从骨骼肌分离和培养单肌纤维

实验方法原理 研磨用胶原蛋白处理的整块骨骼肌,以分散为单肌纤维。在 Matrigel 上培养单肌纤维,然后收集迁出的细胞。实验材料 MatrigelDMEM L-谷氨酰胺Ⅰ型胶原蛋白试剂、试剂盒 青霉素和链霉素混合液鸡胚提取液马血清胎牛血清接种培养液增殖培养液仪器、耗材 Petri培养皿改良Pasteur吸管24孔培养板钻石笔透照立体解剖显微镜实验步骤 1. 处死动物后立即切除肌肉。注意夹持肌腱,以减少对肌纤维的损伤。2. 将肌肉放入 0.2 % Ⅰ型胶原蛋白酶液(W / V,用 DMEM 配制),在 35°C 条件下用摇动水浴箱孵育 60~90 min。较大肌肉需要较长消化时间,一般情况下取自 6~8 周大鼠的趾长伸肌需消化 60 min 。3. 准备盛肌纤维的 Petri 培养皿,即用马血清浸洗培养皿,以免肌纤维黏附于培养皿底壁上。然后,加入 20 ml DMEM。4. 消化后将肌肉移入盛有 DMEM 的 Petri 培养皿......阅读全文

从骨骼肌分离和培养单肌纤维

实验方法原理研磨用胶原蛋白处理的整块骨骼肌,以分散为单肌纤维。在 Matrigel 上培养单肌纤维,然后收集迁出的细胞。实验材料MatrigelDMEML-谷氨酰胺Ⅰ型胶原蛋白试剂、试剂盒青霉素和链霉素混合液鸡胚提取液马血清胎牛血清接种培养液增殖培养液仪器、耗材Petri培养皿改良Pasteur吸管

从骨骼肌分离和培养单肌纤维

实验方法原理 研磨用胶原蛋白处理的整块骨骼肌,以分散为单肌纤维。在 Matrigel 上培养单肌纤维,然后收集迁出的细胞。实验材料 MatrigelDMEM L-谷氨酰胺Ⅰ型胶原蛋白试剂、试剂盒 青霉素和链霉素混合液鸡胚提取液马血清胎牛血清接种培养液增殖培养液仪器、耗材 Petri培养皿改良Past

从骨骼肌分离和培养单肌纤维

实验方法原理研磨用胶原蛋白处理的整块骨骼肌,以分散为单肌纤维。在 Matrigel 上培养单肌纤维,然后收集迁出的细胞。实验材料Matrigel                                                                  DMEM        

从成年骨骼肌分离和培养成肌细胞实验——分离培养细胞

骨豁肌源性成肌细胞能够培养从几种成年动物骨骼肌分离的成肌细胞,可用于(1)肌细胞的结构研究(2)肌细胞功能研究(3)对肌细胞的相关课题研究(4)临床细胞移植。实验方法原理骨豁肌源性成肌细胞能够培养从几种成年动物骨骼肌分离的成肌细胞。在培养条件下,成肌细胞仍继续表达一些分化特征。成肌细胞称卫星细胞,分

从成年骨骼肌分离和培养成肌细胞

实验方法原理 在添加 20 %(fetal bovine serum,FBS)的 Ham’s F12 培养中,原代细胞容易生长。在不改变培养条件的情况下,这些细胞增殖和分化,融合形成多个细胞核的肌管。这证明培养的细胞具有成肌性。实验材料 D-PBSA试剂、试剂盒 转运培养液生长培养液链酶菌蛋白酶液仪

从成年骨骼肌分离和培养成肌细胞

在添加 20 %(fetal bovine serum,FBS)的 Ham’s F12 培养中,原代细胞容易生长。在不改变培养条件的情况下,这些细胞增殖和分化,融合形成多个细胞核的肌管。这证明培养的细胞具有成肌性。实验方法原理在添加 20 %(fetal bovine serum,FBS)的 Ham

从成年骨骼肌分离和培养成肌细胞实验

分离培养细胞             实验方法原理 骨豁肌源性成肌细胞能够培养从几种成年动物骨骼肌分离的成肌细胞。在培养条件下,成肌细胞仍继续表达一些分化特征。成肌细胞称卫星细胞,分

从成年骨骼肌分离和培养成肌细胞实验

实验方法原理 在添加 20%(fetal bovine serum, FBS) 的 Ham's F12 培养中,原代细胞容易生长。在不改变培养条件的情况下,这些细胞增殖和分化,融合形成多个细胞核的肌管。这证明培养的细胞具有成肌性。试剂、试剂盒 Ham F12FBSD-PBSA仪器、耗材 手术

从成年骨骼肌分离和培养成肌细胞实验

分离培养细胞             实验方法原理 骨豁肌源性成肌细胞能够培养从几种成年动物骨骼肌分离的成肌细胞。在培养条件下,成肌细胞仍继续表达一些分化特征。成肌细胞称卫星细胞,分

