过氧化物酶的测定实验
实验方法原理 实验材料 酶样品试剂、试剂盒 磷酸钾ABTSH2O2 溶液仪器、耗材 分光光度计实验步骤 实验所需「试剂」具体见「其他」25℃ 时,在 414 nm 处,ε414=24.6×103 l/(mmol· mm)。必须注意,1 mol H2O2 形成 2 mol 氧化的 ABTS(Szutowicz 等,1984)。注意事项 其他 试剂:0.1 mol/L 磷酸钾 pH 6.00.02 mol/L 2,2'-连氮-双-(3-乙基苯二氢噻唑-6-磺酸),(ABTS,二铵盐,Mr=548.7;1.1 g 溶于 0.1 mol/L磷酸钾 pH 6.0)。 H2O2 溶液(约 10 mmol/L):0.06 ml 30% H2O2 稀释于 50 ml 0.1 mol/L 磷酸钾 pH 7.0,在 240 nm 处以缓冲液为对照的吸收值约为 0.50。......阅读全文
过氧化物酶的测定实验
供体:ABTS 供体:愈创木酚 供体:联二茴香胺 实验方法原理 实验材料
过氧化物酶的测定实验
实验方法原理 实验材料 酶样品试剂、试剂盒 磷酸钾ABTSH2O2 溶液仪器、耗材 分光光度计实验步骤 实验所需「试剂」具体见「其他」25℃ 时,在 414 nm 处,ε414=24.6×103 l/(mmol· mm)。必须注意,1 mol H2O2 形成 2 mol 氧化的 ABTS(Szuto
过氧化物酶的测定实验——供体:ABTS
供体:氢过氧化物 氧化还原酶供体 + H2O2 → 氧化型供体 + 2 H2O从山葵中提取的这种酶是一种相对分子质量为 44000 的糖蛋白。它与过氧化氢酶关系密切,也携带一个原铁血红素作为辅酶。它对受体(H2O2)具有专一性,但是与众多的底物供体反应,这些特点都可以用在酶的实验中,如 5-氨基 2
辣根过氧化物酶实验的HRP的活力测定
1、活力测定:测定k4值的方法操作如下: 取2个比色池(带盖,光程1厘米),按下表加入反应物 *酶液:将1毫克蛋白/毫升的酶液用磷酸盐缓冲液稀释10倍后应用。 加好反应物,摇匀,在470nm 读出OD值,为t=0 的读数。立即加0.01毫升40mM过氧化氢溶液于2个比色池中,即刻摇匀并记时
植物体内过氧化物酶活性的测定实验
实验方法原理在过氧化氢存在下,过氧化物酶能使愈创木酚氧化,生成茶竭色4-邻甲氧基苯酚,在470nm波长处测定生成物的吸光度(A)值,即可求出该酶活性。实验材料植物叶片试剂、试剂盒磷酸缓冲液愈创木酚仪器、耗材分光光度计离心机离心管研钵移液管移液管架试管试管架洗耳球实验步骤一、材料、仪器设备及试剂1.
过氧化物酶的测定实验——供体:联二茴香胺
实验材料酶样品试剂、试剂盒磷酸钾邻二氢氯化联茴香胺H2O2 溶液仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」0.97 ml 实验混合物0.02 ml 酶样品开始加入 0.01 ml 0.1 mmol/L H2O2 溶液记录 25 ℃ 时、436nm 处吸收值发生变化,ε436=28.3
过氧化物酶的测定实验——供体:愈创木酚
实验材料酶样品试剂、试剂盒磷酸钾邻甲氧基苯酚H2O2 溶液仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」0.97 ml 实验混合物0.02 ml 酶样品(用 0.1 mol/L 磷酸钾溶液 pH 7.0,稀释浓缩的原料溶液大约 2000 倍)开始加入 0.01 ml 0.1 mmol/L
植物体内过氧化物酶活性的测定实验
实验方法原理在过氧化氢存在下,过氧化物酶能使愈创木酚氧化,生成茶竭色4-邻甲氧基苯酚,在470nm波长处测定生成物的吸光度(A)值,即可求出该酶活性。实验材料植物叶片 试剂、试剂盒磷酸缓
植物体内过氧化物酶活性的测定实验
