渗透溶胀法制备细胞核实验

实验材料HeLa 细胞试剂、试剂盒Earle’s 平衡盐溶液RSB仪器、耗材玻璃盖玻片实验步骤1. 悬浮培养出 HeLa 细胞,600 g 离心 5 分钟收集细胞。2. 沉淀细胞用 5 倍体积 4℃ 预冷的 Earle’s 平衡盐溶液重新悬浮。3. 重悬浮的细胞在 4℃,600 g 离心 5 分钟,或者如步骤 1 所说加以延长。4. 用 10 倍体积的 RSB 重悬浮洗过的细胞沉淀,使离心管在冰上放置 10 分钟。RSB:0.1 mol/L NaCl1.5 mmol/L MgCl20.01 mol/L Tris-HCl ( pH 7.4)5. 将一巴斯德吸管头伸入细胞悬液 0.5~0.75 cm,通过虹吸作用取少量细胞涂到一载玻片上。6. 其上覆盖一块 22 mm2 的玻璃盖玻片,在相差显微镜下检查细胞。7. 将膨胀的细胞吸到预冷的玻璃 Dounce 匀浆器中。8. 快速向上抽出研杵 10~12 次,破碎细胞。9. 取......阅读全文

渗透溶胀法制备细胞核实验

实验材料HeLa 细胞试剂、试剂盒Earle’s 平衡盐溶液RSB仪器、耗材玻璃盖玻片实验步骤1. 悬浮培养出 HeLa 细胞,600 g 离心 5 分钟收集细胞。2. 沉淀细胞用 5 倍体积 4℃ 预冷的 Earle’s 平衡盐溶液重新悬浮。3. 重悬浮的细胞在 4℃,600 g 离心 5 分钟,

渗透溶胀法制备细胞核实验

实验材料 HeLa 细胞试剂、试剂盒 Earle’s 平衡盐溶液RSB仪器、耗材 玻璃盖玻片实验步骤 1. 悬浮培养出 HeLa 细胞,600 g 离心 5 分钟收集细胞。2. 沉淀细胞用 5 倍体积 4℃ 预冷的 Earle’s 平衡盐溶液重新悬浮。3. 重悬浮的细胞在 4℃,600 g 离心 5

渗透溶胀法制备细胞核实验

用渗透溶胀法从HeLa细胞悬浮培养物中制备细胞核实验材料HeLa 细胞                                                          试剂、试剂盒Earle’s 平衡盐溶液                                      

渗透溶胀法制备细胞核实验

            实验材料 HeLa 细胞 试剂、试剂盒 Earle’s 平衡盐溶液 RSB

从肝脏组织中制备细胞核实验

            实验材料 大鼠 试剂、试剂盒 裂解缓冲液 浓蔗糖溶液

从肝脏组织中制备细胞核实验

实验材料大鼠试剂、试剂盒裂解缓冲液浓蔗糖溶液仪器、耗材超速离心机组织研磨器实验步骤1. 配制裂解缓冲液和浓蔗糖溶液(PMSF 在使用前添加),冰上放置。裂解缓冲液:0.25 mol/L 蔗糖网织红细胞标准缓冲液(RSB)0.25 mol/L 蔗糖(超级纯)10 mmol/ Tris-HCl (pH7

活化剂裂解方法制备细胞核实验

用活化剂裂解方法从悬浮培养的HeLa细胞中制备细胞核实验材料HeLa 细胞试剂、试剂盒TM-2 缓冲液仪器、耗材塑料离心瓶Corex 管实验步骤1. 转瓶培养 4 升 HeLa 细胞,便细胞浓度达到 1.0x106 细胞/ml。2. 细胞在 1 L 的塑料离心瓶中,用 Sorvall 的 RC-3B

活化剂裂解方法制备细胞核实验

            实验材料 HeLa 细胞 试剂、试剂盒 TM-2 缓冲液 仪器、耗材

活化剂裂解方法制备细胞核实验

实验材料 HeLa 细胞试剂、试剂盒 TM-2 缓冲液仪器、耗材 塑料离心瓶Corex 管实验步骤 1. 转瓶培养 4 升 HeLa 细胞,便细胞浓度达到 1.0x106 细胞/ml。2. 细胞在 1 L 的塑料离心瓶中,用 Sorvall 的 RC-3B 离心机,H-600A 转头,3000 r/

活化剂裂解方法制备细胞核实验

用活化剂裂解方法从悬浮培养的HeLa细胞中制备细胞核实验材料HeLa 细胞                                                          试剂、试剂盒TM-2 缓冲液                                        

细胞及组织的破碎方法

细胞及组织破碎的方法多种多样,大致可以分为四类:一、机械破碎:1、研磨法。2、组织捣碎法。3、离心机分离法。4、超声波法。5、压榨法。6、冻融法。二、溶胀和自溶:1、溶胀:细胞膜为天然的半透膜,在低渗溶液(如低浓度的稀盐溶液)中,由于存在渗透压差,溶剂分子大量进入细胞,从而引起细胞膜发生胀破。2、自

纤维素衍生物的特性有哪些?

