酶测定法实验
试剂、试剂盒 核心 RNA 聚合酶纯σ32 标准品纯化的 σ32 样品核心 RNA 聚合酶-σ32 复合物样品[α-32P]UTP终止液DEAE-纤维素（DE81) 纸片P04 清洗缓冲液乙醇反应液仪器、耗材 水浴锅实验步骤 材料与设备核心 RNA 聚合酶 (2.3 mg/ml)纯σ32 标准品 (0.8 mg/ml)纯化的 σ32 样品，由 POROS 50S 阳离子交换柱洗脱所得核心 RNA 聚合酶-σ32 复合物样品，由免疫亲和柱洗脱所得[α-32P]UTP（ 用 2.5uCi/ml 的反应液)水浴，设定 37°C终止液 (0.2mol/LEDTA)DEAE-纤维素（DE81) 纸片P04 清洗缓冲液（5%Na2 HP04)乙醇（95%)试剂反应液(配方，见“试剂的配制”，PP.184~189)搡作程序1) 用吸管取 50-ul 等分反应液（含 2.5uCi[α-32P]UTP/ml) 加入置于冰上的各试管。2) 各加......阅读全文
酶测定法实验
在本单元中，用一种较简单的方法测定它对核心 RNA 聚合酶自非特异性模板 poly(dAT) 起始转录的刺激作用。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南，作者：朱厚础。试剂、试剂盒核心 RNA 聚合酶纯σ32 标准品纯化的 σ32 样品核心 RNA 聚合酶-σ32 复合物样品[α-32P]UTP终止液
酶测定法实验
试剂、试剂盒 核心 RNA 聚合酶纯σ32 标准品纯化的 σ32 样品核心 RNA 聚合酶-σ32 复合物样品[α-32P]UTP终止液DEAE-纤维素（DE81) 纸片P04 清洗缓冲液乙醇反应液仪器、耗材 水浴锅实验步骤 材料与设备核心 RNA 聚合酶 (2.3 mg/ml)纯σ32 标准品 (
酶测定法实验
酶测定法实验 试剂、试剂盒 核心 RNA 聚合酶 纯σ32 标准品 纯化的 σ32 样品
免疫酶测定法简介
免疫酶测定法是一种用酶标记一抗或二抗检测特异性抗原或抗体的方法。本法将抗原抗体反应的高度特异性与酶对底物高效催化作用结合起来，根据酶作用底物后显色，以颜色变化判断实验结果。目前常用的方法有酶免疫组化技术和酶联免疫吸附试验（ELISA)。前者测定细胞表面抗原和组织内的抗原，后者主要测定可溶性抗原或抗体
酶蛋白的传统测定法
酶蛋白浓度测定的方法：酶浓度严格来说是指酶分子的质量浓度，常以酶蛋白浓度来表示。人体体液中的酶有几百种，除LPS、LCAT、ChE、铜氧化酶（CER）外，大多数酶的含量在μg/L水平甚至更低。因此，酶活性浓度的测定是主要测定方法。20世纪70年代以后，随着新技术特别是免疫学技术的发展，酶的定量分
酶联免疫斑点(ELISPOT)测定法
酶联免疫斑点(ELISPOT)测定法是一种在单细胞悬液中检测分泌某种特定蛋白质的细胞和定量分析产生该特定蛋白质的细胞频率的有力工具。1983年，Crekinsky等运用ELISPOT技术成功检出分泌特异性抗体的细胞频率，经过不断发展，目前该技术已广泛用于检测产生、分泌多种其他效应分子
酶活性测定法的常用方法介绍
常用的测定方法有取样法和连续法。 取样法是在酶反应开始后不同的时间，从反应系统中取出一定量的反应液，并用适当方法停止其反应，再根据产物和底物在化学性质上的差别进行分析，求得单位时间内酶促反应的变化量。 连续法则是基于底物和产物在物理化学性质上的不同，在反应过程中对反应系统添加酶的变性剂以终止
酶活性测定法的测定方式介绍
酶活力的测定可采用两种方式： 其一是测定完成一定量反应所需的时间，其二是测定单位时间内的酶催化的化学反应量。 终点法 该方式是在特定条件下，将样品中要检知的酶作用一定量的底物，然后根据反应进行到某一程度(即达到某一指标)所需要的时间长短来估计酶的活力。 其一个发展是采用检测器对反应进行连
酶联免疫斑点(ELISPOT)测定法
酶联免疫斑点(ELISPOT)测定法是一种在单细胞悬液中检测分泌某种特定蛋白质的细胞和定量分析产生该特定蛋白质的细胞频率的有力工具。1983年，Crekinsky等运用ELISPOT技术成功检出分泌特异性抗体的细胞频率，经过不断发展，目前该技术已广泛用于检测产生、分泌多种其他效应分子的细胞(如细胞因
胃蛋白酶的测定—胃蛋白酶测定法
方法名称： 胃蛋白酶的测定—胃蛋白酶测定法应用范围： 本方法采用胃蛋白酶测定法测定胃蛋白酶的效价。本方法适用于胃蛋白酶。方法原理： 精密称取本品适量，加盐酸溶液制成每1mL中约含0.2-0.4个单位的溶液，照胃蛋白酶测定法，测定胃蛋白酶的效价。试剂： 1. 血红蛋白试液2. 三氟醋酸溶液3. 盐酸溶
胃蛋白酶的测定—胃蛋白酶测定法
方法名称： 胃蛋白酶的测定—胃蛋白酶测定法应用范围： 本方法采用胃蛋白酶测定法测定胃蛋白酶的效价。本方法适用于胃蛋白酶。方法原理： 精密称取本品适量，加盐酸溶液制成每1mL中约含0.2-0.4个单位的溶液，照胃蛋白酶测定法，测定胃蛋白酶的效价。试剂： 1. 血红蛋白试液2. 三氟醋酸溶液3. 盐酸溶
胃蛋白酶的测定—胃蛋白酶测定法
方法名称： 胃蛋白酶的测定—胃蛋白酶测定法应用范围： 本方法采用胃蛋白酶测定法测定胃蛋白酶的效价。本方法适用于胃蛋白酶。方法原理： 精密称取本品适量，加盐酸溶液制成每1mL中约含0.2-0.4个单位的溶液，照胃蛋白酶测定法，测定胃蛋白酶的效价。试剂： 1. 血红蛋白试液2. 三氟醋酸溶液3. 盐酸溶
胃蛋白酶的测定—胃蛋白酶测定法
方法名称： 胃蛋白酶的测定—胃蛋白酶测定法应用范围： 本方法采用胃蛋白酶测定法测定胃蛋白酶的效价。本方法适用于胃蛋白酶。方法原理： 精密称取本品适量，加盐酸溶液制成每1mL中约含0.2-0.4个单位的溶液，照胃蛋白酶测定法，测定胃蛋白酶的效价。试剂： 1. 血红蛋白试液2. 三氟醋酸溶液3. 盐酸溶
胃蛋白酶测定法的相关介绍
方法名称： 胃蛋白酶的测定—胃蛋白酶测定法 应用范围： 本方法采用胃蛋白酶测定法测定胃蛋白酶的效价。 本方法适用于胃蛋白酶。 方法原理： 精密称取本品适量，加盐酸溶液制成每1mL中约含0.2-0.4个单位的溶液，照胃蛋白酶测定法，测定胃蛋白酶的效价。 试剂： 1. 血红蛋白试液 2.
蛋白酶的测定实验——Anson－测定法
实验方法原理血红蛋白不是很贵，被用来做这个实验。由于处于天然结构的蛋白质通常可以抵制蛋白酶的攻击，因此首先用尿素使血红蛋白失活。分离非水解蛋白质后，利用 Folin-Ciocaheau 试剂的上清液测量消化产物。这种试剂优先识别色氨酸和酪氨酸，但是也可以识别半胱氨酸和组氨酸。'实验温度取决于
关于胰蛋白酶的测定法介绍
取底物溶液3.0ml，加0.001mol/L盐酸溶液200μl，混匀，作为空白。另取供试品溶液200μl，加底物溶液（恒温于25.0℃±0.5℃）3.0ml，立即计时，混匀，使比色池内的温度保持在25℃±0.5℃，照紫外－可见分光光度法（2010年版药典二部附录Ⅳ A），在253nm的波长处，每
蛋白酶的测定实验——酪蛋白测定法
实验方法原理实验中的氨基酸由蛋白酶从酪蛋白中水解下来。在分离出 TCA 沉淀中未分解的蛋白质后，用分光光度测定的方法对其上清液分析，氨基酸来自于酪蛋白。依据酪蛋白校准曲线，已对其量化。这个鉴定不是很敏感。实验材料酶样品试剂、试剂盒Tris-HClNaOH乙酸三氯乙酸L-酪氨酸酪蛋白底物仪器、耗材分光
发光酶免疫测定法的原理和应用特点
中文名称发光酶免疫测定英文名称luminescent enzyme immunoassay;LEIA定 义用参与发光反应的酶(常用碱性磷酸酶、辣根过氧化物酶等)标记抗原或抗体，免疫反应后加入发光试剂，根据发光体系的发光强度对抗体或抗原进行的测定。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），方法与技术
真核生物钙调素的酶联免疫测定法
原理 本法是一种测定抗体的竞争性固相酶联免疫测定法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)。先将抗原──CaM与固相载体（聚苯乙烯微量滴定板）结合，然后将经待检CaM（标准样品或检样）部分中和的兔抗CaM抗体加入微量滴定板孔中，抑制固相CaM和
蛋白酶的测定实验——偶氮酪蛋白测定法
