蛋白酶的测定实验——偶氮酪蛋白测定法
实验方法原理酪蛋白的敏感性鉴定可以通过这个实验得到很大程度的改善。含氮的基团与酪蛋白的共价键被蛋白水解时切断,用 TCA 上清液测定它们的颜色变化。实验材料蛋白酶溶液试剂、试剂盒磷酸钾偶氮酪蛋白(磺胺偶氮酪蛋白)三氯乙酸仪器、耗材分光光度计实验步骤0.5 ml 偶氮酪蛋白溶液0.2 ml 蛋白酶溶液25℃ 时培养 30 min 后,加 0.2 ml 10% 三氯乙酸停止反应,离心 5 min。于 340 nm 处测上清液的吸收值,1U 是指 1 h 内,能使吸收值变化 1 的酶量。注意事项其他试剂:0.1 mol/L 磷酸钾,pH 8.00.2% 偶氮酪蛋白(磺胺偶氮酪蛋白)溶于 0.1 mol/L 磷酸钾溶液,pH 8.010% 三氯乙酸(TCA,质量浓度)展......阅读全文
蛋白酶的测定实验——偶氮酪蛋白测定法
实验方法原理酪蛋白的敏感性鉴定可以通过这个实验得到很大程度的改善。含氮的基团与酪蛋白的共价键被蛋白水解时切断,用 TCA 上清液测定它们的颜色变化。实验材料蛋白酶溶液试剂、试剂盒磷酸钾偶氮酪蛋白(磺胺偶氮酪蛋白)三氯乙酸仪器、耗材分光光度计实验步骤0.5 ml 偶氮酪蛋白溶液0.2 ml 蛋白酶溶液
蛋白酶的测定实验——酪蛋白测定法
实验方法原理实验中的氨基酸由蛋白酶从酪蛋白中水解下来。在分离出 TCA 沉淀中未分解的蛋白质后,用分光光度测定的方法对其上清液分析,氨基酸来自于酪蛋白。依据酪蛋白校准曲线,已对其量化。这个鉴定不是很敏感。实验材料酶样品试剂、试剂盒Tris-HClNaOH乙酸三氯乙酸L-酪氨酸酪蛋白底物仪器、耗材分光
蛋白酶的测定实验——Anson-测定法
实验方法原理血红蛋白不是很贵,被用来做这个实验。由于处于天然结构的蛋白质通常可以抵制蛋白酶的攻击,因此首先用尿素使血红蛋白失活。分离非水解蛋白质后,利用 Folin-Ciocaheau 试剂的上清液测量消化产物。这种试剂优先识别色氨酸和酪氨酸,但是也可以识别半胱氨酸和组氨酸。'实验温度取决于
胃蛋白酶的测定—胃蛋白酶测定法
方法名称: 胃蛋白酶的测定—胃蛋白酶测定法应用范围: 本方法采用胃蛋白酶测定法测定胃蛋白酶的效价。本方法适用于胃蛋白酶。方法原理: 精密称取本品适量,加盐酸溶液制成每1mL中约含0.2-0.4个单位的溶液,照胃蛋白酶测定法,测定胃蛋白酶的效价。试剂: 1. 血红蛋白试液2. 三氟醋酸溶液3. 盐酸溶
胃蛋白酶的测定—胃蛋白酶测定法
方法名称: 胃蛋白酶的测定—胃蛋白酶测定法应用范围: 本方法采用胃蛋白酶测定法测定胃蛋白酶的效价。本方法适用于胃蛋白酶。方法原理: 精密称取本品适量,加盐酸溶液制成每1mL中约含0.2-0.4个单位的溶液,照胃蛋白酶测定法,测定胃蛋白酶的效价。试剂: 1. 血红蛋白试液2. 三氟醋酸溶液3. 盐酸溶
胃蛋白酶的测定—胃蛋白酶测定法
方法名称: 胃蛋白酶的测定—胃蛋白酶测定法应用范围: 本方法采用胃蛋白酶测定法测定胃蛋白酶的效价。本方法适用于胃蛋白酶。方法原理: 精密称取本品适量,加盐酸溶液制成每1mL中约含0.2-0.4个单位的溶液,照胃蛋白酶测定法,测定胃蛋白酶的效价。试剂: 1. 血红蛋白试液2. 三氟醋酸溶液3. 盐酸溶
胃蛋白酶的测定—胃蛋白酶测定法
方法名称: 胃蛋白酶的测定—胃蛋白酶测定法应用范围: 本方法采用胃蛋白酶测定法测定胃蛋白酶的效价。本方法适用于胃蛋白酶。方法原理: 精密称取本品适量,加盐酸溶液制成每1mL中约含0.2-0.4个单位的溶液,照胃蛋白酶测定法,测定胃蛋白酶的效价。试剂: 1. 血红蛋白试液2. 三氟醋酸溶液3. 盐酸溶
蛋白酶的测定实验——茚三酮测定法