  纤维素是一种结晶性天然高分子,大多数酯、醚化反应是在纤维素保持固态情况下的非均相反应,反应试剂向纤维素纤维内部的扩散状态称可达及度。结晶区分子间排列紧密,试剂只能扩散至结晶表面。非晶区分子间排列疏松,有较多的游离羟基容易同试剂接触,可达及度较高,较易反应。通常,结晶度高、结晶尺寸大的原料,不如结

纺织品液压胀破强力试验方法(膜片式胀破强力仪法)

1.范围1.1.本方法用液压胀破强度测试仪来测试织物的耐胀破性能。此方法被广泛用于各种纺织品的生产测试中。1.2.此方法也可用于弹性机织物和工业用布。1.3.数值使用S.L单位作为标准。 2.原理2.1.把试样夹固定在可变形的薄膜上﹐然后通过液压挤压薄膜直至织物被胀破。胀破样品所需的总压力和挤压薄膜

溶出度检查测定溶出介质的制备

应使用各品种项下规定的溶出介质,并应新鲜制备和经脱气处理(溶解的气体在试验过程中可能形成气泡,从而影响试验结果,因此溶解的气体应在试验之前除去)。可采用的脱气方法:取溶出介质,在缓慢搅拌下加热至约41℃,并在真空条件下不断搅拌5min以上,脱气放冷后,再按各规定项下溶出度的要求制备溶出介质。或采用煮

高强度和抗溶胀的水凝胶材料制作仿生软骨

  软骨是人体关节的保护性组织,因其内部基质为凝胶态,表现出优异的弹性和抗溶胀性。关节软骨受损后,功能逐渐丧失,会严重影响人体的运动功能,因此在仿生材料领域,关节软骨替代材料的研究越来越受到研究者们的青睐。其中,水凝胶材料因其与软骨接近的网络结构,已成为仿生软骨材料领域研究最广泛的体系之一。然而,常

从细胞培养液中怎么分离蛋白质

蛋白质分离纯化的一般程序可分为以下几个步骤:(一)材料的预处理及细胞破碎分离提纯某一种蛋白质时,首先要把蛋白质从组织或细胞中释放出来并保持原来的天然状态,不丧失活性。所以要采用适当的方法将组织和细胞破碎。常用的破碎组织细胞的方法有:1.机械破碎法这种方法是利用机械力的剪切作用,使细胞破碎。常用设备有

食品样品预处理中样品溶液的制备方法微波溶样法

微波溶样法是将微波加热和密闭加压消化相结合的一种新型而有效的分解样品的技术,主要用到微波炉和密封聚四氟乙烯罐。该方法的特点是快速高效,3~5min可将样品彻底分解,试剂用量少,空白值低,挥发性元素不损失。

细胞破碎方法介绍

  1. 机械法  1.1 组织捣碎  将材料配成稀糊状液,放置于筒内约1/3体积,盖紧筒盖,将调速器先拨至慢处,开动开关后,逐步加速至所需速度。一般用于动物组织、植物肉质种子、柔嫩的叶芽等,转速可高达10000rpm/M以上。由于旋转刀片的机械切力很大,制备一些较大分子如核酸则很少使用  1.2

胚胎干细胞细胞核具有拉胀性

  大部分材料在被拉伸时会收缩,比如拉长一根橡皮带,它会变细;反过来也一样,挤压材料会让它们膨胀,比如从两边挤压一个网球,它的外缘会变大。最近,英国剑桥大学科学家发现胚胎干细胞的细胞核表现出一种鲜为人知的新奇性——拉胀性,即挤压会收缩,拉伸会膨胀。相关论文发表在最近的《自然—材料》杂志上。  拉胀材

植物细胞渗透势的测定(质壁分离法)

植物细胞是一个渗透体系,当其处于高渗溶液时,细胞失水,原生质体积缩小,发生质壁分离现象。反之,如将已经发生质壁分离的细胞转至低渗溶液中,细胞会重新吸水,质壁分离复原。利用植物活细胞的质壁分离可以测定植物细胞的渗透势。植物细胞的渗透势主要取决于胞液的溶质浓度,因此又称溶质势。渗透势与植物水分代谢、生长

植物细胞渗透势的测定(质壁分离法)

实验概要植物细胞的渗透势主要取决于液泡的溶质浓度,因此又称溶质势。渗透势与植物水分代谢、生长及抗逆性等有密切关系。已知在干旱、盐渍等条件下,一些植物常在细胞内主动积累溶质,以降低其渗透势,增加吸水能力,而在一定程度上维持细胞膨压,保障细胞的生长和气孔的开放,这种现象叫做渗透调节作用。渗透调节能力的大

