DNA片段的回收实验
树脂回收法 微量柱法 液氮冻融法 常规方法 实验方法原理 本方法特别适合于PCR片段的回收,具有纯度高、操作简洁等特点,经此方法回收的片段可有效的用于重组载体构建。通过15分钟的纯化过程,PCR产物即能被有效地从含引物二聚体、非特异性扩增引物片断等混合物中分离出来,成为高度无盐的、不含其他大分子成分的纯化片断。在较宽的分子量范围内有较高的回收效率。下表为不同长度的DNA片断,在室温条件下,用此纯化系统直接纯化时,各自相应的回收率。 实验材料 DNA片段 ......阅读全文
DNA片段的回收实验——树脂回收法
目的DNA片段的回收技术是重组DNA中的关键技术,回收是指从电泳介质中纯化出目的片断。实验方法原理本方法特别适合于PCR片段的回收,具有纯度高、操作简洁等特点,经此方法回收的片段可有效的用于重组载体构建。通过15分钟的纯化过程,PCR产物即能被有效地从含引物二聚体、非特异性扩增引物片断等混合物中分离
DNA回收电泳槽
产品详细描述 产品特点 □“V”型槽结构,回收凝胶上指定的DNA □ 回收范围宽,超出200b~20Kb □ 回收效率高,可达到95%以上 □ 不需透析膜和专用回收试剂,成本低廉 □ 操作简单,容易掌握,可以观察回收效果 有效回收电泳后的指定
DNA片段的回收实验
实验方法原理 本方法特别适合于PCR片段的回收,具有纯度高、操作简洁等特点,经此方法回收的片段可有效的用于重组载体构建。通过15分钟的纯化过程,PCR产物即能被有效地从含引物二聚体、非特异性扩增引物片断等混合物中分离出来,成为高度无盐的、不含其他大分子成分的纯化片断。在较宽的分子量范围内有较高的回收
DNA片段的回收实验
树脂回收法 微量柱法 液氮冻融法 常规方法 实验方法原理 本方法特别适合于PCR片段的回收,具有纯度高、操作简洁等特点,经此方法
DNA片段回收与纯化
质粒、噬菌体等经酶切,电泳;PCR产物经电泳后,常常需要对一些DNA电泳片段进行回收和纯化,用于亚克隆、探针标记等。DNA回收和纯化常用方法有压碎法、低融点琼脂糖法、冻融法等,也有现成的试剂盒供应。一、冻融法1. 紫外灯下仔细切下含待回收DNA的胶条,将切下的胶条(小于0.6g)捣碎,置于
冻融法回收DNA片段
实验方法原理 冻融法是指采用反复冷冻与融化时由于细胞中形成了冰晶及剩余液体中盐浓度的增高可以使细胞破裂。这种方法简单方便,但要注意那些对温度变化敏感的蛋白质不宜采用此法。 实验材料
DNA小片段的纯化回收
DNA 电泳小于100bp的片断通常在电泳时就比较难观察分辨,需要用分辨率很高的琼脂糖或者丙烯酰胺凝胶。比如Cambrex的NuSieve 3:1或者GTG,或者是大名鼎鼎的MetaPhor琼脂糖。所以实际上对于小片断,可以分为两种情况:一个是真的要回收电泳中特别小的片断,这种情况我们前面有提到,比
冻融法回收DNA片段
冻融法回收DNA片段可用于:(1)获取纯化的DNA片段;(2)回收PCR产物。实验方法原理冻融法是指采用反复冷冻与融化时由于细胞中形成了冰晶及剩余液体中盐浓度的增高可以使细胞破裂。这种方法简单方便,但要注意那些对温度变化敏感的蛋白质不宜采用此法。 实验材料DNA胶条试剂、试剂盒Tris-HCl饱和酚
DNA片断的树脂回收技术
实验概要目的DNA片段的回收技术是重组DNA中的关键技术,回收是指从电泳介质中纯化出目的片断。目前待回收的片断主要有酶切片断和各种PCR片断;回收的介质主要有琼脂糖和PAGE;回收的方法主要有树脂回收、微量柱回收、玻璃奶回收、液氮冻冻融回收及透析袋大量回收等,下面分别介绍树脂、微量柱及液氮冻冻融回收
DNA胶回收实验技术总结
胶回收一. 提高胶回收量的办法:1) 增加电泳时的上样量。2) 电泳缓冲液用新鲜配制的。3) 切胶时尽量只切有条带的胶,减小切胶体积:含目的片断很少的胶就不要要了,不然影响回收率。4) 把切的两块或多块胶融化后,无论多大的体积都用一个管子,转移到同一个柱子上。5) 溶胶时所加的溶液可多一点,这样更有
利用凝胶回收试剂盒DNA回收效率较低或者未回收到目的...
