中间丝的分离方法实验——从培养的细胞中分离Ⅰ~Ⅲ型中间丝
实验材料细胞试剂、试剂盒蛋白酶抑制剂裂解缓冲液解聚缓冲液组装缓冲液仪器、耗材匀浆器实验步骤1. 从培养皿或瓶中吸去培养基并用 5 ml 含蛋白酶抑制剂的冰冷的 PBS 洗细胞。2. 每 75cm2 瓶或培养皿用 1 ml 冰冷的裂解缓冲液 5 分钟裂解细胞。裂解缓冲液：在 PBS 中加入：1% Triton -X-1000.6 mol/L KCl10 mmol/L MgSO43. 每 ml 细胞裂解液加 0.5 mg DNA 酶Ⅰ，4℃ 冰浴 5 分钟或冰浴至细胞裂解物的黏滞度明显降低。4. 4℃ 下以 1500 g 离心裂解物 10 分钟。5. 用含有蛋白酶抑制剂并且含 5 mmol/L EDTA 的 PBS 洗沉淀物两次。6. 沉淀物在解聚缓冲液中混匀（蛋白终浓度应该大约为 1 mg/ml）并在 20℃ 搅拌 30 分钟。解聚缓冲液：10 mmol/L Tris-HCl，pH 8.08 mol/L 尿素0.2% β......阅读全文
中间丝的分离方法实验——从培养的细胞中分离Ⅰ~Ⅲ型中间丝
实验材料细胞试剂、试剂盒蛋白酶抑制剂裂解缓冲液解聚缓冲液组装缓冲液仪器、耗材匀浆器实验步骤1. 从培养皿或瓶中吸去培养基并用 5 ml 含蛋白酶抑制剂的冰冷的 PBS 洗细胞。2. 每 75cm2 瓶或培养皿用 1 ml 冰冷的裂解缓冲液 5 分钟裂解细胞。裂解缓冲液：在 PBS 中加入：1% Tr
中间丝的分离方法实验——从组织中分离中间丝
实验材料牛舌试剂、试剂盒解聚缓冲液组装缓冲液匀浆缓冲液抽提缓冲液柱缓冲液PEM 缓冲液仪器、耗材离心机实验步骤一、从牛舌上皮分离角蛋白中间丝1. 从当地屠宰场拿到新鲜牛舌。一条舌头通常可以产出几十毫克纯化了的角蛋白中间丝。2. 用刀片切刮，把舌中的肌肉和黏膜分开。舌黏膜片（大约 1cmx1 cm )
中间丝的分离方法实验
从培养的细胞中分离Ⅰ~Ⅲ型中间丝 从组织中分离中间丝 实验材料 细胞
中间丝的分离方法实验
实验材料 细胞试剂、试剂盒 蛋白酶抑制剂裂解缓冲液解聚缓冲液组装缓冲液仪器、耗材 匀浆器实验步骤 1. 从培养皿或瓶中吸去培养基并用 5 ml 含蛋白酶抑制剂的冰冷的 PBS 洗细胞。2. 每 75cm2 瓶或培养皿用 1 ml 冰冷的裂解缓冲液 5 分钟裂解细胞。裂解缓冲液：在 PBS 中加入：1
中间丝的分离方法实验
从培养的细胞中分离Ⅰ~Ⅲ型中间丝从组织中分离中间丝实验材料细胞 试剂、试剂盒蛋白酶抑制剂
细胞质的中间丝的相关介绍
(intermediate filament)又称中等纤维，直径约为8～11nm，介于细丝与粗丝之间，因而得名。中间丝可分为五种，各由不同蛋白质构成。在成体中绝大部分细胞仅含有一种中间丝，故具有组织特异性，且较稳定。五种中间丝的形态相仿，难于分辨。但用免疫组织化学方法则能将它们区分，从而可进一步
从组织中分离制备细胞核基质/中间纤维支架结构
实验材料新鲜组织试剂、试剂盒NaCl 缓冲液细胞骨架缓冲液仪器、耗材Teflon 研杵Doume 匀浆器实验步骤1. 在 4℃ 将新鲜组织切成 1 mm3 左右的小块。在 4℃，用 Teflon 研杵和 Doume 匀浆器在含 0.5% Tritron X-100 的细胞骨架缓冲液中对切碎的组织进行
从培养细胞中制备细胞核基质/中间纤维骨架结构
实验材料细胞试剂、试剂盒Tritron X-100抽提缓冲液仪器、耗材电子显微镜实验步骤1. 在 4℃ 用 PBS 洗细胞一次。2. 在 4℃ 用含 0.5% Tritron X-100 的细胞骨架缓冲液抽提细胞 3 到 5 分钟。直到消化步骤，每 107 个细胞最少要用 1 ml 缓冲液，以后减半
细胞膜的制备方法实验——分离顶层膜、基底膜或中间膜