胶体溶液的制备方法介绍

  亲水胶体的制备  制备亲水溶胶首先要经过溶胀过程。溶胀是指水分子渗入到亲水溶胶化合物的空隙中,与亲水基团发生水化作用而使体积膨胀,结果使高分子空隙间充满了水分子的过程,这一过程称为有限溶胀。  由于空隙间存在水分子,降低了分子间的作用力,溶胀过程继续进行。最后化合物完全分散在水中形成亲水溶胶,这

细胞破碎和蛋白质溶解实验_​酶溶法

实验方法原理酶溶法就是用生物酶将细胞壁和细胞膜消化溶解的方法。因此利用此方法处理细胞必须根据细胞的结构和化学组成选择适当的酶。常用的有溶菌酶、β-1,3-葡聚糖酶、β-1,6-葡聚糖酶、蛋白酶、甘露糖酶、糖苷酶、肽链内切酶、壳多糖酶等、细菌主要用溶菌酶处理,酵母需要用几种酶进行复合处理。使用溶酶系统

酵母感受态细胞制备实验——试剂盒制备法

实验方法原理酵母化学感受态细胞制备试剂是一种通过化学处理,高效快速制备酿酒酵母化学感受态细胞,用于长期冻存以备后续转化的产品。实验材料酵母菌试剂、试剂盒YPD培养基酵母化学感受态细胞制备试剂盒仪器、耗材离心管冰箱冷冻管保温冰盒实验步骤一、挑取酵母受体菌的新鲜的单菌落(4℃放置不超过3周的也可以),接

细胞介导的细胞毒作用(CMC)检测法:细胞的制备

CMC中效应细胞的制备1)用淋巴细胞分离液分离PBMC1.抽取正常人静脉血加到肝素抗凝管中,加2倍量磷酸盐(PBS)悬浮细胞。将此悬液小心加在淋巴细胞分离液上,400×g离心30分钟。2.离心后红细胞在管底,PBMC在血浆和淋巴细胞分离液的交界面。收集PBMC,用PBS洗涤细胞两次,每次离心150×

羊水细胞染色体制备方法(原位法)

细胞培养1. 将羊水(约20ml)转移到无菌的离心管中,1000rpm离心10分钟;2. 去除上清液,用于其它分析,保留细胞悬液约0.5~1ml,用培养基混匀到2~2.5ml左右;3. 将细胞悬液平分到3只Chromslide培养皿中;4. 培养24/48小时后,向每只Chromslide培养皿中加

渗透细胞蛋白磷酸化实验——-制备用于等电聚焦的天然细胞

实验材料待标记的培养细胞预热研究用细胞(传代细胞或被分离的原代细胞)试剂、试剂盒4℃ 双向-PAGE裂解缓冲液双向-PAGE样品缓冲液细胞培养液细胞外缓冲液有渗透性的37℃缓冲液链球菌溶血素 O 工作溶液ATP 储存溶液[γ-32P] ATP研究用药理试剂受体激动剂仪器、耗材浴式超声仪干冰 乙醇浴冻

渗透细胞蛋白磷酸化实验——-制备用于SDSPAGE的天然细胞

实验材料待标记的培养细胞预热研究用细胞(传代细胞或被分离的原代细胞)试剂、试剂盒2 × SDS-PAGE 样品缓冲液细胞培养液细胞外缓冲液有渗透性的37℃缓冲液链球菌溶血素 O 工作溶液ATP 储存溶液[γ-32P] ATP研究用药理试剂受体激动剂2 × 冰裂解缓冲液蛋白抑制剂储存溶液仪器、耗材4℃

细胞破碎和蛋白质溶解实验_​化学渗透法

实验方法原理有些有机溶剂(如苯、甲苯)、抗生素、表面活性剂(SDS、Triton X-100)、金属整合剂(EDTA) 、变性剂(盐酸胍、脲)等化学药品都可以改变细胞壁或膜的通透性,使内含物有选择地渗透出来。这种处理方式就是化学渗透法。本文仅以表面活性剂 Triton X-100 为例简要介绍如下。

关于口腔崩解片的常用辅料介绍

  交联羧甲纤维素钠(CCNa)、交联羧甲淀粉钠(CCMS-Na)、交联聚乙烯吡咯烷酮(PVPP)、微晶纤维素(MCC)、低取代羧丙基纤维素(L-HPC)以及处理琼脂(TAG)、明胶、甘露醇、乳糖等辅料。  交联羧甲基纤维素钠(CCNa)、交联聚乙烯吡咯烷酮(PVPP)、交联羧甲基淀粉钠(CCMS-