利用凝胶回收试剂盒DNA回收效率较低或者未回收到目的片段原因分析可能有以下几个原因:胶块未完全溶解,可适当延长水浴时间,并增加上下颠倒次数辅助溶解;2. 胶块体积太大,应先将其切为小块,分多次回收;3. 电泳缓冲液pH太高,硅基质膜在高盐低pH结合DNA,如pH太高,应作适当调整;4. 漂洗液中未加
DNA片段的回收实验——常规方法
实验材料NA片段试剂、试剂盒纯化试剂盒异丙醇仪器、耗材离心机电泳仪电泳槽取液器微量真空装置抽滤装置实验步骤1. PAGE电泳,如EB染色的则在紫外灯下切下目的片断,如龈染或其他非放染色的则在关下切下目的片断。2. 用少量脱缓冲液I将目的片断胶条洗至一Eppendorf管中,用玻棒将凝胶捣碎,用1
直接从PCR产物回收纯化DNA
1)直接加90-100μl纯化缓冲液于1.5ml离心管,再加入30~300μl PCR反应物,Vortex混合;2)加入1ml树脂轻轻Vortex 3次,每次间隔1分钟;3)将取出拉杆的注射器筒(3ml)装在纯化柱上,加入上述DNA与树脂混合液,然后装上拉杆,慢慢将混合液推进纯化柱内;4)卸下注射器
DNA纯化实验——DNA凝胶回收试剂盒纯化法
DNA纯化可用于:(1)获得高纯度的DNA;(2)浓缩DNA;(3)测序、遗传信息分析等分子生物学应用。实验方法原理本试剂盒适合从各种琼脂糖凝胶中提取多至 8 μg DNA(70 bp-10 Kb),回收率为 60-85%。琼脂糖凝胶在温和的缓冲液(DE-A 溶液)中溶解,其中的保护剂能防止线状 D
回收DNA进行后续酶切实验问题
洗脱产物含有残留的乙醇会影响酶切,请确保彻底去除漂洗缓冲液。具体方法参见回收效率低的解决方案。
基因组DNA的纯化与回收
实验概要质粒、噬菌体等经酶切,电泳;PCR产物经电泳后,常常需要对一些DNA电泳片段进行回收和纯化,用于亚克隆、探针标记、测序等。DNA回收和纯化常用方法有压碎法、低融点琼脂糖法、冻融法等,也有现成的试剂盒供应。主要试剂酚、氯仿、NaAc、无水乙醇、TE、Tris-HCl饱和酚、异丙醇、低融点琼脂糖
DNA的酶切消化与凝胶回收
[实验原理]限制性内切酶是分子操作中重要的工具酶,是一类能够识别双链DNA分子某种特定的核苷酸序列并切割双链DNA分子的核酸内切酶。可分为3类,Ⅰ和Ⅲ类限制酶兼有甲基化等修饰作用及以来ATP的限制性切割活性,前者结合于识别位点随即切割DNA,后者则在识别位点切割。Ⅱ类限制酶是由两种酶分子组成的复合体
DNA片段的回收实验——微量柱法
实验材料DNA片段试剂、试剂盒纯化试剂盒异丙醇仪器、耗材离心机电泳仪电泳槽取液器微量真空装置抽滤装置实验步骤1. 紫外灯下从胶上切下目的片段,放入一Epphendof管中。2. 离心管在-20℃冷却5~10分钟。3. 将微量柱下套上一Epphendof管,将冷却的胶条装进微量柱中,4℃12 0
高分子量DNA的回收
SageHLS系统是美国Sage公司2017年新发布的平台,它可以直接从细胞样品中快速纯化高分子量DNA。Sage公司的首席科学官Chris Boles,一直在帮助研发团队开发SageHLS平台(HLS是高分子量DNA文库制备系统的缩写)。那么,高分子量DNA对于生命科学和生物医学研究有哪些
DNA凝胶回收试剂盒使用方法
1.在琼脂糖凝胶-EB电泳后,在紫外灯上小心的把所需的DNA片段切下,尽量去除多余的凝胶并尽量少带电泳缓冲液,称重,装入1.5 ml离心管。2. 按照凝胶的重量近似的估计其体积,假设其密度为1g/ml,凝胶的体积可按如下方法计算:若凝胶薄片的重量为0.2 g,则其体积为0.2 ml。3. 在上述离心
DNA片段纯化与回收常见问题分析
Q:利用凝胶回收试剂盒DNA回收效率较低或者未回收到目的片段?A:可能有以下几个原因: 1. 胶块未完全溶解,可适当延长水浴时间,并增加上下颠倒次数辅助溶解; 2. 胶块体积太大,应先将其切为小块,分多次回收; 3. 电泳缓冲液pH太高,硅基质膜在高盐低pH结合DNA,如pH太高,应作适
脉冲场凝胶中浓缩DNA片段的回收
实验方法原理 低熔点琼脂糖切片中的 DNA 首先通过电泳浓缩进入高百分比琼脂糖凝胶中,然后用琼脂糖酶处理而分离。最终 DNA 制备通过微透析纯化。这种方法在把分离的 DNA 注入小鼠受精卵(Schedl et al. 1993) 或转染鼠
DNA片段的回收实验——液氮冻融法
实验材料DNA片段试剂、试剂盒纯化试剂盒异丙醇仪器、耗材离心机电泳仪电泳槽取液器微量真空装置抽滤装置实验步骤1. 紫外灯下从胶上切下目的片段,放入一Epphendof管中。2. 离心1 min,加入500 ul TE,200 ul 酚/氯仿混匀。3. 离心管放入液氮中10~15 min,再室温
脉冲场凝胶中浓缩DNA片段的回收
低熔点琼脂糖切片中的 DNA 首先通过电泳浓缩进入高百分比琼脂糖凝胶中,然后用琼脂糖酶处理而分离。最终 DNA 制备通过微透析纯化。这种方法在把分离的 DNA 注入小鼠受精卵(Schedl et al. 1993) 或转染鼠胚胎干细胞(Choi et al. 1993) 时是非常有效的。本实验来源「
脉冲场凝胶中浓缩DNA片段的回收
实验方法原理 低熔点琼脂糖切片中的 DNA 首先通过电泳浓缩进入高百分比琼脂糖凝胶中,然后用琼脂糖酶处理而分离。最终 DNA 制备通过微透析纯化。这种方法在把分离的 DNA 注入小鼠受精卵(Schedl et al. 1993) 或转染鼠胚胎干细胞(Choi et al. 1993) 时是非
脉冲场凝胶中DNA片段的直接回收
实验方法原理 低熔点琼脂糖制备规模的 PFGE 经常被用于 DNA 片段的分离。不同大小的 DNA 可以用限制酶酶切产生高分辨率酶切图谱或产生用于插入噬菌体或质粒载体的片段。实验材料 DNA 大小标准基因组 DNA试剂、试剂盒 溴化乙锭酚:氯仿仪器、耗材 水浴实验步骤 一、材料1. 缓冲液和溶液溴化
脉冲场凝胶中DNA片段的直接回收
实验方法原理 低熔点琼脂糖制备规模的 PFGE 经常被用于 DNA 片段的分离。不同大小的 DNA 可以用限制酶酶切产生高分辨率酶切图谱或产生用于插入噬菌体或质粒载体的片段。 实验材料
脉冲场凝胶中DNA片段的直接回收
低熔点琼脂糖制备规模的 PFGE 经常被用于 DNA 片段的分离。不同大小的 DNA 可以用限制酶酶切产生高分辨率酶切图谱或产生用于插入噬菌体或质粒载体的片段。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理低熔点琼脂糖制备规模的 PFGE 经常被用于 DNA 片段的分离。不同大小的 D
-日本开发出使用DNA回收稀土新技术
《日本经济新闻》讯,广岛大学与爱信精机子公司爱信COSMOS研究所日前共同研发出使用生物DNA回收稀土的技术。该技术通过使大麻哈鱼、鳟鱼的DNA吸附稀土类金属并注入酸性水溶液,可回收纯度高达90%以上的钕、镝等。 高科技零部件废弃物中含有的稀土中,钕、镝等混杂其中,必须分离钕、镝等才能回收
磁珠法提取dna时,dna回收率偏低是怎么回事
可能磁珠把杂质也包起来了,建议用好的试剂盒提取,BAIDAI的磁珠法核酸提取试剂盒师兄用得还不错,回收率挺高的。