微核实验在染色体水平检测DNA损伤实验(一)

实验步骤 一、材料1. 胞质分裂阻滞微核试验2. 微核的着丝点检测(1)从硬皮病 C R E S T 亚型的患者中取得的血清样本。(2) F I T C 标记的兔抗人 I g G 二抗。(3) 过氧化物酶标记的兔抗人 I g G 。(4) 二胺基联苯溶液(D A B ): I m g /m L 溶于 0. 5 mol/L Tris 碱缓冲溶液, p H 7. 6。(5) NiCl2 溶 液 : 8% 溶液溶于 0.5 mol/L Tris 碱缓冲溶液, p H 7. 6 , 使用前配制。(6)D A B 反应混合物: I m L D A B 溶 液 , 3 m L Tris 碱缓冲 溶 液 , p H 7.6, 25NiCl2 溶液 , 40 uL 0 •I m o l / L 咪唑水溶液和 10 u L 30% 过氧化氢。使用前配制。(7)中性红溶液: 0.1 % 溶于双蒸水。二、方 法1. 用于分离的人淋巴细胞的标准 CBM......阅读全文

微核实验在染色体水平检测DN-A损伤实验(一)

实验步骤 一、材料1. 胞质分裂阻滞微核试验2. 微核的着丝点检测(1)从硬皮病 C R E S T 亚型的患者中取得的血清样本。(2) F I T C 标记的兔抗人 I g G 二抗。(3) 过氧化物酶标记的兔抗人 I g G 。(4) 二胺基联苯溶液(D A B ): I m g /m L 溶于

微核实验在染色体水平检测DN-A损伤实验

实验步骤 一、材料 1. 胞质分裂阻滞微核试验 2. 微核的着丝点检测 (1)从硬皮病 C R E S T 亚型的患者中取得的血清样本。 (2) F I T C 标记的兔抗人 I g G 二抗。 (3) 过氧化物酶

微核实验在染色体水平检测DN-A损伤实验(二)

2 用阿糖胞苷微核实验检测人淋巴细胞 (V G 1 期 DNA 剪切修复损伤的方法在对暴露于各种遗传毒物的人 G 。期淋巴细胞的 M N 进行检测后发现,对于主要引起碱基损伤和 DNA 加合物而不是 DNA 链断裂或者纺锤体损伤的化学物质和紫外辐射而言, MN 的形成与细胞毒性相比明显程度较

微核实验在染色体水平检测DNA损伤实验(一)

实验步骤一、材料1. 胞质分裂阻滞微核试验2. 微核的着丝点检测(1)从硬皮病 C R E S T 亚型的患者中取得的血清样本。(2) F I T C 标记的兔抗人 I g G 二抗。(3) 过氧化物酶标记的兔抗人 I g G 。(4) 二胺基联苯溶液(D A B ): I m g /m L 溶于

微核实验在染色体水平检测DNA损伤实验(二)

注意事项(1)在我们进行 CBMN 实验过程中,最容易产生问题的是在玻片的制备和染色环节 ,因为计数结果的好坏依赖于制片的质量。主要注意事项:(a) 在将细胞置于玻片前应轻轻吹打,避免细胞结块;(b)细胞密度适中,这样才容易辨认细胞质边界;(c) 在染色所有玻片前先试染一张,以确定染色合适。(2)要

微核实验的目的原理步骤及结果

  微核试验是检测染色体或有丝分裂器损伤的一种遗传毒性试验方法。无着丝粒的染色体片段或因纺锤体受损而丢失的整个染色体,在细胞分裂后期仍留在子细胞的胞质内成为微核。目的:化学物质遗传毒性评价。原理:通过染色体丢失或断片形成而出现的微核检测染色体异常。步骤与结果:最常用的是啮齿类动物骨髓嗜多染红细胞(P

微核实验的目的原理步骤及结果

  微核试验是检测染色体或有丝分裂器损伤的一种遗传毒性试验方法。无着丝粒的染色体片段或因纺锤体受损而丢失的整个染色体,在细胞分裂后期仍留在子细胞的胞质内成为微核。目的:化学物质遗传毒性评价。原理:通过染色体丢失或断片形成而出现的微核检测染色体异常。步骤与结果:最常用的是啮齿类动物骨髓嗜多染红细胞(P

