核酸的定量测定实验
实验方法原理 核酸、核苷酸及衍生物都具有共轭双键系统, 能吸收紫外光, RNA、DNA 的紫外吸收高峰在260 nm 波长处。一般在260 nm 波长下, 每1 ml 含1 μg RNA 的溶液光吸收值为0.022 , 每1 ml 含1 μg DNA 的溶液光吸收值约为0.020 , 故测定未知浓度RNA 或DNA 溶液在260 nm 的光吸收值即可计算出其中核酸的含量。此法操作简便、迅速。若样品内混有大量的核苷酸或蛋白质等能吸收紫外光的物质, 则测定误差较大, 故应该先除去。实验材料 核酸试剂、试剂盒 氨水钼酸铵-高氯酸试剂蒸馏水仪器、耗材 分析天平离心机容量瓶紫外分光光度计吸管冰浴锅实验步骤 1. 用分析天平准确称取待测的核酸样品500 mg , 加入少量蒸馏水调成糊状, 再加入少量的水稀释。然后用5% ～6% 氨水调至pH7 , 定容到50 ml 。2. 取两支离心管, 向第一只......阅读全文
叶绿体色素的提取、分离、性质和定量测定实验
实验方法原理1. 溶解性：叶绿素和类胡萝卜素均不溶于水而溶于有机溶剂，常用乙醇或丙酮提取。2. 分离色素的方法有多种，如纸层析. 柱层析等。纸层析是其中较简单的一种。当溶剂不断地从层析滤纸上流过时由于混合色素中各种成分在两相中（即流动相和固定相）间有不同的分配系数，它们的移动速度不同，使样品中的各种
叶绿体色素的提取、分离、性质和定量测定实验
实验方法原理 1. 溶解性：叶绿素和类胡萝卜素均不溶于水而溶于有机溶剂，常用乙醇或丙酮提取。2. 分离色素的方法有多种，如纸层析. 柱层析等。纸层析是其中较简单的一种。当溶剂不断地从层析滤纸上流过时由于混合色素中各种成分在两相中（即流动相和固定相）间有不同的分配系数，它们的移动速度不同，使样品中的各
叶绿体色素的提取、分离、性质和定量测定实验
实验方法原理1. 溶解性：叶绿素和类胡萝卜素均不溶于水而溶于有机溶剂，常用乙醇或丙酮提取。2. 分离色素的方法有多种，如纸层析. 柱层析等。纸层析是其中较简单的一种。当溶剂不断地从层析滤纸上流过时由于混合色素中各种成分在两相中（即流动相和固定相）间有不同的分配系数，它们的移动速度不同，使样品中的各种
crystal数字PCR如何实现的核酸绝对定量？
crystal数字PCR技术是一种核酸分子的绝对定量技术，原理是将PCR反应体系分配到大量微小的反应器中，在每个微反应器中包含或不包含 1 个或多个拷贝的目标核酸分子 (DNA 模板) ，进行"单分子模板"PCR 扩增。扩增结束后，通过阳性反应单元(通过终点荧光信号判断)的数目和统计学方法计
核糖核酸的测定
【实验原理】RNA分子中的核糖在浓酸中加热，脱水转变成糖醛，后者在氯化铁存在下，与地衣酚试剂（3，5-二羟基甲苯）反应，缩合成绿色化合物，在670nm处有最大吸收峰，从而可进行定量测定。待测样品中的RNA浓度在20～200µg/mL之间时，其吸光度与浓度成正比。反应式如下：核 糖 糖 醛 绿色化合物
核酸电泳实验
琼脂糖凝胶电泳是分离鉴定和纯化DNA片段的标准方法。该技术操作简便快速，可以分辨用其它方法（如密度梯度离心法）所无法分离的DNA片段。当用低浓度的荧光嵌入染料溴化乙啶EB（德元国际Cat# LY5009）染色,在紫外光下至少可以检出1-10ng的DNA条带,从而可以确定DNA片段在凝胶中的位置。此外
核酸染色实验
实验方法原理 在一般情况下，通过盐酸水解后使 DNA 残基分解碱基，然后从碳键处打断糖苷键而游离出醛基，再与无色复红液（Schiff）进行反应，形成紫红色的复合物（DNA）。常用 Feuhgen-Rossenbeck 染色法（孚尔根染色法）。实验材料 石蜡组织切片试剂、试剂盒 Schiff 试剂染色
核酸免疫实验
介绍了用表达抗原的 DNA 增强免疫应答的途径。介绍了核酸免疫的两种方法：①注射含有 DNA 表达载体的生理盐水；② 用 基 因 枪 注 射 DNA。还包括了基因枪方法中使用的 DNA 包被金珠的制备和保存方法。实验步骤基 本 方 案 1 小 鼠 注 射 接 种DNA在免疫前应先阅读动物处理（附 录
核酸免疫实验
基 本 方 案 1 小 鼠 注 射 接 种DNA在免疫前应先阅读动物处理（附 录 2C) 和 接 种 的（附 录 2E) 指导说明。在正式实验之前需先进行肌肉和皮下注射练习； D N A 的精准注射对于免疫成功起关键作用。可以 用 India ink (或相同的染料）来定位注射的部位是否正确。材料2