实验方法原理茚三酮反应是一种灵敏度高的蛋白实验。游离的氨基酸可以被高敏感性检测出来。这个方法可以被用来继续蛋白质的酶降解。上述的酪蛋白降解在这个实验系统中用作蛋白酶反应。未水解的蛋白质被三氯乙酸沉淀下来,而茚三酮反应发生在上清液。实验材料蛋白酶溶液试剂、试剂盒Tris-HClNaOH乙酸三氯乙酸酪蛋
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关于胰蛋白酶的测定法介绍
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蛋白酶的测定实验
实验方法原理 血红蛋白不是很贵,被用来做这个实验。由于处于天然结构的蛋白质通常可以抵制蛋白酶的攻击,因此首先用尿素使血红蛋白失活。分离非水解蛋白质后,利用 Folin-Ciocaheau 试剂的上清液测量消化产物。这种试剂优先识别色氨酸和酪氨酸,但是也可以识别半胱氨酸和组氨酸。'实验温度
蛋白酶的测定实验
Anson 测定法 酪蛋白测定法 偶氮酪蛋白测定法 茚三酮测定法 实验方法原理 血红蛋白不是很贵,被用来做这个实验。由于处于天然
酪蛋白激酶分析实验_用-β酪蛋白
实验材料β-酪蛋白(溶于水)有酪蛋白激酶活性的酶样品试剂、试剂盒[γ-32P] ATP 溶液酪蛋白激酶反应缓冲液TCASDS-PAGE 样品缓冲液仪器、耗材30℃ 水浴P81 磷酸纤维素膜离心管离心机实验步骤1. 每个鉴定反应按以下比例将各反应组分加入 1.5 ml 微量离心管中:4 μl 5 ×
酪蛋白的制备实验
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基本方案 实验方法原理 实验材料 胃蛋白酶
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实验方法原理 实验材料 胰蛋白酶试剂、试剂盒 磷酸钾N'-苯甲酰-L-精氨酰对硝基苯胺仪器、耗材 分光光度计实验步骤 实验所需「试剂」具体见「其他」25℃,在 405 nm 测定吸光值,ε405=9620 l/(mol·cm)。注意事项 其他 试剂:0.3 mol/L 磷酸钾,pH 8.02
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在本单元中,用一种较简单的方法测定它对核心 RNA 聚合酶自非特异性模板 poly(dAT) 起始转录的刺激作用。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。试剂、试剂盒核心 RNA 聚合酶纯σ32 标准品纯化的 σ32 样品核心 RNA 聚合酶-σ32 复合物样品[α-32P]UTP终止液
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酶蛋白浓度测定的方法:酶浓度严格来说是指酶分子的质量浓度,常以酶蛋白浓度来表示。人体体液中的酶有几百种,除LPS、LCAT、ChE、铜氧化酶(CER)外,大多数酶的含量在μg/L水平甚至更低。因此,酶活性浓度的测定是主要测定方法。20世纪70年代以后,随着新技术特别是免疫学技术的发展,酶的定量分
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酪蛋白琼脂
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蛋白酶的活力测定
蛋白酶的种类繁多,不同的蛋白酶的性质和催化反应条件各不相同,无法规定一个统一的测定方法,目前使用最多的有福林—酚法、紫外分光光度法、甲醛滴定法、DHT-酪蛋白法。1 福林酚法蛋白酶催化蛋白质水解成氨基酸,其中含酚基的氨基酸(色氨酸、酪氨酸)与福林试剂反应,生成蓝色复合物,蓝色深浅与含酚基氨基酸的多少