微核检测实验

实验方法原理遗传毒物或致突变因子作用于间期细胞染色质,有丝分裂染色体和纺锤体时,能导致染色体断裂成断片或整条染色体从纺锤体脱落和染色体子星群脱离,形成落后的孤立染色体,继而在分裂末期及以后的间期细胞中形成与主核脱离的徽核。因此微核实质上是孤立畸变染色体在间期的存在形式。微核检测既可直接检测体内细胞,

微核检测实验

实验方法原理 遗传毒物或致突变因子作用于间期细胞染色质,有丝分裂染色体和纺锤体时,能导致染色体断裂成断片或整条染色体从纺锤体脱落和染色体子星群脱离,形成落后的孤立染色体,继而在分裂末期及以后的间期细胞中形成与主核脱离的徽核。因此微核实质上是孤立畸变染色体在间期的存在形式。微核检测既可直接检测体内细胞

王晟:染色体微缺失微重复检测或将成为下一个热点

  问:王晟博士您好!感谢您接受采访。贝瑞和康本次会上展示的以NextSeq CN500测序仪为核心的高通量测序实验室整体解决方案看起来非常具有可操作性,那么这套系统是否已经在临床实验室成功运行?  答:是的,贝瑞和康以NextSeq CN500基因测序仪为核心的高通量测序目前已经在全国多家大型产前

NIPT针对染色体微缺失微重复的检测新进展

  染色体微缺失微重复是除染色体非整倍体之外的另一大类新生儿出生缺陷。有数据显示,截止2012年1月,已发表的染色体微缺失疾病211种,染色体微重复疾病79种。染色体微缺失微重复综合征的发病率1/4,000  -1/200,000不等,缺失和重复片段较为微小,通常被产前诊断漏检。有数据显示,大多数染

双微染色体

中文名称双微染色体英文名称double minute chromosome;DMC定  义可在肿瘤细胞中观察到的具有成对微小体的染色体。应用学科遗传学(一级学科),细胞遗传学(二级学科)

【最新】NIPT针对染色体微缺失微重复的检测新进展

  染色体微缺失微重复是除染色体非整倍体之外的另一大类新生儿出生缺陷。有数据显示,截止2012年1月,已发表的染色体微缺失疾病211种,染色体微重复疾病79种。染色体微缺失微重复综合征的发病率1/4,000  -1/200,000不等,缺失和重复片段较为微小,通常被产前诊断漏检。有数据显示,大多数染

非损伤微测技术

实验概要本实验利用非损伤微测技术对拟南芥的钠钾离子流进行了测定及数据分析。实验原理非损伤微测技术起源于产生了众多诺贝尔奖获得者的美国MBL实验室。非损伤微测技术离子选择性微电极的工作原理:Ca2 离子选择性微电极通过前端灌充液态离子交换剂(Liquid Ion Exchanger,LIX)实现选择性

非损伤微测技术

非损伤微测技术是一种实时、动态的活体测定技术。通过测定进出活体材料的离子和小分子的流速这一指标反映生命活动,是生理功能研究的最佳工具之一。非损伤微测技术与其他活体测定技术有所不同,不受被测材料的限制,无需标记,无需提取样品,就能够获得离子和小分子的空间运动大小和方向,具有广阔的应用前景。非损伤微测技

光谱染色体核型分析实验(一)

实验方法原理 光谱染色体核型分析(SKY)采用24种颜色对所有染色体进行涂染,在一次试验中可以观察到每一条染色体。该技术以光谱成像和傅里叶光谱学原理为基础。对流式分选的染色体进行PCR标记,直接标记荧光素或间接标记半抗原。5种光谱学不同的纯色染料进行组合得到独特的染色体探针混合物。探针混合物与中期染

渗透溶胀法制备细胞核实验

            实验材料 HeLa 细胞 试剂、试剂盒 Earle’s 平衡盐溶液 RSB

渗透溶胀法制备细胞核实验

实验材料HeLa 细胞试剂、试剂盒Earle’s 平衡盐溶液RSB仪器、耗材玻璃盖玻片实验步骤1. 悬浮培养出 HeLa 细胞,600 g 离心 5 分钟收集细胞。2. 沉淀细胞用 5 倍体积 4℃ 预冷的 Earle’s 平衡盐溶液重新悬浮。3. 重悬浮的细胞在 4℃,600 g 离心 5 分钟,

