通过PCR方法对微量DNA进行定量分析实验
实验材料 DNA试剂、试剂盒 蛋白酶消化缓冲液20 mg ml蛋白酶K (储于-20℃)用 50 mmol L Tris . Cl 10 mmol L EDTA pH 7.4 缓冲的酚（储于室温）24 ：1（V V)氯仿 异戊醇10 mol L乙酸按冰冷的100%乙醇70%乙醇TE缓冲液pH 7.5反应混合体系矿物油0.8 U μL Taq DNA 聚合酶用于杂交的寡核苷酸引物仪器、耗材 经高压灭菌的螺口微量离心管微量毛细吸管或带一次性可弃吸头和塞子的正压移液器或使用带滤芯吸头的微量移液器实验步骤 1) 将细胞或组织样品，放人螺口的微量离心管中，每2X1O6细胞加人100μL蛋白酶消化缓冲液，并加人20 mg/ml蛋白酶K至终浓度为100μg/ml,将样品放置于50℃过夜。通常需要设置几个不含病毒序列的样品作为阴性对照，要注意避免其他无关DNA序列污染细胞或组织样本。最好是按目的序列可能性递增的次序处理样品。抽提应在......阅读全文
通过PCR方法对微量DNA进行定量分析实验
基本方案 实验材料 DNA 试剂、试剂盒
通过PCR方法对微量DNA进行定量分析实验
PCR被用于从每样品的1〜20 000个分子中定量某一特定DNA序列的 数量。此外，它可辅助评估那些造成这类实验失败的污染序列的存在。来源：《精编分子生物学实验指南》第五版实验材料DNA试剂、试剂盒蛋白酶消化缓冲液20 mg ml蛋白酶K (储于-20℃)用 50 mmol L Tris . Cl
通过PCR方法对微量DNA进行定量分析实验
实验材料 DNA试剂、试剂盒 蛋白酶消化缓冲液20 mg ml蛋白酶K (储于-20℃)用 50 mmol L Tris . Cl 10 mmol L EDTA pH 7.4 缓冲的酚（储于室温）24 ：1（V V)氯仿 异戊醇10 mol L乙酸按冰冷的100%乙醇70%乙醇TE缓冲液pH
TSQ－Quantum－Discovery对微量氯霉素进行定量分析的方法
氯霉素因其价廉高效，并且同时对格兰氏阳性菌和阴性菌具杀伤性而成为一种很受欢迎的抗生素。但氯霉素本身有一个严重的缺点，就是可仪器人类致命性的再生性障碍贫血。 最近，政府机构在检测食物样品，尤其在检测来源于部分东亚地区的海洋视频和蜜蜂时，发现有相当水平含量的氯霉素存在。 这就需要我们建立一种新的分析
用－PCR－对一个随机多肽－DNA－文库的质量进行控制实验
试剂、试剂盒 ddH20 Vent 缓冲液 Vent DNA 聚合酶 dNTP 引物 质粒 DNA
用－PCR－对一个随机多肽－DNA－文库的质量进行控制实验
试剂、试剂盒 ddH20Vent 缓冲液Vent DNA 聚合酶dNTP引物质粒 DNA仪器、耗材 琼脂糖凝胶电泳所需的试剂和设备热循环仪实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂ddH202. 酶和酶缓冲液10X Vent 缓冲液Vent DNA 聚合酶3. 核酸和寡核苷酸dNTP，各 20 mm
用－PCR－对一个随机多肽－DNA－文库的质量进行控制实验
该方案中，用 PCR 分析由质粒载体编码的随机多肽文库。该文库是由连接反应的产物转化细菌后得到的，方案 2 已经介绍过，然后再用标准的程序对质粒进行扩增和纯化。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。试剂、试剂盒ddH20Vent 缓冲液Vent DNA 聚合酶dNTP引物质粒
通过重叠延伸和基因－SOEing－进行－PCR－突变实验
通过重叠延伸和基因 SOEing 进行 PCR 突变实验 试剂、试剂盒 无菌 H2O PCR 缓冲液
通过重叠延伸和基因－SOEing－进行－PCR－突变实验
试剂、试剂盒 无菌 H2OPCR 缓冲液限制性酶和缓冲液Taq DNA 聚合酶PCR 模板5'和 3'引物dNTP仪器、耗材 DNA 测序装置热循环仪琼脂糖凝胶电泳设备实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂无菌 H2O2. 酶和酶缓冲液10XPCR 缓冲液（Roche)，包含 1
通过重叠延伸和基因－SOEing－进行－PCR－突变实验
本实验介绍关于通过重叠延伸和基因 SOEing 进行 PCR 突变的过程。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。试剂、试剂盒无菌 H2OPCR 缓冲液限制性酶和缓冲液Taq DNA 聚合酶PCR 模板5'和 3'引物dNTP仪器、耗材DNA 测序装置热循环仪琼
对小鼠通过－quadricpeps－肌肉的肌肉注射进行－DNA－疫苗管理
实验材料小鼠试剂、试剂盒麻醉剂DNA 疫苗溶剂乙醇仪器、耗材吸管针头电子剪切机棉球或纱布垫实验步骤1.通过腹腔注射 0.3 ml/18~20 g 总体重麻醉剂麻醉一只小鼠，使用 26 G 针头的 1ml 注射器。这将使小鼠麻醉 15~20 min。2.用 28G 针头的 0.3 ml 注射器装人足够
基于－PCR－的－DNA－文库筛选实验方法
试剂、试剂盒PCR 混合物PCR 引物寡核苷酸杂交寡核苷酸PCR 正对照PCR 主要混合物蒸馏水仪器、耗材琼脂糖凝胶电泳设备实验步骤一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂蒸馏水2. 酶和酶缓冲液PCR 混合物（可以放在一起冰冻），对于 lml 反应，包括：200nmol 的各种 dNTP;1XVent 溶
基于－PCR－的－DNA－文库筛选实验方法
试剂、试剂盒 PCR 混合物PCR 引物寡核苷酸 杂交寡核苷酸PCR 正对照PCR 主要混合物蒸馏水仪器、耗材 琼脂糖凝胶电泳设备实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂蒸馏水2. 酶和酶缓冲液PCR 混合物（可以放在一起冰冻），对于 lml 反应，包括：200nmol 的各种 dNTP;1XVe
基于－PCR－的－DNA－文库筛选实验方法
试剂、试剂盒 PCR 混合物 PCR 引物寡核苷酸 杂交寡核苷酸 PCR 正对照 PCR 主要混合物 蒸馏水
通过毛细管电泳法是如何对DNA进行序列鉴定的
将提取出来的DNA物质（也称：DNA模板）与试剂混合，放在扩增仪中，使其基因链扩增，也就是把基因链扩展、放大得到几何倍数自我复制，让DNA浓度达到仪器可以检测识别的程度。
微量定量分析
微量定量分析微量定量分析常用重量、容量及仪器等分析方法。重量法采用不同方法分离出供试品中的被测成分,称取重量,以计算其含量。按分离方法不同,重量分析分为沉淀重量法、挥发重量法和提取重量法。重量法可测定某些无机化合物和有机化合物的含量。在药物纯度检查中常应用重量法进行干燥失重、炽灼残渣、灰分及不挥发物
PCR扩增DNA（PCR－Amplify－DNA）实验原理、材料和操作步骤
【实验原理】聚合酶链反应（polymerasechainreaction，PCR）是一种体外 DNA扩增技术，1985年由Mullis等人创立。该技术能在几小时的实验操作中，将人为选定的一段DNA扩增几百万倍，具有灵敏度高、特异性强、操作简便和应用广泛等优点，目前已成为分子生物学及基因工程中极为
利用－Polybrene－进行－DNA－转染实验
实验材料 指数生长的哺乳动物细胞试剂、试剂盒 DMSO(30%) 含血清培养基Giemsa 染液甲醇Polybrene丁酸钠要转染的 DNA仪器、耗材 最低基础培养基组织培养皿实验步骤 材料缓冲液与溶液贮存液、缓冲液与试剂的成分见附录 1。稀释贮存液至所需浓度。DMSO(30%)/含血清培养基第 3
利用－Polybrene－进行－DNA－转染实验
利用 Polybrene 进行 DNA 转染实验 实验材料 指数生长的哺乳动物细胞
利用－Polybrene－进行－DNA－转染实验
下面讲述的 Polybrene 与 DMSO 转染的方法是 Aubin 等（1997) 方法的改进。利用此方法可以有效地将质粒 DNA 转染中国仓鼠卵巢细胞与角化细胞，产生的转化体比磷酸钙-DNA 沉淀物方法的多 15 倍。但是使用高分子量 DNA 时两种方法的转染效率无明显差别。本实验来源于分子克
痘苗DNA检测实验——PCR－法
