非同位素分析报道基因活性实验

实验材料 转染细胞试剂、试剂盒 PBS荧光素贮液Triton甘氨酰甘氨酸仪器、耗材 橡胶细胞刮子绘图仪比色杯实验步骤 1. 用冰冷的PBS洗涤在3个60 mm 培养皿中的转染了荧光素酶表达质粒的细胞各3次, 毎次用4 ml PBS洗后吸去洗液。 2. 每个培养皿中加入350 μl Triton/甘氨酰甘氨酸裂解液。用橡皮刮子刮下细胞,将溶解的细胞转入1.5 ml 微量离心管中。4℃以最大速度微量离心5 min。将上清(细胞裂解液)转入一个干净的微量离心管中,置于冰上以备分析。3. 在旋涡混合器上轻轻振荡细胞裂解液,取100 μl 置于发光计的比色杯中。加入360 μl 荧光素酶分析缓冲液。将比色杯放入发光计的杯箱中。4. 用25 mmol/l ,pH7.8的甘氨酰甘氨酸稀释荧光素贮液至200 μmol/l。5. 往发光计里的样品注入20......阅读全文

用于同位素分析的方法介绍

用于同位素分析的方法有: ①质谱法,是最重要的同位素分析法, 不仅精密度高, 而且可分析同位素的种类也多。 ②光谱法, 用于分析氘的精密度达0.0002%,可与质谱法相比;是分析氮15最方便的方法,已有专门的光谱仪生产;分析铀235和铀238则须用大型光栅摄谱仪。③气相色谱法,用于分析氕、氘,迅速而

植物水稳定同位素分析简介

  植物水稳定同位素分析仪是一种用于地球科学、环境科学技术及资源科学技术领域的分析仪器,于2017年12月7日启用。  技术指标  δ18O≤0.10‰,δ2H≤0.5‰。  主要功能  采用激光光腔衰荡光谱法测定冰芯,雪样,降水,地表水,河湖水,大气水汽等各类水样中氢氧同位素比。使用自动进样器进样

硫同位素非质量依赖分馏效应的来源研究获进展

  近日,中国科学院广州地球化学研究所(以下简称广州地化所)研究员林莽团队在五硫同位素非质量依赖分馏效应的来源研究中取得进展,为地外样品的行星化学分析和数据解读带来启示。相关研究以主封面文章的形式发表于《美国化学会地球和空间化学》(ACS Earth and Space Chemistry)。  近

酵母三杂交系统检测和分析RNA蛋白相互作用实验

酵母三杂交系统(yeast three-hybrid system)可用于分析蛋白质与 RNA 间的相互作用。在酵母三杂交系统中,RNA 蛋白质相互作用导致报道基因的转录,可以通过细胞生长、克隆颜色或特异的酶活性检测蛋白质与 RNA 的相互作用。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编:郑晓飞。实验方

同位素实验室的研究原理

稳定性同位素及其化合物之间的化学性质和生物性质是相同的,只是具有不同的核物理性质。因此,可以用稳定性同位素作为示踪原子,制成含有稳定性同位素的标记化合物,利用其与相应非标记元素的不同特性,通过质谱仪、核磁共振仪等分析仪器来测定稳定同位素反应后的位置、数量及其转变量等,从而了解反应的机理、途径、效果等

同位素标记法的实验过程

测量方法分为绝对测量和相对测量。绝对测量是对样品的实有放射性强度作测量,求出样品中标记同位素的实际衰变率,在作绝对测量时,要纠正一些因素对测量结果的影响,这些因素包括仪器探头对于放射源的相对立体角、射线被探头接收后被计数的几率、反散射、 放射源的自吸收影响等等。而相对测量只是在某个固定的探测仪器上作

活性炭对非甲烷总烃的吸附效率

活性炭又称活性炭黑。是黑色粉末状或颗粒状的无定形碳。活性炭主成分除了碳以外还有氧、氢等元素。活性炭在结构上由于微晶碳是不规则排列,在交叉连接之间有细孔,在活化时会产生碳组织缺陷,因此它是一种多孔碳,堆积密度低,比表面积大。所以一般用在快霸油烟净化器+UV光解后面。主要是吸附残留的味道的

NK细胞活性检测实验步骤

  细胞毒检测技术包括补体依赖细胞毒试验、NK细胞介导的细胞毒试验和特异性CTL活性检测,常用的实验技术有后两种。NK细胞(natural killer cell)是在天然免疫系统发挥主要作用的效应细胞,可直接杀伤病毒感染的靶细胞和某些肿瘤细胞。而细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymp

相互作用蛋白鉴定实验——鉴定诱饵蛋白(LacZ的活性分析)

实验方法原理捕捉相互作用蛋白的第一步是构建能够表达 LexA 与目的蛋白的融合体的质粒。这种质粒转化到包含 LEU2 和lacZ 报道基因的报道酵母株中,并要行一系列的对照实验来鉴定所构建的诱饵蛋白是否适用,是否需要修饰,或是否应改变酵母菌报道条件。这些对照实验实现了诱饵蛋白在酵母菌中作为一种稳定蛋

质谱分析法术语同位素

同位素(isotope)质子数Z相同,即原子序数相同,中子数N不同,在元素周期表中占有同一位置的核素称作同位素,同位素的化学性质相似,物理性质不同。

铕同位素分析技术获新突破

  中国科学院广州地球化学研究所博士后白江昊和博士生吴昊在研究员韦刚健的指导下,在铕同位素分析技术研究方面取得新突破。相关成果近日发表于《分析化学》(Analytical Chemistry),并入选封面论文。  当期期刊。研究团队供图  稀土稳定同位素是新兴的非传统稳定同位素体系,有望为探索天体形

铕同位素分析技术获新突破

中国科学院广州地球化学研究所博士后白江昊和博士生吴昊在研究员韦刚健的指导下,在铕同位素分析技术研究方面取得新突破。相关成果近日发表于《分析化学》(Analytical Chemistry),并入选封面论文。当期期刊。研究团队供图稀土稳定同位素是新兴的非传统稳定同位素体系,有望为探索天体形成、地壳演化

非离子表面活性剂的优缺点

非离子表面活性剂的优点包括:优点:稳定性高:在水溶液中不受强电解质、强酸、强碱的影响,化学稳定性较好。相容性好:能与其他类型的表面活性剂和助剂良好地混合,协同增效。低刺激性:对皮肤和眼睛的刺激性通常较小,在化妆品和洗涤剂等产品中应用广泛。浊点特性:具有浊点,可利用这一特性控制其在不同温度下的性能。乳

新型单细胞活性分析技术

  近日,一项刊登在国际杂志Nature Biotechnology上的研究论文中,来自加利福尼亚大学的研究人员通过运用一种分析单一细胞基因活性的先进技术,鉴别出了人类大脑脑细胞的特性,该研究揭示,如今进行大规模的细胞调查分析比过去我们所认为的要更加高效,而且廉价。  研究者Arnold

淀粉酶活性的测定实验

实验方法原理:α-淀粉酶及β-淀粉酶,各有其一定的特性,如β-淀粉酶不耐热,在高温下易钝化而α-淀粉酶不耐酸,在pH3.6以下则发生钝化,通常提取液同时有两种淀粉酶存在,测定时,可根据它们的特性分别加以处理,钝化其中之一,即可测出另一酶的活性。将提取液加热到70℃维持15分钟以钝化β-淀粉酶,便可测

细胞活性检测DNA合成增殖实验

BrdU检测法BrdU为胸腺嘧啶核苷(Thymine)的衍生物,可用于标记活细胞中新合成的DNA(细胞活性周期S期),BrdU可随着DNA复制进入子细胞,因此在加入BrdU后分裂增殖的细胞DNA都会带有BrdU标记,可通过抗BrdU单克隆抗体检测,借此检测细胞的增殖能力,但BrdU单克隆抗体检测过程

淀粉酶活性的测定实验

实验方法原理α-淀粉酶及β-淀粉酶,各有其一定的特性,如β-淀粉酶不耐热,在高温下易钝化而α-淀粉酶不耐酸,在pH3.6以下则发生钝化,通常提取液同时有两种淀粉酶存在,测定时,可根据它们的特性分别加以处理,钝化其中之一,即可测出另一酶的活性。将提取液加热到70℃维持15分钟以钝化β-淀粉酶,便可测定

淀粉酶活性的测定实验

  实验方法原理α-淀粉酶及β-淀粉酶,各有其一定的特性,如β-淀粉酶不耐热,在高温下易钝化而α-淀粉酶不耐酸,在pH3.6以下则发生钝化,通常提取液同时有两种淀粉酶存在,测定时,可根据它们的特性分别加

谷丙转氨酶的活性测定实验

显色法             实验方法原理 血清谷丙转氨酶(SGPT)能催化丙氨酸与酮戊二酸生成谷氨酸和丙酮酸,丙酮酸在酸性条件下与2,4-二硝基苯肼可缩合成丙酮酸二硝基苯腙,该腙