从肝脏组织中制备细胞核实验

            实验材料 大鼠 试剂、试剂盒 裂解缓冲液 浓蔗糖溶液

渗透溶胀法制备细胞核实验

实验材料 HeLa 细胞试剂、试剂盒 Earle’s 平衡盐溶液RSB仪器、耗材 玻璃盖玻片实验步骤 1. 悬浮培养出 HeLa 细胞,600 g 离心 5 分钟收集细胞。2. 沉淀细胞用 5 倍体积 4℃ 预冷的 Earle’s 平衡盐溶液重新悬浮。3. 重悬浮的细胞在 4℃,600 g 离心 5

从肝脏组织中制备细胞核实验

实验材料大鼠试剂、试剂盒裂解缓冲液浓蔗糖溶液仪器、耗材超速离心机组织研磨器实验步骤1. 配制裂解缓冲液和浓蔗糖溶液(PMSF 在使用前添加),冰上放置。裂解缓冲液:0.25 mol/L 蔗糖网织红细胞标准缓冲液(RSB)0.25 mol/L 蔗糖(超级纯)10 mmol/ Tris-HCl (pH7

渗透溶胀法制备细胞核实验

用渗透溶胀法从HeLa细胞悬浮培养物中制备细胞核实验材料HeLa 细胞                                                          试剂、试剂盒Earle’s 平衡盐溶液                                      

关于检测染色体和染色体组畸变—微核试验的基本介绍

  传统的体内微核试验仍然是检测化学物质染色体损伤的基本方法。目前微核试验方法主要有以下改进:1体外微核试验  常用细胞有中国仓鼠肺细胞(CHL)、中国仓鼠卵巢细胞(CHO)及中国仓鼠成纤维细胞(V79)等,近年开始有用L5178Y小鼠淋巴瘤细胞和人的类成淋巴细胞TK6。也有用叙利亚仓鼠胚胎(SHE

再生医学与NMT非损伤微测技术——离子流检测

尽管早在1905年,科学家Morgan就提出,细胞/组织外部的某些扩散性物质构成的特殊空间信息决定了组织的极性和分化方向。但是,直到1997年,才由NMT(非损伤微测技术)的创始人员,Jaffe 和 Nuccitelli利用早期NMT技术观测到了,组织/细胞的电学极性来源于带有位置和方向信息的,离子

MinichromosomeMicrotubule-Binding-Assay-微染色体-微管结合实验1

Koshland Lab,Carnegie Institute http://www.ciwemb.edu/labs/koshland/Protocols/MICROTUBULE/mmb.htmlDetermine the OD600 and correlate the cell density f

MinichromosomeMicrotubule-Binding-Assay-微染色体-微管结合实验2

YWB per 10ml5mL 2M Sorbitol (if NZ arrested, add 40uL 1.5mg/mL0.336mL 1M K2HPO4 N2 to 4mL YWB)0.064mL 1M KH2PO44.6mL dH2OYWB, glycerol, PMSF5mL 2M Sor

低睾酮水平保护女性免受肾损伤

男性患急性肾损伤(肾功能突然下降)的概率高于女性。11月8日,《细胞报告》发布的一项基于小鼠的实验表明,这可能与男性睾酮水平较高有关。 低睾酮水平似乎可以保护小鼠的肾细胞免于死亡。这一发现可以解释为什么女性患急性肾损伤的风险低于男性。 该研究通讯作者、美国杜克大学的Tomokazu Soum

2012年上海光机所激光损伤阈值水平

        9月23日至26日,在2012年高功率激光光学材料年会(SPIE 2012 Laser Damage---XLIV Anuual Symposium on Optical Materials for High-Power Lasers)组织的全球偏振膜激光损伤阈值水平竞赛中,由中科院

Y染色体的微缺失

  研究情况  决定男性性别的染色体—Y染色体是遗传物质的载体。人的染色体有23对(即46条),其中22对为常色体,男性与女性的都一样;余下的一对为性染色体,女性的染色体由两条相同的染色体组成,书写为XX,男性的由一条X染色体和一条Y染色体组成,书写为XY,Y染色体是由决定男性性别的染色体。  据世

Cell:首次在单细胞水平描绘肝癌微环境中的免疫图谱

  2017年6月16日,北京大学生命科学学院BIOPIC中心、北京未来基因诊断高精尖创新中心、北大-清华生命科学联合中心张泽民研究组,首都医科大学附属北京世纪坛医院暨北京大学第九临床医学院肝胆胰外科彭吉润研究组,以及美国AMGEN公司的欧阳文军研究组在Cell杂志发表了题为“Landscape o