩增是利用各种酶与DNA之
mRNA－显示蛋白的筛选与扩增实验
实验材料纯化的 mRNA 显示蛋白试剂、试剂盒NaOHHClNaClMgCl2乙醇1-丁醇苯酚 氯仿 异戊醇EDTAPCR 缓冲液ATP 琼脂糖ATP-适配体筛选结合缓冲液ATP-适配体筛选洗脱缓冲液鲑精 DNABSA3'引物5'引物Taq DNA 聚合酶仪器、耗材凝胶过滤柱实验步骤
基因扩增仪的用途与技术特性
用途 用于科研及临床的基因扩增 定性PCR基因扩增 荧光/酶免终点定量DNA基因扩增 基因芯片等其他基因分析应用的基因扩增 适合国内外各种PCR试剂盒传染病类（各型肝炎病毒、结核杆菌、STD性传播疾病、优生优育、支原体、衣原体、寄生虫等）、肿瘤类（P53、幽门螺杆菌等）、科研类（遗传鉴
应用非标记探针法进行基因分型（三）
高分辨率熔解 在高分辨率熔解仪器HR-1（爱荷华科技，盐湖城，犹他州）上进行分析，将LightCycle毛细管加入HR-1中，0.3℃/s加热。主要的实验中，RET外显子的扩增及非标记探针熔解数据从60℃到95℃采集。主要实验分析了每个外显子的扩增子及探针数据，除了外显子14。因为所有报道的外显子1
临床基因扩增检验实验室工作规范（二）
(四)扩增产物分析区下述操作在本区内进行：扩增片段的测定。核酸扩增后产物的分析方法多种多样，如膜上或微孔板上探针杂交方法(同位素标记或非同位素标记)、琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、Southern转移、核酸测序方法等。目前国内的商品试剂盒绝大部分均采用非同位素标记的微孔板上探针杂交方法，即PC
中英碳捕获与封存技术联合研究项目征集建议
截止日期：2010年4月15日下午4点。 英国工程与自然科学研究理事会(EPSRC)领导下的英国研究理事会能源项目已确定中国为国际合作的优先国家。这项活动根据之前两个在可再生能源和清洁矿物燃料领域进行合作研究的提议，由EPSRC和中国自然科学基金委员会(NSFC)联合发布。 我们希望
超薄多孔新材料轻松“捕获”二氧化碳
从天津大学获悉，该校化工学院王志教授团队及其合作者在世界上首次实现了多孔材料膜的超薄大面积制备，可更为容易地实现二氧化碳的分离与捕集，这一研究不仅有助于缓解温室效应气体排放，也为气体分离技术开辟了一个全新领域。英国伦敦时间11月19日下午，该科研成果在《自然·材料》在线发表。 据介绍，二氧化碳
新材料可从湿气中捕获二氧化碳
一个由瑞典和韩国研究人员组成的国际研究团队在最新一期《科学》杂志上发表报告称，他们研制出一种微孔晶体材料，能够比已有材料更有效地捕捉潮湿气体中的二氧化碳。这种新材料或是对抗气候变化的一种有效工具。 减缓气候变化的一个办法是从空气中捕获二氧化碳。到目前为止，这种方法实施起来还很难，因为水的存在
Nature－Methods：极准确的新测序技术
传统的高通量测序会产生不少错误，掩盖基因组中的罕见突变。前不久科学家们开发了一种新测序法，能够成功从背景噪音中分离出信号，实现极为准确的测序。 肿瘤是异质性细胞的混合体，测序可以检测其中的罕见突变，但成本较高而且容易出现错误。华盛顿大学的研究团队为此开发了新测序技术，将靶序列纯化与高精度的DN
基因扩增PCR的扩增与克隆方法及一些使用的小建议
基因扩增PCR主要有冰箱、超净台、加样器、混匀器、天平等。加样器、天平除了要专用外，还应有定期校准。试剂分装应在超净台中进行，扩增反应混合液应使用分子生物学级的，试剂制备好后应有质检：一是否有污染、二是检测试剂的扩增效果。 基因扩增PCR的扩增与克隆方法： ①引物的序列应位于基因组DNA的高度保守