单克隆抗体捕获步骤工艺开发的快速入门（二）
基本的简化工艺开发 上样准备-样品在上样到MabSelect SuRe层析柱前必须经过过滤。至少必须使用无菌过滤器；另外，在无菌过滤前可以使用吸附深度过滤器。在细胞培养物收获后，应该尽快完成运行。在细胞培养物运行前需要被保存的情况，应该经过无菌过滤并保存在4℃，或者冷冻保存（如可能）。 Run #0–空白运行-为了去除非共价固定的配基，应该在新的MabSelect SuRe层析介质上第一轮运行前进行空白运行，从而减少层析期间的配基泄露。上面列出的层析方法的所有阶段应使用两种变化-首先，在上样阶段应使用平衡缓冲液（即不含蛋白质），其次，空白运行的洗脱阶段应被设置为3个柱体积，且不受监测功能的控制。 Run #1 –上样条件-下一个实验应该运行以确定MabSelect SuRe层析柱在2.4-4.8分钟保留时间内对你的Mab的动态结合载量（DBC）。按照上述程序并使层析柱过载达到50 g/L......阅读全文
单克隆抗体捕获步骤工艺开发的快速入门（二）
基本的简化工艺开发 上样准备-样品在上样到MabSelect SuRe层析柱前必须经过过滤。至少必须使用无菌过滤器；另外，在无菌过滤前可以使用吸附深度过滤器。在细胞培养物收获后，应该尽快完成运行。在细胞培养物运行前需要被保存的情况，应该经过无菌过滤并保存在4℃，或者冷冻保存（如可能）。 Run #0
单克隆抗体捕获步骤工艺开发的快速入门（一）
在单克隆抗体纯化中，为了获得所需高质量的抗体，一般使用两步或三步层析步骤。通常，用于三步工艺的层析介质为Protein A→阳离子交换→阴离子交换；用于两步工艺的层析介质为Protein A→Capto adhere（多模式离子交换）。所有的单克隆抗体（Mabs）都有一些相似的特性，所以可以
腺相关病毒（AAV）技术快速入门手册（二）
rAAV的局限性有哪些？1.体外实验表达水平较低：主要是因为rAAV病毒的基因组是单链DNA，在体外环境形成双链并转录翻译外源基因的效率非常低。可以在体外水平感染rAAV病毒的同时感染辅助病毒比如Ad5型腺病毒或者终浓度10~50mM的丁酸钠等方法提高细胞实验的rAAV表达量。2.需较长时间开始表达
武大联合团队开发纳米孔靶向测序－快速“捕获”新冠病毒
武汉大学联合团队创新性开发了纳米孔靶向测序检测方法（NTS），能大幅提升病毒阳性检出率，并能实现当天同时检测新冠和其他10大类、40种常见呼吸道病毒并监测病毒突变。 3月7日，该团队在预印版平台medRxiv发表题为《纳米孔靶向测序精准全面检测新冠病毒以及其他呼吸道病毒》的研究论文。 既往
透射电镜快速入门
在一些实验中，需要观察在普通的光学显微镜中无法看清的细微结构，那么就需要透射电子显微镜，透射电子显微镜是以波长更短的光源去提高显微镜的分辨率，以便更好的观察。那么透射电镜到底是怎么实现的呢？ 关于透射电子显微镜 简称透射电镜，是把经加速和聚集的电子束投射到非常薄的样品上，电子与样品中的原子
尾静脉注射快速入门技巧
动物实验当中，小鼠给药的方式有多重，常见的有灌胃，腹腔，皮下，尾静脉，饮食等。相比于灌胃、皮下，腹腔等给药方法，尾静脉注射可能是相对有难度的一种给药方式。对于新手来说，尾静脉难以操作成功。但是通过合适的方法，多加练习，也能轻松掌握！ 固定装置很重要 注意！尾静脉注射固定装置很重要，这是成功的首要条
外显子捕获的操作步骤
(1)基因组DNA经“霰弹法”切成小片段后，克隆在位于“外显子捕获序列”下游的克隆位点上。(2)将这些重组载体汇总后感染反转录病毒的专宿包装细胞系(ecotropicretroviral packaging cell line)——ψ2细胞系。ψ2细胞提供蛋白质产物使载体(自身不能合成病毒蛋白质)成
外显子捕获的操作步骤
(1)基因组DNA经“霰弹法”切成小片段后，克隆在位于“外显子捕获序列”下游的克隆位点上。(2)将这些重组载体汇总后感染反转录病毒的专宿包装细胞系(ecotropicretroviral packaging cell line)——ψ2细胞系。ψ2细胞提供蛋白质产物使载体(自身不能合成病毒蛋白质)成
捕获法测定抗原的操作步骤