实验方法原理酪蛋白的敏感性鉴定可以通过这个实验得到很大程度的改善。含氮的基团与酪蛋白的共价键被蛋白水解时切断，用 TCA 上清液测定它们的颜色变化。实验材料蛋白酶溶液试剂、试剂盒磷酸钾偶氮酪蛋白（磺胺偶氮酪蛋白）三氯乙酸仪器、耗材分光光度计实验步骤0.5 ml 偶氮酪蛋白溶液0.2 ml 蛋白酶溶液
蛋白酶的测定实验——茚三酮测定法
实验方法原理茚三酮反应是一种灵敏度高的蛋白实验。游离的氨基酸可以被高敏感性检测出来。这个方法可以被用来继续蛋白质的酶降解。上述的酪蛋白降解在这个实验系统中用作蛋白酶反应。未水解的蛋白质被三氯乙酸沉淀下来，而茚三酮反应发生在上清液。实验材料蛋白酶溶液试剂、试剂盒Tris-HClNaOH乙酸三氯乙酸酪蛋
关于酶联免疫吸附测定法标记用酶的介绍
用于标记抗体或抗抗体的酶须具有下列特性：有高度的活性和敏感性；在室温下稳定；反应产物易于显现；能商品化生产。当前应用较多的有辣根过氧化物酶（HRP）、碱性磷酸酶、葡萄糖氧化酶等，其中以HRP应用最广。 1、酶联免疫吸附测定法标记用酶—过氧化物酶 过氧化物酶广泛分布于植物中，辣根中含量最高，从
酶免疫测定法检查非淋球菌尿道炎的介绍
酶免疫测定法检测患者泌尿生殖道标本中的衣原体抗原，判断结果比较客观。本试验的敏感性为60%一90%，特异性为92%一97%。 衣原体培养衣原体是专性细胞内寄生物，只有在活细胞中才能生长和增殖。目前实验室常用的细胞为McCoy细胞及Heh229细胞。所取标本中必须含有活细胞。因此，取材的棉拭子一
馏程测定法
馏程系指一种液体照下述方法蒸馏,校正到标准压力[101.3kPa(760mmHg)]下，自开始馏出第5滴算起，至供试品仅剩3~4ml或一定比例的容积馏出时的温度范围。某些液体药品具有一定的馏程，测定馏程可以区别或检查药品的纯杂程度。用国产19标准磨口蒸馏装置一套。A为蒸馏瓶;B为冷凝管，馏程在130
熔点测定法
依照待测物质的性质不同，测定法分为下列3种。各品种项下未注明时，均系指第一法。折叠第一法测定易粉碎的固体药品取供试品适量，研成细粉，除另有规定外，应按照各药品项下干燥失重的条件进行干燥。若该药品为不检查干燥失重、熔点范围低限在135℃以上、受热不分解的供试品，可采用105℃干燥;熔点在135℃以下或
余氯测定法
沉淀滴定法（氯离子的测定）1、所用试剂氯化钠标准溶液：（1毫升=1毫克Cl¯）：取基准试剂或优级纯氯化3—4克至于瓷坩埚中，于高温炉升温至500℃灼烧10分钟，然后在干燥器内内冷却至室温；准确称取1.649克氯化钠，现用少量蒸馏水溶解，再用蒸馏水稀释至1000毫升。硝酸银标准溶液（1毫升=1毫克Cl
旋光测定法
动调节旋光测定仪的面市,使测定结果有一定的精确度和再现性,因此常被研究单位和生产厂家用作旋光性产品的含量分析,即用旋光仪测定样品的旋光度α,计算比旋光度[α]D20,再换算成样品光学纯度ee值。旋光测定法需要的样品较多，通常需0.2-2g纯样品，5-25ml待测溶液；与色谱法相比，方法的准确度﹑精密
利福平的测定法
临用新制或存放于2～8℃条件下6小时内使用。取本品适量，精密称定，加乙腈溶解并定量稀释制成每1ml中约含1mg的溶液；精密量取适量，用乙腈-水（1：1）定量稀释制成每1ml中约含0.1mg的溶液，作为供试品溶液，精密量取10μl注入液相色谱仪，记录色谱图；另取利福平对照品适量，精密称定，同法测定。按
旋光测定法
动调节旋光测定仪的面市,使测定结果有一定的度和再现性,因此常被研究单位和生产厂家用作旋光性产品的含量分析,即用旋光仪测定样品的旋光度α,计算比旋光度[α]D20,再换算成样品光学纯度ee值。旋光测定法需要的样品较多，通常需0.2-2g纯样品，5-25ml待测溶液；与色谱法相比，方法的准确度﹑精密度较
谷物灰分测定法
本标准适用于谷物灰分含量的测定。1 方法原理将一定重量粉碎的谷物，装入已知重量的坩埚中，经高温电炉灼烧（550±10℃）至恒重后，减去坩埚重，即为所测谷物灰分含量。2 仪器、设备2.1 分析天平：感量0.1 mg。2.2 粉碎机：实验室用。2.3 筛子：实验室用。2.4 600W电炉：具有调压变压器