实验方法原理 在过氧化氢存在下,过氧化物酶能使愈创木酚氧化,生成茶竭色4-邻甲氧基苯酚,在470nm波长处测定生成物的吸光度(A)值,即可求出该酶活性。实验材料 植物叶片试剂、试剂盒 磷酸缓冲液愈创木酚仪器、耗材 分光光度计离心机离心管研钵移液管移液管架试管试管架洗耳球实验步骤 一、材料、仪器设备及
植物过氧化物酶测定
实验概要本文介绍了植物过氧化物酶同工酶测定的基本原理及操作步骤等。实验原理聚丙烯酰胺凝胶由丙烯酰胺和交联剂甲叉双丙烯酰胺在催化剂作用下聚合而成,具有三维网状结构,其网孔大小可由凝胶浓度和交联度加以调节。凝胶电泳兼有电荷效应和分子筛效应。被分离物质由于所载电荷数量、分子大小和形状的差异,因此在电泳时产
过氧化物酶染色实验
实验方法原理 细胞中的过氧化物E分解过氧化氢释放出O原子,氧化联苯胺,变为联苯胺兰,使细胞浆中呈现兰黑色颗粒试剂、试剂盒 联苯胺 碱性品红过氧化氢溶液 蒸馏水实验步骤 一、实验试剂:1. 联苯胺 0.3g 碱性品红 0.3g亚硝基铁氰化钠饱和水溶液lml(360毫克/毫升)95%二醇,
过氧化物酶染色实验
实验方法原理细胞中的过氧化物E分解过氧化氢释放出O原子,氧化联苯胺,变为联苯胺兰,使细胞浆中呈现兰黑色颗粒试剂、试剂盒联苯胺碱性品红过氧化氢溶液蒸馏水实验步骤一、实验试剂:1. 联苯胺 0.3g 碱性品红 0.3g亚硝基铁氰化钠饱和水溶液lml(360毫克/毫升)95%二醇,100ml
过氧化物酶染色实验原理
过氧化物酶是广泛存在于生物体中的一类酶,大部分含有血红素,是一种结合蛋白。它可以催化H2O2或相关有机过氧化合物与有机、无机化合物的氧化反应。血细胞所含过氧化物酶主要为髓过氧化物酶(MPO),MPO是一类糖蛋白,是人类中性粒细胞含量最多的蛋白质,约占细胞干重的3%~5%.用MPOPHMPZE探针
植物过氧化物酶的简易鉴定实验
实验方法原理过氧化物酶是卟啉环中含有铁的金属蛋白质。过氧化物酶与过氧化氢形成一种化合物,在这种化合物中的过氧化氢被活化,从而能氧化酚类化合物,其作用如同氢的受体一样。实验材料马铃薯块茎试剂、试剂盒邻苯二酚酒精溶液H2O2仪器、耗材试管实验步骤马铃薯块茎,切碎,加到两个试管中,其中一个先煮沸数分钟,然
植物过氧化物酶的简易鉴定实验
实验方法原理 过氧化物酶是卟啉环中含有铁的金属蛋白质。过氧化物酶与过氧化氢形成一种化合物,在这种化合物中的过氧化氢被活化,从而能氧化酚类化合物,其作用如同氢的受体一样。实验材料 马铃薯块茎试剂、试剂盒 邻苯二酚酒精溶液H2O2仪器、耗材 试管实验步骤 马铃薯块茎,切碎,加到两个试管中,其中一个先煮沸
辣根过氧化物酶的实验原理
过氧化物酶催化以下反应: 2 H2O2 →O2+2H2O 这一类酶以铁卟啉为辅基,所以属血红素蛋白质类(hemeProteins)。过氧化物酶在生物界分布极广,在细胞代谢的氧化还原过程中起重要的作用。 本实验是以辣根为原料,经过水的抽提,硫酸铵和丙酮分级分离,再经锌离子纯化,透析除盐,冷冻
过氧化物酶标记测定细胞凋亡
实验概要本实验用过氧化物酶标记测定了细胞凋亡。本方法可以用于福尔马林固定的石蜡包埋的组织切片、冰冻切片和培养的或从组织中分离的细胞凋亡测定。实验原理脱氧核糖核苷酸衍生物地高辛[(digoxigenin)-11-dUTP]在TdT酶的作用下,可以掺入到凋亡细胞双链或单链DNA的3-OH末端,与dATP
过氧化物酶标记测定细胞凋亡
本实验用过氧化物酶标记测定了细胞凋亡。本方法可以用于福尔马林固定的石蜡包埋的组织切片、冰冻切片和培养的或从组织中分离的细胞凋亡测定。实验原理脱氧核糖核苷酸衍生物地高辛[(digoxigenin)-11-dUTP]在TdT酶的作用下,可以掺入到凋亡细胞双链或单链DNA的3-OH末端,与dATP形成异多
过氧化物酶抗过氧化物酶复合物(PAP)的制备实验
实验概要本实验制备了过氧化物酶-抗过氧化物酶复合物(PAP)。主要试剂1. HRP和兔(或羊)抗HRP:抗HRP用HRP免疫兔(或羊)获得2. 0.075mol/L醋酸钠-0.15 mol/L醋酸铵等量混合液3. 0.1mol/LHCl4. 0.01mol/LHCl5. 饱和硫酸铵溶液6. 0.01
过氧化物酶活性测定的方法有哪些
实验48过氧化物酶活性的测定(比色法)过氧化物酶是植物体内普遍存在的、活性较高的一种酶,它与呼吸作用、光合作用及生长素的氧化等都有密切关系,在植物生长发育过程中,它的活性不断发生变化,因此测量这种酶,可以反映某一时期植物体内代谢的变化。一、原理在有过氧化氢存在下,过氧化物酶能使愈创木酚氧化,生成茶褐
过氧化物酶活性的测定就有哪些方法
实验 48 过氧化物酶活性的测定(比色法)过氧化物酶是植物体内普遍存在的、活性较高的一种酶,它与呼吸作用、光合作用及生长素的氧化等都有密切关系,在植物生长发育过程中,它的活性不断发生变化,因此测量这种酶,可以反映某一时期植物体内代谢的变化.一、原理在有过氧化氢存在下,过氧化物酶能使愈创木酚氧化,生成
过氧化物酶活性的测定就有哪些方法
冷热水测定实验48过氧化物酶活性的测定(比色法)过氧化物酶是植物体内普遍存在的、活性较高的一种酶,它与呼吸作用、光合作用及生长素的氧化等都有
过氧化物酶活性的测定(比色法)
原理 过氧化物酶广泛分布于植物的各个组织器官中。在有过氧化氢存在下,过氧化物酶能使愈创木酚氧化,生成茶褐色物质,可用分光光度计测量生成物的含量。 仪器药品 721型分光光度计 离心机 秒表 天平 研钵
植物过氧化物酶同工酶测定
凡能催化同一种化学反应,但其分子结构和带电性质不同的一组酶称同工酶(isoenzyme)。同工酶谱的差异是基因表达的差异造成的,所以在研究植物基因调控与生长发育及其与环境条件的关系以及许多生理生化和遗传问题时,常常要分析同工酶谱的差异。因此,同工酶研究在理论和实践中都有非常重要的意义。一、原理聚丙烯
髓过氧化物酶的的实验室检查
实验室检查:1.尿髓过氧化物酶缺试验由于患儿尿中排出髓过氧化物酶增多,可作定性试验。方法有:(1)三氯化铁试验:将5%三氯化铁滴入5ml尿中立即出现绿色反应则为阳性。新生儿尚未喂食,此试验呈阴性。枫糖尿病者尿也可呈阳性,故此试验特异性较差。(2)2,4-硝基苯肼试验:如果产生黄色混浊沉淀则为阳性。2
组织切片的免疫过氧化物酶标记实验
实验材料组织样品试剂、试剂盒PBS过氧化氢PAP二氨基联苯胺仪器、耗材离心机加湿盒培养箱实验步骤1. 将湿纸巾铺于载玻片盒底部做成加湿盒,由冰冻切片仪中取出载有切片的载玻片,放入玻片盒中(每边放6片),或故湿盒中(载玻片勿相互接触)。 2. 待载玻片达室湿且未干时,铺加PBS于切片上(勿溢出玻片
组织切片的免疫过氧化物酶标记实验
实验材料 组织样品试剂、试剂盒 PBS过氧化氢PAP二氨基联苯胺仪器、耗材 离心机加湿盒培养箱实验步骤 1. 将湿纸巾铺于载玻片盒底部做成加湿盒,由冰冻切片仪中取出载有切片的载玻片,放入玻片盒中(每边放6片),或故湿盒中(载玻片勿相互接触)。 2. 待载玻片达室湿且未干时,铺加PBS于切片上(勿
过氧化物酶体的分离和分析实验
从大鼠肝脏中分离过氧化物酶体从豚鼠小肠黏膜中分离微过氧化物酶体蛋白质及标志酶的分析实验材料肝脏 试剂、试剂盒乙醚
过氧化物酶体的分离和分析实验
从大鼠肝脏中分离过氧化物酶体 从豚鼠小肠黏膜中分离微过氧化物酶体 蛋白质及标志酶的分析 实验材料 肝脏
过氧化物酶体的分离和分析实验
实验材料 肝脏试剂、试剂盒 乙醚蔗糖TESNa4EDTAPMSF亮抑酶肽仪器、耗材 聚四氟乙烯研杵实验步骤 1. 用乙醚或其他麻醉剂使麻醉,采用断头法处死。2. 迅速取出肝脏,称重,置于冰上的重铝箔上使之迅速冰冷。3. 用剪刀将肝脏组织剪成碎片并转移到一只冰冷的 Potter-EIvjhem 匀浆器