有氧运动减轻衰老骨骼肌纤维化并促进骨骼肌再生

近日,华南师范大学体育科学学院教授段锐课题组研究揭示了有氧运动减轻衰老骨骼肌纤维化并促进骨骼肌再生的调控机制。相关成果发表于《恶病质少肌症与肌肉杂志》(Journal of Cachexia Sarcopenia and Muscle)。衰老会对组织修复产生负面影响。在骨骼肌中,肌肉干细胞(MuSC

有氧运动减轻衰老骨骼肌纤维化并促进骨骼肌再生

近日,华南师范大学体育科学学院教授段锐课题组研究揭示了有氧运动减轻衰老骨骼肌纤维化并促进骨骼肌再生的调控机制。相关成果发表于《恶病质少肌症与肌肉杂志》(Journal of Cachexia Sarcopenia and Muscle)。衰老会对组织修复产生负面影响。在骨骼肌中,肌肉干细胞(MuSC

异搏定和钆对青蛙骨骼肌纤维中咖啡因诱导的痉挛和钙...

异搏定和钆对青蛙骨骼肌纤维中咖啡因诱导的痉挛和钙离子流的影响许多研究证明咖啡因可以诱导骨骼肌的收缩,但Axelsson等科学家在青蛙的骨骼肌中注入咖啡因后却未发现收缩现象。面对这种现象,澳大利亚Tasmania大学的Lana Shabala等科学家推测咖啡因引起的青蛙慢骨骼肌纤维收缩的活性位点在胞外

骨骼肌细胞培养和肌细胞培养

骨骼肌细胞培养 1.杀死动物,无菌取大腿肌组织,切成0.3~0.5厘米小块。 2.用不含钙镁离子的Hanks液配的0.25%胰蛋白酶消化,无菌纱网或纱布滤过,合成培养基加10%小牛血清培养,为促进分化可加1%的胎汁。 3.细胞接种量为2×106/皿,接种在胶原或明胶的底物上能促进细胞分化

如何从培养细胞中分离线粒体

看你的目的,是要分离线粒体蛋白(不需要线粒体有活性),还是要做线粒体功能?但是方法一般是把细胞磨碎(有特殊的匀浆器),然后密度梯度离心。如果需要纯度很高,那还要超速离心。需要提醒的就是,这样提取线粒体需要大量,大量的细胞。说明书上说,如Hela,要1-2ml。。。。就是说细胞离下来,得有1-2个ml

从原代组织细胞和原培养容器分离细胞的技术

一、从原代组织中分离细胞 将组织块分离(散)成细胞悬液的方法有多种,最常用的是机械解离细胞法、酶学解离细胞法以及螯合剂解离细胞法。 从原代组织中获得单细胞悬液的一般方法是酶解聚。细胞暴露在酶中的时间要尽可能的短,以保持最大的活性。下列步骤可以解聚整个组织,获得较高产量的有活性细胞。

线粒体分离实验—从组织培养细胞中分离线粒体

实验材料细胞试剂、试剂盒RSBMS 缓冲液仪器、耗材Dounce 匀浆器实验步骤1. 用 11 ml 冰上预冷过的 RSB 重新悬浮细胞,转移到一个 15 ml 的 Dounce 匀浆器中RSB(使组织培养细胞膨胀的低渗缓冲液)10 mmol/L NaCl2.5 mol/L MgCl210 mmol

骨骼肌细胞培养

  1.杀死动物,无菌取大腿肌组织,切成0.3~0.5厘米小块。  2.用不含钙镁离子的Hanks液配的0.25%胰蛋白酶消化,无菌纱网或纱布滤过,合成培养基加10%小牛血清培养,为促进分化可加1%的胎汁。  3.细胞接种量为2×106/皿,接种在胶原或明胶的底物上能促进细胞分化。明胶制备比较简单,

厌氧菌的分离和培养

1 目的1.1 了解厌氧微生物的生长特性1.2 观察厌氧微生物(双歧杆菌)的形态特征1.3 掌握厌氧微生物的滚管分离、培养与计数技术 2 原理目前培养厌氧微生物的简便而又有效的技术包括有:厌氧箱培养技术;厌氧罐培养技术;厌氧袋培养技术;亨盖特厌氧滚管技术.这里介绍的是亨盖特厌氧滚管技术.亨盖特厌氧滚

人PBMC分离和培养

1、将静脉血20ml用ACD抗凝剂以容积比血:抗凝剂=9:1抗凝处理2、按血:分离液=1:2注入国产淋巴细胞分离液上层,400g 20℃离心30分钟3、交接层重浮于4倍体积的RPMI1640并通过离心法200g,10min洗三次4、获得细胞可做分选或其他实验。体会:1、实验中我用过肝素方法抗凝,但效