MTT法细胞活性检测实验步骤

MTT是一种粉末状化学试剂,全称为3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide,汉语化学名为 3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐,商品名:噻唑蓝,是一种黄颜色的染料。MTT主要有两个用途:

酵母三杂交系统检测和分析RNA蛋白相互作用实验

实验方法原理 酵母三杂交系统(yeast three-hybrid system)可用于分析蛋白质与 RNA 间的相互作用。在酵母三杂交系统中,RNA 蛋白质相互作用导致报道基因的转录,可以通过细胞生长、克隆颜色或特异的酶活性检测蛋白质与 RNA 的相互作用。试剂、试剂盒 YPD 和 SD 培养基鲑

蛋白激酶的生化活性检测方法—放射性同位素法

  使用放射性同位素方法有诸多优点:它是直接检测的方法,放射性同位素的灵敏度很高,测试结果非常准确,被认为是蛋白激酶生化活性检测的“金标准”。因此,至今还有很多人继续使用放射性同位素作为检测激酶活性的方法。放射性同位素方法主要有膜过滤法和接近闪烁计数法两类。  放射性同位素方法有以下一些缺点:  (

非程序DNA合成检测实验

实验方法原理 非程序DNA合成(Unscheduled DNA Synthesis:UDS)即S期外的DNA合成。在一般情况下细胞内DNA合成只见于S期,但当处于非S期细胞DNA受损伤时,随着DNA损伤的修复也将发生DNA合成现象,即UDS。在化学致突变物、致癌物作用诱发细胞DNA损伤时,也诱导DN

非程序DNA合成检测实验

实验方法原理非程序DNA合成(Unscheduled DNA Synthesis:UDS)即S期外的DNA合成。在一般情况下细胞内DNA合成只见于S期,但当处于非S期细胞DNA受损伤时,随着DNA损伤的修复也将发生DNA合成现象,即UDS。在化学致突变物、致癌物作用诱发细胞DNA损伤时,也诱导DNA

化学结构非离子表面活性剂的浊点及其表面活性的影响

非离子型表面活性剂通过聚氧乙烯基醚醚水合而变为水溶性。含有醚氧的环氧乙烷的较长链更易水合,因此溶解度更高。温度升高导致环氧乙烷基团的醚氧与水合氢之间的氢键断裂成醚氧。结果,胶束的聚集数增加,聚氧乙烯非离子表面活性剂的胶束变得越来越大,直到它们变得如此大以致溶液变得明显混浊   盛泰SH412全自动浊

非离子表面活性剂和阴离子活性剂的区别是什么

非离子表面活性剂溶于水时不发生解离,其分子中的亲油基团与离子型表面活性剂的亲油基团大致相同,其亲水基团主要是由具有一定数量的含氧基团(如羟基和聚氧乙烯链)构成。近20多年来,非离子表面活性剂发展极为迅速,应用越来越广泛,今后数年仍会保持这一势头。由于非离子表面活性剂在溶液中不是以离子状态存在,所以它

质谱仪同位素质谱分析法的特点

同位素质谱分析法的特点是测试速度快,结果,样品用量少(微克量级)。能测定元素的同位素比值。广泛用于核科学,地质年代测定,同位素稀释质谱分析,同位素示踪分析。

质谱分析法术语同位素质谱法

同位素质谱法( (isotope mass spectrometry)用质谱仪器进行同位素组成的研究和原子质量测量的方法。主要用于核科学、同位素地质学、同位素地球化学和天体物质中同位素丰度的测定。随着同位素稀释法和稳定同位素标记技术的发展,同位素质谱法在生物学、临床医学、药学、农学和环境科学领域也得

MSCRDS同位素碳分析仪

  MS-CRDS同位素碳分析仪   Picarro MS–CRDS同位素碳分析仪是第一款整合高品质WS-CRDS (Picarro)技术和前端燃烧氧化技术测量碳同位素比率(δ13C)和总碳的分析系统。完整的碳方案解决成为目前最简单实用的同位素分析系统,相比同位素比质谱仪(IRMS)也是客户拥有成

质谱分析法术语稳定同位素

稳定同位素(stable isotope)称谓是相对放射性同位素而言的,一般指寿命极长的同位素,通常以半衰期109年为界,大于此数的同位素均可认为是稳定同位素。目前已经发现的稳定核素285种,其中的单核素元素21种,实际仅有264种稳定同位素。