HPV16检验中捕获LAMP产物的方法
2020年6月3日,由Lena Landaverde等在《Analytical and Bioanalytical Chemistry》期刊中发表了《Method for the elucidation of LAMP products captured on lateral flow strips in a point of care test for HPV 16》的文章,文中介绍了一种使用荧光染色的方法对LAMP产物进行表征,Azure Sapphire对5'-FAM标记的产物在488 nm光源下扫描成像来进行验证。 摘要: 环介导扩增(LAMP)是一种等温扩增技术,因其高灵敏度和在等温条件下运行的能力而在诊断工作中受到青睐,LAMP反应产生的扩增子的长度和形状各不相同,因此在双链DNA嵌入染料染色的凝胶上无法辨别。标准表征技术也无法识别哪些扩增子与LFS特异性结合,从而产生视觉读数。我们的目标是在分析开发......阅读全文
3分钟读懂环介导等温扩增(LAMP)那些事儿
什么是LAMP? 环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)是Notomi等人于2000年提出来的一种新的核酸扩增技术。针对靶基因的6个区域设计4种特异引物,在链置换DNA聚合酶(Bst DNA polymerase)作用下,可以在
追踪哺乳动物组织中糖酵解中间产物的来源
葡萄糖一直被认为是哺乳动物最重要的循环能量前体,通过分解代谢途径——糖酵解,每一分子葡萄糖直接产生2个ATP分子。糖酵解还产生NADH和丙酮酸,可在线粒体中被氧化生成额外的ATP。当线粒体呼吸受损时,丙酮酸被NADH还原为乳酸,而乳酸是细胞分泌的废物。但是,哺乳动物并没有排泄大量的乳酸,一个
台湾地区修正《食品中微菌毒素的检验方法》
2017年9月6日,台湾地区“卫福部”发布卫授食字第1061901708号公告,订定《食品中微菌毒素的检验方法》。该检验方法主要适用于贝类及其制品中黄鞠毒素B1等11项微菌毒素的检验。修正要点有: 1. 修正适用范围; 2. 修正离心机的转速; 3. 修正滤
《化妆品中甲基泼尼松的测定》补充检验方法发布
国家药监局关于发布《化妆品中甲基泼尼松的测定》化妆品补充检验方法的公告(2025年第47号)根据《化妆品监督管理条例》,国家药监局批准《化妆品中甲基泼尼松的测定》化妆品补充检验方法,现予发布。 特此公告。 附件:化妆品中甲基泼尼松的测定(BJH 202501) 国家药监局2025年4月29日
台湾地区修正《食品中甜味剂的检验方法》
2017年2月21日,台湾地区“食药署”发布卫授食字1061900251号公告,修正《食品中甜味剂的检验方法》。该公告主旨为修正食品中“醋磺内酯钾、糖精、甘精及环己基(代)磺酰胺酸”这几种甜味剂的检验方法,内容主要是将检验过程中所用的滤膜由PVDF材质修正为Lylon材质。 该公告即日起生效
棉花仪器化检验方法在使用中仍有差异的存在
棉花仪器化感观检验方法、标准问题: 1.感观检验方法的标准不统一、不规范。仪器化公证检验是近两年我国开展的新项目。由于是新鲜事物,大家经验少,全国当时对仪器化公检棉花感观检验没有一个统一的检验方法、标准。因为仪器化检验的样品是刀割的,与手工扦的样品表面形态、外观特征不一样,后来经过专家交
实验分析方法红外光谱在奶酪产地检验中的应用
每个产地的奶酪生产工艺、原料奶的成分及奶酪成熟过程中发生的生物化学反应不同,致使各地产品的品质存在着差异。不同产地的奶酪在颜色及脂肪酸、总蛋白、水溶性氮等化学成分的含量上有差异。传统的奶酪产地鉴别技术是基于对认定产品独特化学成分分析,包括对奶酪脂肪分提物的气相色谱分析和蛋白质电泳分析等。这些方法虽然
食品检验实验中样品提取液浓缩方法的改进
摘要:提取液的浓缩作为食品检验实验的重要内容,它能有效地反映出一个人的实验操作水平。但是常见的提取液浓缩方法存在耗时长、所能浓缩的提取液量少、浪费实验试剂等缺点,因此,对提取液浓缩方法进行改进就显得非常有意义。本文在分析几种常见提取液浓缩方法优缺点的基础上,对样品提取液浓缩方法进行了改进。希望本
实验分析方法红外光谱在酒类产地检验中的应用
酒类属于发酵产品,其发酵过程的微生物区系与生产产地环境密切相关,因此,其质量与产地具有密切关联性。不同产地的酒,其口感和风味上有差异,主要体现在挥发性物质、多酚类物质、颜色、微量元素和同位素、花青素等物质含量的不同。红外光谱在地理标志酒类食品的产地检验中表现优越,尤其是近红外光谱。Cynkar 等将