关于从培养组织中分离单细胞的介绍

  从培养组织中分离单细胞指将愈伤组织反复继代培养,再转移至液体培养基振荡培养。这是获得单细胞使用最广泛的一种方法。将表面消毒后的植物器官新鲜切片放置在培养基(固体)上,培养基含适当比例的生长素和细胞分裂素,以保证组织培养的顺利进行。外植体切口处形成愈伤组织,逐渐生长扩展到外植体组织的整个表面。将愈

从培养组织中分离单细胞的方法介绍

从培养组织中分离单细胞指将愈伤组织反复继代培养,再转移至液体培养基振荡培养。这是获得单细胞使用最广泛的一种方法。将表面消毒后的植物器官新鲜切片放置在培养基(固体)上,培养基含适当比例的生长素和细胞分裂素,以保证组织培养的顺利进行。外植体切口处形成愈伤组织,逐渐生长扩展到外植体组织的整个表面。将愈伤组

脐带和脐血来源干细胞的培养实验_从脐静脉分离干细胞

实验材料脐带试剂、试剂盒胶原酶培养基仪器、耗材导管实验步骤(a)在正常分娩后6〜12h内收集和处理脐带。(b)在脐静脉内插入导管,用PBSA完全地洗2次。(c)夹住远端脐带。(d)用0.1%胶原酶溶液充满静脉。(e)夹住近端脐带。(f)将脐带在37℃孵育20min。(g)轻轻按摩脐带,收集含有内皮和

接种、分离纯化和培养技术

一、接种将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种.1、接种工具和方法在实验室或工厂实践中,用得最多的接种工具是接种环、接种针.由于接种要求或方法的不同,接种针的针尖部常做成不同的形状,有刀形、耙形等之分.有时滴管、吸管也可作为接种工具进行液体接种.在固体培养基表面要将菌液

接种、分离纯化和培养技术

一、接种  将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种。1、接种工具和方法  在实验室或工厂实践中,用得最多的接种工具是接种环、接种针。由于接种要求或方法的不同,接种针的针尖部常做成不同的形状,有刀形、耙形等之分。有时滴管、吸管也可作为接种工具进行液体接种。在固体培养基表面

接种、分离纯化和培养技术

一、接种    将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种.1、接种工具和方法    在实验室或工厂实践中,用得最多的接种工具是接种环、接种针.由于接种要求或方法的不同,接种针的针尖部常做成不同的形状,有刀形、耙形等之分.有时滴管、吸管也可作为接种工具进行液体接种.在固体培

中间丝的分离方法实验——从培养的细胞中分离Ⅰ~Ⅲ型中间丝

实验材料细胞试剂、试剂盒蛋白酶抑制剂裂解缓冲液解聚缓冲液组装缓冲液仪器、耗材匀浆器实验步骤1. 从培养皿或瓶中吸去培养基并用 5 ml 含蛋白酶抑制剂的冰冷的 PBS 洗细胞。2. 每 75cm2 瓶或培养皿用 1 ml 冰冷的裂解缓冲液 5 分钟裂解细胞。裂解缓冲液:在 PBS 中加入:1% Tr

新生大鼠心脏细胞的分离和培养实验_分离及培养程序

实验材料Sprague Dawley 幼鼠试剂、试剂盒胰酶液乙醇仪器、耗材搅拌台烧杯实验步骤组织消化和分离细胞1. 在细胞操作间内,放一个加热搅拌台,上放一个装有 100 ml 灭菌水的容量 600 ml 的烧杯,加热至 37℃。2. 准备胰酶液。用水浴或温箱使胰酶液温度保持在 37℃。3. 做一个

细菌的分离培养、纯培养和生化试验

一、目的 掌握细菌  培养、纯培养与基本微生物操作技能,了解生化试验原理、方法和意义。 二、实验内容(一)细菌的分离培养:倾注法和划线法(倾注法:此法很少应用)本次试验采用前一种方法)划线法: 融化普通琼脂  培养基,倒平板,杂检。取1号菌如图1之一方法划线,37℃培养24h。

细菌的分离培养、纯培养和生化试验

一、目的掌握细菌  培养、纯培养与基本微生物操作技能,了解生化试验原理、方法和意义。二、实验内容(一)细菌的分离培养:倾注法和划线法(倾注法:此法很少应用)本次试验采用前一种方法)划线法:融化普通琼脂  培养基,倒平板,杂检。取1号菌如图1之一方法划线,37℃培养24h。(二) 钓菌和纯培养:观察菌

人PBMC分离和培养步骤和体会

1、将静脉血20ml用ACD抗凝剂以容积比血:抗凝剂=9:1抗凝处理。 2、按血:分离液=1:2注入国产淋巴细胞分离液上层,400g 20℃离心30分钟。 3、交接层重浮于4倍体积的RPMI1640并通过离心法200g,10min洗三次。 4、获得细胞可做分选或其他实验。 体会: