从肝脏组织中制备细胞核实验
实验材料 大鼠 试剂、试剂盒 裂解缓冲液 浓蔗糖溶液 仪器、耗材 超速离心机 组织研磨器 实验步骤 1. 配制裂解缓冲液和浓蔗糖溶液(PMSF 在使用前添加),冰上放置。裂解缓冲液:0.25 mol/L 蔗糖网织红细胞标准缓冲液(RSB)0.25 mol/L 蔗糖(超级纯)10 mmol/ Tris-HCl (pH7.4)10 mmol/L NaCl3 mmol/L MgCl21 ......阅读全文
从肝脏组织中制备细胞核实验
实验材料 大鼠 试剂、试剂盒 裂解缓冲液 浓蔗糖溶液
从肝脏组织中制备细胞核实验
实验材料大鼠试剂、试剂盒裂解缓冲液浓蔗糖溶液仪器、耗材超速离心机组织研磨器实验步骤1. 配制裂解缓冲液和浓蔗糖溶液(PMSF 在使用前添加),冰上放置。裂解缓冲液:0.25 mol/L 蔗糖网织红细胞标准缓冲液(RSB)0.25 mol/L 蔗糖(超级纯)10 mmol/ Tris-HCl (pH7
细胞核连缀分析实验_从组织中制备细胞核
实验材料动物组织试剂、试剂盒PBS蔗糖仪器、耗材电动匀浆器特氟隆研杵实验步骤一、用超速离心法从组织中分离细胞核1. 切下动物组织,放入置于冰上的平皿中,用冰冷的 PBS 冲洗。2. 加少量蔗糖Ⅰ溶液,用剪刀或剃须刀片将组织切碎,转入一个干净试管中,加蔗糖Ⅰ溶液至终体积为每克组织 10 ml。3. 用
从实体组织中制备粗微体实验_从大鼠肝脏制备微体
实验材料雄大鼠试剂、试剂盒蔗糖蔗糖HM仪器、耗材玻璃板实验步骤1. 用断颈法杀死约 150 g 重的雄大鼠,大鼠的数量取决于要制备的粗微体的数量。由于一个 150 g 重的大鼠肝(6 g)大约每克肝蛋白含有 10 mg 粗微体,所以大鼠的数量可以以回收率为 50% 来进行估计。2. 流干血液后,打开
从组织中分离制备细胞核基质/中间纤维支架结构
实验材料新鲜组织试剂、试剂盒NaCl 缓冲液细胞骨架缓冲液仪器、耗材Teflon 研杵Doume 匀浆器实验步骤1. 在 4℃ 将新鲜组织切成 1 mm3 左右的小块。在 4℃,用 Teflon 研杵和 Doume 匀浆器在含 0.5% Tritron X-100 的细胞骨架缓冲液中对切碎的组织进行
酵母细胞核制备
实验材料 酵母菌试剂、试剂盒 细胞核缓冲液Ficoll缓冲液仪器、耗材 匀浆机实验步骤 1. 将酵母菌接种于YPD培养基(100 ml 到20 L),剧烈摇动或强制通气条件下培养至对数中期(OD600≈1~5)。培养物在预称重的离心瓶中于4℃, 1 500 g 离心5 min。 2. 确定酵母细
原代细胞核仁的制备
试剂和器材: 1. 悬浮缓冲液:0.34mol/L蔗糖、0.05mmol/L MgCl2、10mmol/L Tris-HCl,pH7.5;2. 密度阻滞溶液:0.88mol/L蔗糖、0.05mmol/L MgCl2、10mmol/L Tris-HCl,pH7.5;3. 按要求向溶液中加入蛋白酶抑制剂
从培养细胞或组织中制备细胞核基质/中间纤维骨架结...