如何做核酸的定量分析方法
核酸的定量是超微量分光光度计使用频率zui高的功能。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸，单链、双链DNA，以及RNA。核酸的zui高吸收峰的吸收波长260 nm。每种核酸的分子构成不一，因此其换算系数不同。定量不同类型的核酸，事先要选择对应的系数。如:1OD 的吸光值分别相当于50μg/ml的dsD
使用荧光定量PCR方法进行核酸检测的步骤
进行核酸检验，需要经过取样、留样、留存、核酸提取、上机检测五个步骤。 核酸检测的第一步就是采集人体分泌物，用鼻试子或咽试子擦拭鼻腔或咽后壁及双侧咽扁桃体处。 第二步医务人员进行留样，将试子头浸入细胞保存液中，折断尾部后立即旋紧管盖。 第三部要将样本放入密闭袋中，保存好并及时送检。
核酸序列的检索实验
实验方法原理掌握核酸序列检索的操作方法；熟悉GenBank数据库序列格式及其主要字段的含义；了解EMBL数据库序列格式及其主要字段的含义；熟悉GenBank数据库序列格式的FASTA序列格式显示与保存；实验材料电脑仪器、耗材笔记本笔实验步骤1. 使用Entrez信息查询系统检索核酸序列BC0608
叶绿体色素的定量测定
实验方法原理根据叶绿体色素提取液对可见光谱的吸收，利用分光光度计在某一特定波长下测定其光密度，即可用公式计算出提取液中各色素的含量。根据朗伯—比尔定律，某有色溶液的光密度D与其中溶质浓度C和液层厚度L成正比，即：D=kCL式中：k为比例常数。当溶液浓度以百分浓度为单位，液层厚度为1cm时，k为该物质
叶绿体色素的定量测定
【原理】根据叶绿体色素提取液对可见光谱的吸收，利用分光光度计在某一特定波长下测定其光密度，即可用公式计算出提取液中各色素的含量。根据朗伯—比尔定律，某有色溶液的光密度D与其中溶质浓度C和液层厚度L成正比，即：D=kCL式中：k为比例常数。当溶液浓度以百分浓度为单位，液层厚度为1cm时，k为该物质的比
定量PCR实验
实验材料 限制性内切核酸酶反转录酶热稳定 DNA 聚合酶dCTP靶核酸试剂、试剂盒 扩增缓冲液dNTP 贮存液胎盘 RNase 抑制剂仪器、耗材 琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶屏蔽型枪头离心管正向排液式移液器PCR 仪实验步骤 一、材料1. 缓冲液与溶液10X 扩增缓冲液4 种 dNTP 贮存液（20
自动化核酸提取、检测和定量平台
在现今分子生物领域中，样本的核酸提取、检测和定量已是每个实验室常用的实验手段。近年，实时定量PCR和第二代测序技术的诞生更令核酸提取的需求大大增加。这些新的核酸检测技术对核酸的纯度要求比较高，所以核酸提取的质量也比以前更受注重。另一方面，准确的核酸定量对于这些新技术，如第二代测序，起了成败的关键作用
低丰度核酸定量试剂盒介绍
从不同的生物或临床样本中可以提取的DNA或RNA数量差异很大。例如，虽然少量的DNA或RNA可以很容易地从过量的组织和细胞中纯化（例如从几毫克的组织中），但许多液体活检样本可能会产生极少量的DNA或RNA。事实上，每100μL的尿液或血浆等样品可能产生1-100 ng或更少的DNA或RNA。测得
核酸序列分析实验
实验方法原理针对核酸序列的分析就是在核酸序列中寻找基因，找出基因的位置和功能位点的位置，以及标记已知的序列模式等过程。在此过程中，确认一段 DNA 序列是一个基因需要有多个证据的支持。一般而言，在重复片段频繁出现的区域里，基因编码区和调控区不太可能出现；如果某段 DNA 片段的假想产物与某个已知的蛋
核酸染色实验——DNA
核酸是细胞内的一种大分子化合物，核酸不仅存在于细胞核内，也存在于细胞质中，动物、植物和微生物等都含有核酸。核酸可分为核糖核酸（RNA）和脱氧核糖核酸（DNA）。经过染料和化学试剂，能够清楚地显示 DNA 和核仁组成区嗜银蛋白（AgNOR）物质。实验方法原理在一般情况下，通过盐酸水解后使 DNA 残基
尿糖定量测定方法
尿糖定量测定是一种临床化验检查项目、化验标本为24小时尿，取其中100-200毫升送检，并记录总尿量、参考值为0.6-5.0毫摩尔/24小时、尿糖定量测定可以更精确地测出糖尿病患者每日尿糖排出量、为临床用药或饮食控制的治疗效果起监护作用。24h尿糖定量对判断糖尿病的程度和指导用药较尿糖定性更为准