如何利用LAMP引物设计平台设计IMSA引物?1
IMSA,全称为isothermal multiple-self-matching-initiated amplification,中文名为等温多自配引发扩增。该技术的详细介绍可见本公众号历史文章:“分子诊断万花筒” 开篇——等温多自配引发扩增技术简介。在这里隆地熊为大家介绍一种如何利用LAMP引物
如何利用LAMP引物设计平台设计IMSA引物?2
6. 更改ParameterCondition中默认的Normal至AT rich。默认显示Normal说明我们所上传VP1 gene的序列中GC含量位于40%-65%的正常范围内。高于65%属于GC rich;低于40%属于AT rich。7. 再次点击Generate时平台显示有1000或高于1
如何利用LAMP引物设计平台设计IMSA引物?3
(3)找到该文档,邮件选择打开方式为记事本,可得引物信息。再次点击文档,另存为Up-LF或Down-LB.txt文件。这里的第16套引物,我们需要它的下游环引物即LB,故名为Down-LB。这样命名的目的是为了防止混淆; (4)同样打开LAMP引物设计平台(http://primerexp
基因捕获技术的优点缺点
用常规方法进行基因打靶研究需耗费大量的时间和人力。研究者必须针对靶位点在染色体组文库中筛选相关的染色体组克隆,绘制相应的物理图谱,构建特异性的打靶载体以及筛选中靶ES细胞等。通常一个基因剔除纯合子小鼠的获得需要一年或更长的时间。面对人类基因组计划产生出来的巨大的功能未知的遗传信息,传统的基因剔除方法
基因捕获技术的主要分类
根据报告基因在载体中的位置及报告基因激活表达的方式,基因捕获分为3种类型。增强子捕获载体基因捕获含有一个最小的启动子和翻译起始位点,当载体整合到顺式增强子元件附近时,此增强子将调控报告基因的表达 。对报告基因在体内表达的ES 细胞系插入位点进行克隆鉴定发现插入位置邻近编码序列。关于增强子捕获的诱变比
等温多自配引发扩增技术简介
等温多自配引发扩增(IMSA)即isothermal multiple self-matching-initiatedamplification,是对目前核酸分子检测技术手段的改进和补充,具有简单、快速、高灵敏性高特异性的优势。IMSA最大特点就是,在等温核酸扩增过程中会产生多倍数的能自我配
紫锥菊提取物中的天然产物的分离提取
本文将重点讨论Prep150 LC系统用于从紫锥菊提取物等天然产物的提取分离有效成分。系统自带ChromScope软件简单直观,可快速实现化合物的分离。本文原理同样适用于带紫外发色团的任意化合物的分离。 菊苣酸为紫锥菊中主要化合物的一种,它是苯丙素和咖啡酸的衍生物3,4。具有医疗用途,包
新材料可从湿气中捕获二氧化碳
一个由瑞典和韩国研究人员组成的国际研究团队在最新一期《科学》杂志上发表报告称,他们研制出一种微孔晶体材料,能够比已有材料更有效地捕捉潮湿气体中的二氧化碳。这种新材料或是对抗气候变化的一种有效工具。 减缓气候变化的一个办法是从空气中捕获二氧化碳。到目前为止,这种方法实施起来还很难,因为水的存在
检验中几个常用比值
1、AST/ALT 临床上常用AST/ALT的比值来反映肝细胞的损害情况。ALT位于肝细胞浆内,而AST位于肝细胞浆和线粒体内,正常人AST/ALT比值为1.15左右,也就是AST较ALT稍高。当肝细胞轻度病变时,仅有肝细胞浆内的酶释出,ALT上升幅度较AST为大。象急性肝炎早期,AST/
关于糖化血红蛋白检测方法—离子捕获法的介绍
离子捕获法亦是新近发展起来的新方法,其原理是糖化血红蛋白与相应抗体结合后,联以荧光标记物,而在IMX反应孔中的玻璃纤维预先包被了高分子的四胺合物,使纤维表面带正电,使前述的反应复合物吸附在纤维表面,经过一系列的清洗后测定其荧光强度,从而得到糖化血红蛋白的浓度,该方法适用于成批糖化血红蛋白标本的检
现场PCR检测方案
春暖花开,万物复苏,无论是自然界还是科学界,都在发生着日新月异的变化,近年来医疗诊断及食品安全监测领域的技术创新更是层出不穷,而这一切都离不开分子生物学检测手段的支持。目前大家对于即时现场检测的需求也十分多样化,比如,技术不太熟练的基层人员需要在短时间内能够得到准确的检测结果,或是在野外条件下需要携
食品检验的检验方法包括哪些?