从培养细胞或组织中制备细胞核基质/中间纤维骨架结构实验实验材料 细胞试剂、试剂盒 Tritron X-100抽提缓冲液仪器、耗材 电子显微镜实验步骤 1. 在 4℃ 用 PBS 洗细胞一次。2. 在 4℃ 用含 0.5% Tritron X-100 的细胞骨架缓冲液抽提细胞 3 到 5 分钟。直到消
从培养细胞或组织中制备细胞核基质/中间纤维骨架结构
从培养细胞中制备细胞核基质/中间纤维骨架结构 从组织中分离制备细胞核基质/中间纤维支架结构 细胞核的预先分离 实验材料
从培养细胞或组织中制备细胞核基质/中间纤维骨架结构
从培养细胞中制备细胞核基质/中间纤维骨架结构从组织中分离制备细胞核基质/中间纤维支架结构细胞核的预先分离实验材料细胞 试剂、试剂盒Tritron X-100
原代细胞核基质的制备
试剂和器材: 1. 硫酸铵(含10mmol/L Tris-HCl,(pH7.4)及0.2mmol/L MgCl2的1mol/L与0.2mol/L硫酸铵溶液);2. 氯化镁(1mol/L储存液);3. 苯甲基磺酰氟(PMSF)(无水乙醇配制的1mol/L储存液);4. 纯化的细胞核保存于含0.25mo
组织学——组织制备
· Histological techniques (William H. Heidcamp)Very detailed guide to histological techniques, like fixation, dehydration, embedment and subs
LSCM组织切片的细胞核标记
组织切片的细胞核标记目前仍然采用 DAPI(4,6-联脒-2-苯基吲哚,ex 359 nm / em 461 nm),其特点是专一性强、灵敏度高、稳定性好、毒性小,且可被405nm激光器有效地激发,获取明亮的核标记荧光图像。PI(碘化丙啶 ex 536nm / em 617nm)也可以用于核标记,因
线粒体和细胞核的制备与观察
实验概要本实验介绍了线粒体和细胞核制备的基本原理及操作。对分离得到的细胞核及线粒体进行了活性鉴定,有助于掌握用差速离心技术分离制备动物细胞核及线粒体的方法。实验原理利用细胞核与线粒体在一定介质中的沉降速度的差异,可采取分级差速离心的方法,将细胞核与线粒体逐级分离出来(差速离心技术)。线粒体是真核细胞
组织芯片的制备——冰冻组织芯片
实验材料新鲜组织试剂、试剂盒OCT 包埋剂切片黏合剂仪器、耗材1 mm 孔径针载玻片实验步骤将每个需要制备 TMA 的新鲜组织,不经固定包埋在 OCT 包埋剂中, -20℃ 中冻成块。另外,再将 OCT 包埋剂倒在长 3 cm×宽 1.5 cm×高 lcm 的模具中, -20℃ 中冻成块。用特制的
组织芯片制备仪
组织芯片技术是以形态学为基础的分子生物学新技术,应用范围涵盖了整个生命科学中各个基础研究、临床研究、应用研究以及药物开发的相关领域。凭借其省时、高效、误差小等优点,自诞生以来就获得了生命科学从业人员的热切关注。 那么组织芯片到底是如何制备出来的呢? 简短截说,组织芯片制备就是通过组织芯片阵列
组织芯片的制备
实验方法原理 首先制作模具蜡块(受体,recipient)。从供体蜡块(donor)上取样,取样针分别有 0.6 mm、1.0 mm、1.5 mm 和 2.0 mm 几种,在 1 个大小 45 mm×20 mm 的模具蜡块上,以 0.6 mm 取样针间隔 0.1 mm,可排列 1000 余个
渗透溶胀法制备细胞核实验
实验材料 HeLa 细胞 试剂、试剂盒 Earle’s 平衡盐溶液 RSB
渗透溶胀法制备细胞核实验
实验材料HeLa 细胞试剂、试剂盒Earle’s 平衡盐溶液RSB仪器、耗材玻璃盖玻片实验步骤1. 悬浮培养出 HeLa 细胞,600 g 离心 5 分钟收集细胞。2. 沉淀细胞用 5 倍体积 4℃ 预冷的 Earle’s 平衡盐溶液重新悬浮。3. 重悬浮的细胞在 4℃,600 g 离心 5 分钟,
酵母细胞核制备实验——差速离心法
细胞核(nucleus)是细胞中最大、最重要的细胞器(初中老教材认为细胞核不是细胞器,大学细胞生物学则认为是细胞器,这里以大学教材为准),它是由核膜(nuclear membrane)、核骨架(nuclear scaffold)、核仁(nucleolus) 几部分组成。实验材料酵母菌试剂、试剂盒细胞
HeLa-细胞核提取物的制备实验
试剂、试剂盒 甘油液氮MgCl2•6 H2O硫酸铵HeLa 细胞磷酸缓冲盐溶液(PBS) 缓冲液 G缓冲液 H 缓冲液 DTM 缓冲液+0.1 ml L KCl实验步骤 材料HeLa 细胞(培养和保存条件见下文。我们也成功地使用过 CellexBiosciences 公司制备并冷冻的 HeLa 细胞
HeLa-细胞核提取物的制备实验
在本实验中,基本上是按Dignam等(1983)所述的方法从HeLa细胞制备核提取物的。这一基本方法大概是制备体外转录和DNA结合实验用因子的最常用的方法。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。试剂、试剂盒甘油液氮MgCl2•6 H2O硫酸铵HeLa 细胞磷酸缓冲盐溶液(PBS)缓冲液
渗透溶胀法制备细胞核实验
实验材料 HeLa 细胞试剂、试剂盒 Earle’s 平衡盐溶液RSB仪器、耗材 玻璃盖玻片实验步骤 1. 悬浮培养出 HeLa 细胞,600 g 离心 5 分钟收集细胞。2. 沉淀细胞用 5 倍体积 4℃ 预冷的 Earle’s 平衡盐溶液重新悬浮。3. 重悬浮的细胞在 4℃,600 g 离心 5
渗透溶胀法制备细胞核实验
用渗透溶胀法从HeLa细胞悬浮培养物中制备细胞核实验材料HeLa 细胞 试剂、试剂盒Earle’s 平衡盐溶液
组织芯片的制备——石蜡块组织芯片
实验方法原理首先制作模具蜡块(受体,recipient)。从供体蜡块(donor)上取样,取样针分别有 0.6 mm、1.0 mm、1.5 mm 和 2.0 mm 几种,在 1 个大小 45 mm×20 mm 的模具蜡块上,以 0.6 mm 取样针间隔 0.1 mm,可排列 1000 余个位点,如取
组织芯片的制备技术
制备组织芯片的两个关键步骤是制备受体蜡块和从供体石蜡块中精确采集微量样品。虽然至今仍然有很多研究机构采用纯粹手工方法进行操作,但是各种商业化机械制备仪的制作效率和精度更高。Beecherlnstruments公司的组织阵列排布仪是目前使用较多的制备仪。制备仪包括操作平台、特殊的打孔采样装置和一个定位
组织匀浆的制备方法
1、取组织块(0.2g~1g)最少可到2~5mg,在冰冷的生理盐水中漂洗,除去血液,滤纸拭干,称重,放入5或10ml的小烧杯内 2、用移液管量取预冷的匀浆介质(ph7.4,0.01mol/L Tris-HCL, 0.0001MOL/LEDTA-2Na,0.01mol/L蔗糖0.8%的氯化钠溶液)
组织和细胞RNA的制备
一、 组织和细胞总RNA提取:异硫氰酸胍法(一)试剂准备1.CSB缓冲液:42mM柠檬酸钠;0.83% N-lauryl sarcosine(十二烷基,N甲基甘氨酸钠);0.2 mM β-巯基乙醇。2.变性液:异硫氰酸胍(终浓度 4 M)25g、CSB缓冲液 33ml,混合直至完全溶解,可在65℃助
冰冻组织制备及切片实验
实验材料 冰冻组织试剂、试剂盒 异戊烷OCT多聚-L-赖氨酸仪器、耗材 滤纸切片机加热槽冰冻机细毛刷实验步骤 1. 将一个50 ml 硬质玻璃烧杯浸入盛有液氮的烧瓶(或敞口聚苯乙烯盒)中冰冻,烧杯中加CryoKwik(或异戊烷)。2. 在滤纸条一端以铅笔注明标签,用镊子将样品放于另一端。 3.
细胞/组织裂解液的制备
溶液准备 2×样品缓冲液:130mM Tris-HCl ( pH8.0 ) , 20% ( v/v ) 甘油 , 4.6% ( w/v ) SDS , 0.02% 溴酚蓝 , 2%DTT PBS ( pH7.4 ) :10mM Na2HPO4,1.8mM KH2PO4 ,50