尿糖定量测定方法
尿糖定量测定是一种临床化验检查项目、化验标本为24小时尿，取其中100-200毫升送检，并记录总尿量、参考值为0.6-5.0毫摩尔/24小时、尿糖定量测定可以更精确地测出糖尿病患者每日尿糖排出量、为临床用药或饮食控制的治疗效果起监护作用。24h尿糖定量对判断糖尿病的程度和指导用药较尿糖定性更为准
尿糖定量测定概述
尿糖定量测定：一种临床化验检查项目、化验标本为24小时尿，取其中100-200毫升送检，并记录总尿量、参考值为0.6-5.0毫摩尔/24小时、尿糖定量测定可以更精确地测出糖尿病患者每日尿糖排出量、为临床用药或饮食控制的治疗效果起监护作用。24h尿糖定量对判断糖尿病的程度和指导用药较尿糖定性更为准
分光光度计应用核酸的定量介绍
核酸的定量是分光光度计使用频率最高的功能。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸，单链、双链DNA，以及RNA。核酸的最高吸收峰的吸收波长260 nm。每种核酸的分子构成不一，因此其换算系数不同。定量不同类型的核酸，事先要选择对应的系数。如：1OD 的吸光值分别相当于50μg/ml的dsDNA，37μg/ml
核酸探针标记的实验过程
实验原理分子生物研究中，zui常用的探针即为双链DNA探针，它广泛应用于转基因植物拷贝数的鉴定、临床诊断等方面。双链DNA探针的合成方法主要有下列两种:切口平移法和随机引物合成法。切口平移法(nick translation) 当双链DNA分子的一条链上产生切口时,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可
核酸探针标记的实验过程
实验原理分子生物研究中，最常用的探针即为双链DNA探针，它广泛应用于转基因植物拷贝数的鉴定、临床诊断等方面。双链DNA探针的合成方法主要有下列两种:切口平移法和随机引物合成法。切口平移法(nick translation) 当双链DNA分子的一条链上产生切口时,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可将
核酸探针标记的实验过程
实验原理分子生物研究中，zui常用的探针即为双链DNA探针，它广泛应用于转基因植物拷贝数的鉴定、临床诊断等方面。双链DNA探针的合成方法主要有下列两种:切口平移法和随机引物合成法。切口平移法(nick translation) 当双链DNA分子的一条链上产生切口时,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可将
菌种保藏实验_核酸的保存
实验步骤1. 以溶液形式置低温保存DNA 溶于无菌 TE 缓冲液（10 mmol/L Tris • HCl，1 mmol/L EDTA，pH 8.0）中，其中 EDTA 的作用是整合溶液中二价金属离子，从而抑制 DNA 酶的活性（Mg2+ 是 DNA 酶的激活剂）。 TE 的 pH 为 8.0 是为
定量限测定方法的评价
定量限 (limit of quantitation，LOQ)是指在保证具有一定可靠性(一定准确度和精密度)的前提下，分析方法能够测定出的样品中药物的最低浓度。 它反映了分析方法测定低药物浓度样品时具有的可靠性。它与上述的检测限的差别在于：定量限要定量测定某一药物在样品介质中的最低浓度，且定量
薄层层析的定量测定
薄层层析的定量测定： 1）直接测定法：色谱分离后，直接用肉眼观察比较或用仪器扫描斑点而测定其含量。 a.目测法样品经色谱分离后，直接观察所得斑点的大小和颜色的深浅，并与标准品在相同条件下展开所得到的一系列已知不同浓度的标准斑点相比较，而近似地判断样品中所测成分的含量。 b.测面积法
超微量分光光度计的核酸的定量
核酸的定量是超微量分光光度计使用频率最高的功能。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸，单链、双链DNA，以及RNA。核酸的最高吸收峰的吸收波长260 nm。每种核酸的分子构成不一，因此其换算系数不同。定量不同类型的核酸，事先要选择对应的系数。如：1OD 的吸光值分别相当于50μg/ml的dsDNA，37