检验方法按照检验项目,大致可以分为无机成分分析方法和有机成分分析方法。无机成分的分析检验项目主要包括微量元素中铜、铅、锌、锰、镉、钙、铁等。分析方法主要包括原子光谱法、分光光度法、电化学法、离子色谱法等方法。有机成分的分析一般由气相色谱或高效液相色谱法以及分子光谱法完成。相关检验中,特别是农药残留,
非参数检验的检验方法介绍
基于秩次:许多非参数检验方法是基于数据的秩次(即数据的排序位置)进行的。将原始数据转化为秩次后,进行统计分析。例如,Wilcoxon 秩和检验和 Kruskal-Wallis 检验都是基于秩次的非参数检验方法。通过比较不同组的秩和来判断它们之间是否存在差异。符号检验和中位数检验:符号检验是一种简单的
环介导等温扩增技术的原理与应用
原理与应用环介导等温扩增(Loop-Mediated Isothermal Amplification,LAMP)技术是日本学者Notomi T于2000年发明的一种新的DNA扩增技术,该方法能够高效、特异、快速的在等温条件下完成。通过一系列的链置换扩增反应,该方法能够在1h内就可以将靶基因
环介导等温扩增技术的原理与应用
环介导等温扩增(Loop-Mediated Isothermal Amplification,LAMP)技术是日本学者Notomi T于2000年发明的一种新的DNA扩增技术,该方法能够高效、特异、快速的在等温条件下完成。通过一系列的链置换扩增反应,该方法能够在1h内就可以将靶基因扩
长崎大学成功研制新冠检测系统-LAMP基因扩增上“热搜”
目前,新型冠状病毒感染(COVID-19)已成为世界各地的威胁,作为全球公共卫生的首要议题,需要尽快采取措施。 但是在医疗领域,如今日本的新型冠状病毒快速检测方法还没有确立完成。 但是最近也有一个好消息。 3月19日,长崎大学研究团队宣布:长崎大学与佳能医疗系统株式会社共同开发的新型冠状病
华南植物园在天然产物研究中取得进展
中国科学院华南植物园植物化学资源生物学研究组科研人员从一株Acremonium persicinum SC0105真菌代谢产物中获得了7个具有新骨架结构的acremine类二聚体化合物(Bisacremines A-G),并提出了它们的生物合成途径。生物活性试验发现化合物Bisacremine
多氯代甾体天然产物合成研究中获进展
含氯天然产物因其独特的生物活性受到有机合成化学家的关注,同时含氯甾体药物作为一类重要的合成甾体在临床上广泛应用,因此发展高效的合成策略实现含氯甾体分子的简洁、精准合成具有重要的研究意义。Clionastatins A和B是意大利科学家Fattorusso等于2004年在海洋穴居海绵Cliona
临床基因扩增检验实验室标本扩增产物分析区的污染防治
下述操作在本区内进行:扩增片段的测定。 核酸扩增后产物的分析方法多种多样,如膜上或微孔板上探针杂交方法(同位素标记或非同位素标记)、琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、Southern转移、核酸测序方法等。目前国内的商品试剂盒绝大部分均采用非同位素标记的微孔板上探针杂交方法,即PCR-ELIS
PCR产物的克隆
PCR 产物的克隆 PCR 产物克隆大致分为两类,即平头连接和粘头连接。 平头连接是将制备好的平头载体和补平或削平的 PCR 产物直接进行连接。载体可用EcoR V 或 Sma I 切成平头; PCR 产物纯化后,可以在 22 ℃用DNA聚合酶I作用30min(利用该酶所具有的3’→5’外切酶
PCR产物的克隆
PCR产物克隆大致分为两类,即平头连接和粘头连接。 平头连接是将制备好的平头载体和补平或削平的PCR产物直接进行连接。载体可用EcoR V或Sma I切成平头;PCR产物纯化后,可以在22℃用DNA聚合酶I作用30min(利用该酶所具有的3’→5’外切酶活性和5’→3’的聚合酶活性)。如果要求