血清中针对某些抗原的特异性IgM常和特异性IgG同时存在，后者会干扰IgM抗体的测定。因此测定IgM抗体多用捕获法，先将所有血清IgM（包括异性IgM和非特异性IgM）固定在固相上，在去除IgG后再测定特异性IgM。操作步骤如下：⑴将抗人IgM抗体连接在固相载体上，形成固相抗人IgM。洗涤。⑵加入稀
单克隆抗体的制备步骤
过程1）免疫脾细胞的制备 制备单克隆抗体的动物多采用纯系 Balb/c小鼠。免疫的方法取决于所用抗原的性质。免疫方法同一般血清的制备，也可采用脾内直接免疫法。2）骨髓瘤细胞的培养与筛选 在融合前，骨髓瘤细胞应经过含8-AG的培养基筛选，防止细胞发生突变恢复HGPRT的活性（恢复HGPRT的活性的细胞
单克隆抗体的制备步骤
过程1）免疫脾细胞的制备 制备单克隆抗体的动物多采用纯系 Balb/c小鼠。免疫的方法取决于所用抗原的性质。免疫方法同一般血清的制备，也可采用脾内直接免疫法。2）骨髓瘤细胞的培养与筛选 在融合前，骨髓瘤细胞应经过含8-AG的培养基筛选，防止细胞发生突变恢复HGPRT的活性（恢复HGPRT的活性的细胞
单克隆抗体的制备步骤
1、免疫动物的选择：免疫动物是用目的抗原免疫小鼠，使小鼠产生致敏B淋巴细胞的过程。 抗原通过血液循环或淋巴循环进入外周免疫器官，刺激相应B淋巴细胞克隆，使其活化、增殖，并分化成为致敏B淋巴细胞。2、细胞融合：采用二氧化碳气体处死小鼠，无菌操作取出脾脏，在平皿内挤压研磨，制备脾细胞悬液。 将准备好的同
英国开发出二氧化碳捕获存储新技术
其终端产品同时具有良好商业前景 英国科学家日前开发出一种二氧化碳捕获和存储新技术，这项技术可以使二氧化碳永久贮藏在岩石中。 据英国媒体报道，诺丁汉大学碳捕获和存储技术创新中心(CICCS)研制的这项二氧化碳存储新技术，利用了一种含硅酸盐矿物质的岩石——如蛇形岩——的自然变化。这种岩石在世界各地均有分
手机RF设计入门（二）
11. 为什么GSM使用GMSK调制，而W-CDMA采用HPSK调制？答：主要是由于GSM和WCDMA标准所定。有兴趣的话，可以看一些有关数字调制的书，了解使用不同数字调制技术的利与弊。12. 如何解决LCD model对RF的干扰?答：PCB设计过程中，可以在单个层中进行LCD布线。13. 手机设
动态光散射技术入门（二）
DLS法的局限性DLS方法的大多数局限性可以或已经通过对实验操作过程进行改进，或对DLS技术进行改进来加以克服；但在区分仪器类型，尤其是对于那些要求异常苛刻的应用而言，它的局限性仍然值得我们加以关注。一般来说，DLS使用过程中遇到的大多数问题是出于以下原因： · 存在较大的颗粒超出仪器最高量程范围
液相色谱（HPLC）入门（二）
什么是色谱图?色谱图表示发生在高效液相色谱系统中的化学[色谱]分离。一系列从基线出现的峰以时间为坐标。每个峰代表对不同化合物的检测器反应。色谱图由计算机数据站描绘。[如图 H].Figure H: How Peaks Are Created图H中，黄色谱带完全通过了检测器流通池；产生的电信号被送到计
工艺开发和在线控制带来的便捷：未来化学合成（二）
图2. 代表性的ReactIR光谱 a）丙酸叔丁酯原料1及其去质子化形成烯醇化物2; b）丙酸叔丁酯1和醛亲电子试剂3的组合溶液。 图3. 反应混合物的堆叠NMR光谱 显示醛3转化为产物烯醇化物4的程度。使用配备有玻璃流通池的Magritek Spinsolve Ultra 43MHz获得这些光谱
干货：腺相关病毒（AAV）技术快速入门手册
腺相关病毒（AAV）作为一种安全、持久、高效、高特异性的基因操作工具，在生物学特别是神经生物学领域中被广泛使用。许多新手对于AAV的使用往往是知其然而不知其所以然。这篇短文将以图文结合的形式争取让大家在最短的时间内全面了解这种病毒工具。 什么是AAV？ 野生型AAV是一种复制缺陷型微
腺相关病毒（AAV）技术快速入门手册（一）
腺相关病毒（AAV）作为一种安全、持久、高效、高特异性的基因操作工具，在生物学特别是神经生物学领域中被广泛使用。许多新手对于AAV的使用往往是知其然而不知其所以然。这篇短文将以图文结合的形式争取让大家在最短的时间内全面了解这种病毒工具。什么是AAV？野生型AAV是一种复制缺陷型微小病毒，需要腺病毒或
关于外显子捕获的操作步骤介绍
(1)基因组DNA经“霰弹法”切成小片段后，克隆在位于“外显子捕获序列”下游的克隆位点上。 (2)将这些重组载体汇总后感染反转录病毒的专宿包装细胞系(ecotropicretroviral packaging cell line)——ψ2细胞系。ψ2细胞提供蛋白质产物使载体(自身不能合成病毒蛋
英国牛津仪器公司开发二硫化钼生长工艺
据报道，英国牛津仪器公司利用其纳米实验室纳米级生长系统，启动了二硫化钼生长工艺研究。 单层硫化钼是一种直接带隙半导体材料，在光电领域具有广泛的应用，如发光二级光、光伏电池、光探测器、生物传感器等，而多层二硫化钼是一种非直接带隙半导体，有望用于未来的数字电子技术。 牛津仪器公司表示，该公司已经
单克隆抗体的制备（二）
3 免疫策略不同实验室使用的免疫策略是不同的，很多免疫策略都同样有效。 目的是扩大宿主体内抗原反应性 B 细胞的数量。体内每次接触到蛋白质抗原，都会增加抗原反应性B 细胞的数量。在对抗原的再次应答中，产生的抗体量会增加，总的免疫球蛋白类别会从以IgM 为主转变为以IgG 为主，特异性抗体
单克隆抗体的纯化技术操作步骤
从培养液或腹腔积液获得的单克隆抗体，不需要纯化即可应用于日常诊断或定性研究。如果用于免疫标记测定，须分离和纯化。可用半饱和、饱和硫酸铵进行沉淀，进行初步浓缩和纯化；可用亲和层析法进一步纯化。一、腹水型单抗的纯化在单抗纯化之前，一般均需对腹水进行预处理，目的是为了进一步除去细胞及其残渣、小颗粒物质、以
单克隆抗体介绍（二）
抗体筛选技术：单细胞抗体基因扩增技术2008 年, Tiller 等人发明了一种从人外周血单个核细胞快速制备单克隆抗体的方法。其主要过程包括: 经流式分选出抗原特异性单个B 细胞, 单细胞RT-PCR 与巢式PCR 组合获取抗体重链和轻链的可变区基因信息, 将这些基因克隆并在真核系统中表达。单个B
高效液相色谱法入门知识（二）
2．系统适用性试验色谱中最难分离物质对或与其相关的物质对的分离度和待测物响应值的重复性是系统适用性试验的重要参数。按各品种项下要求对色谱系统进行适用性试验，即用规定的对照品对色谱系统进行试验和调整，应符合要求；或规定色谱条件下的最小理论板数、分离度、重复性和拖尾因子。（1）色谱柱的理论板数（n）在规
外显子捕获与扩增（二）
材料缓冲液与溶液按合适比例稀释贮存液。无二价阳离子的磷酸缓冲液（PBS）酶及缓冲液胰酶-EDTA 溶液核酸与寡核苷酸DNA用于转染的质粒 DNA 制备见本方案阶段 1, 步骤 10~12。用作对照的质粒载体（步骤 3)培养基含 10% 热灭活胎牛血清的 Dulbecco's modified
如何设计单克隆抗体的纯化生产工艺
现代单抗药物的产业的发展，伴随着细胞培养表达量的提高，带来后期纯化的压力不断增加，如何在下游工艺开发的早期能关注的到整个生产工艺的需求，理解提高亲和步骤的生产效率的含义，从哪些方面考虑亲和填料的筛选从而得到最佳的性价比生产投入？面对中试放大后更加复杂的料液，如何开发出更稳定的精细纯化工艺，在满足高分
病虫害统计器快速入门和注意事项
病虫调查统计器快速入门1、安装电池打开电池盖；将电池按照盒内提示插入统计器，注意正负极；合上电池盖。2、统计器开机和关机按ON键开机，按OFF键关机注：只有在主界面按OFF键有效，在其他界面无效。3、安装计算机数据管理软件运行环境：安装：将光盘放入光驱，安装程序将自动运行；如果光盘不能自动运行，双击
病虫害统计器快速入门和注意事项
病虫调查统计器快速入门 1、安装电池 打开电池盖; 将电池按照盒内提示插入统计器，注意正负极; 合上电池盖。 2、统计器开机和关机 按ON键开机，按OFF键关机 注：只有在主界面按OFF键有效，在其他界面无效。 3、安装计算机数据管理软件 运行环境： 安装：将光盘放入光驱，安
新药开发的8个步骤
新药从研发到上市的过程中需进行的工作概括： 药物临床前研究（药物的合成工艺、提取方法、理化性质、纯度、剂型选择、处方筛选、制备工艺、检验方法、质量指标、稳定性、药理、毒理、动物药代动力学研究等） 申请获得临床试验批件 进行临床试验（包括生物等效性试验）研究 新药申请 获得新药