除了 PCR 和 Southern 杂交可以检测病毒 DNA 外，也可以利用 DNA 点迹杂交方法检测在分离的噬斑中的重组病毒。本实验主要介绍用这3种方法来检测痘苗DNA。实验材料贴壁生长良好的单层 BS-C-1 或 HuTK-143B 细胞重组病毒噬斑悬液试剂、试剂盒PBS胰酶／EDTA干冰／乙醇
差异－DNA－的－PCR－扩增实验
实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂dNTP 溶液（包含所有 4 种 dNTP，各 10 mmol/L)2. 酶和酶缓冲液PCR 反应缓冲液，10X聚合酶混合液，50X(Advantage2，Clontech，或相当产品）3. 核酸和寡核苷
差异－DNA－的－PCR－扩增实验
实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂dNTP 溶液（包含所有 4 种 dNTP，各 10 mmol/L)2. 酶和酶缓冲液PCR 反应缓冲液，10X聚合酶混合液，50X(Advantage2，Clontech，或相当产品）3. 核酸和寡核苷酸DNA 样品（即方案 2 第 16 步中的各消减样品
差异－DNA－的－PCR－扩增实验
在本方案所描述的反应中，差异 DNA 被选择性地扩增。每个实验至少应该有 4 个反应：①已消减的检测 DNA;②未消减的检测者对照（1-c);③反向消减的检测 DNA;④反向未消减的对照（2-c)。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。实验步骤一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂
用于PCR的模板DNA制备实验——改进的石蜡切片－DNA－提取方法
实验步骤1. 5 μm 厚的石蜡切片 5 至 10 张贴在干净的载玻片上，常规烘片，脱蜡，水化，蒸馏水清洗，无菌蒸馏水浸泡，取出晾至半干。2. 无菌尖头刀片刮下，放入 300～900 μl 组织裂解液中，并加入 20 mg/ml 蛋白酶 K（PK）10～15 μl，封口膜封口，置 55℃ 3 h 以
一种从凝胶中直接回收DNA进行PCR的方法
分子生物学实验中，常常需要从琼脂糖凝胶或聚丙酰胺凝胶中回收DNA，进行纯化、探针标记或进一步扩增等。鉴于PCR反应具有高度敏感性，微量模板即可扩增出阳性产物。我们从琼脂糖凝胶中直接回收DNA进行PCR，取得较满意的结果，报道如下。 1 材料和方法 1.1 试剂 Taq DNA聚合酶、dNTP、琼
PCR实验中DNA聚合酶的选择及实验方法
一、 DNA聚合酶的选择实验室常用 DNA聚合酶有三种：TaKaRa TaqTM，TaKaRa EXTaqTM和 PyrobestTMDNA Polymerase。TaKaRaTaqTM是一般的DNA 聚合酶，保真性较差，但价钱便宜，一般用于基因表达的检测等。TaKaRaEXTaqTM是具有 Pro
微量DNA物证的提取方法浅谈
微量的DNA往往以潜在的形式存在于案件现场的物证中，比如，衣物、砖块等，虽然针对微量DNA物证的DNA检验成功率较低，但是，一旦成功获得分型，就能够成为破案的直接证据，因此，对于潜在的DNA物证，检材的提取是DNA检验成功与否的关键。DNA物证的提取和其他物证的提取有所不同，为了便于下一步的DNA的
DNA片段的回收实验——微量柱法
实验材料DNA片段试剂、试剂盒纯化试剂盒异丙醇仪器、耗材离心机电泳仪电泳槽取液器微量真空装置抽滤装置实验步骤1. 紫外灯下从胶上切下目的片段，放入一Epphendof管中。2. 离心管在－20℃冷却5~10分钟。3. 将微量柱下套上一Epphendof管，将冷却的胶条装进微量柱中，4℃12 0
如何对PCR扩增的产物进行酶切
限制性内切酶在 PCR扩增体系中仍然有部分活性，可以通过稀释（3倍以上）扩增混合液，适当提高酶量和反映时间，进行酶切。个人认为需要对PCR产物进行酶切分析通常是为了或基因表 型分析，由于Taq，Pfu等高温聚合酶在酶切温度（37度或更高）下，仍然保持一定的活性，高温聚合酶所具有的聚合或无模板添A或外