从组织培养皿中的汇合或部分汇合细胞中分离顶层膜、基底膜或中间膜试剂、试剂盒包被缓冲液PAA裂解缓冲液Nyoodenz仪器、耗材阳离子硅胶微型离心机临床台式离心机超离心机吊桶式转头离心管实验步骤1. 制备下列溶液：(1) 包被缓冲液（CB）20 mmol/L MES135 mmol/L NaCI0.5
细胞中的微丝染色及微丝与细胞形态的实验观察
一、成纤维细胞微丝的染色及其对细胞松驰素B的反应(一)原理微丝普遍存在于多种细胞，对细胞的形状和运动有一定作用。细胞松驰素B可与微丝的亚单位肌动蛋白结合，从而破坏微丝，改变细胞的形状。(二)细胞松驰素B处理成纤维细胞与染色观察1、在平皿中有三张成纤维细胞贴壁生长的盖片，在超净工作台内将一张盖片移入另
细胞中的微丝染色及微丝与细胞形态的实验观察
实验概要掌握考马斯亮蓝R250 染细胞骨架微丝的方法，了解动物细胞骨架的基本形态结构。实验原理真核细胞胞质中纵横交错的纤维网称为细胞骨架(cytoskeleton)。根据纤维直径、组成成分和组装结构的不同，分为微管(microtubule, MT)、微丝(microfilament, MF) 和中
线粒体分离实验—从组织培养细胞中分离线粒体
实验材料细胞试剂、试剂盒RSBMS 缓冲液仪器、耗材Dounce 匀浆器实验步骤1. 用 11 ml 冰上预冷过的 RSB 重新悬浮细胞，转移到一个 15 ml 的 Dounce 匀浆器中RSB（使组织培养细胞膨胀的低渗缓冲液）10 mmol/L NaCl2.5 mol/L MgCl210 mmol
从培养细胞或组织中制备细胞核基质/中间纤维骨架结...
从培养细胞或组织中制备细胞核基质/中间纤维骨架结构实验实验材料 细胞试剂、试剂盒 Tritron X-100抽提缓冲液仪器、耗材 电子显微镜实验步骤 1. 在 4℃ 用 PBS 洗细胞一次。2. 在 4℃ 用含 0.5% Tritron X-100 的细胞骨架缓冲液抽提细胞 3 到 5 分钟。直到消
从培养细胞或组织中制备细胞核基质/中间纤维骨架结构
从培养细胞中制备细胞核基质/中间纤维骨架结构 从组织中分离制备细胞核基质/中间纤维支架结构 细胞核的预先分离 实验材料
从培养细胞或组织中制备细胞核基质/中间纤维骨架结构
从培养细胞中制备细胞核基质/中间纤维骨架结构从组织中分离制备细胞核基质/中间纤维支架结构细胞核的预先分离实验材料细胞 试剂、试剂盒Tritron X-100
沙门氏菌毒力因子SopB挟持宿主细胞中间丝促进细菌复制
无肌间刺鱼突变体种质的创制是近年来鱼类遗传育种学研究的热点。异育银鲫以其肉质细嫩鲜美深受消费者青睐，但其体内具有的80多根细小的肌间刺给食用者带来了不少麻烦。近两年来，中国科学院院士、中科院水生生物研究所研究员桂建芳团队经全基因组解析揭示银鲫为双三倍体，即包含有两套三倍体基因组，由此开拓完善了在
从成年骨骼肌分离和培养成肌细胞实验——分离培养细胞
骨豁肌源性成肌细胞能够培养从几种成年动物骨骼肌分离的成肌细胞，可用于（1）肌细胞的结构研究（2）肌细胞功能研究（3）对肌细胞的相关课题研究（4）临床细胞移植。实验方法原理骨豁肌源性成肌细胞能够培养从几种成年动物骨骼肌分离的成肌细胞。在培养条件下，成肌细胞仍继续表达一些分化特征。成肌细胞称卫星细胞，分
从培养组织中分离单细胞的方法介绍
从培养组织中分离单细胞指将愈伤组织反复继代培养，再转移至液体培养基振荡培养。这是获得单细胞使用最广泛的一种方法。将表面消毒后的植物器官新鲜切片放置在培养基(固体)上，培养基含适当比例的生长素和细胞分裂素，以保证组织培养的顺利进行。外植体切口处形成愈伤组织，逐渐生长扩展到外植体组织的整个表面。将愈伤组
如何从培养细胞中分离线粒体
看你的目的，是要分离线粒体蛋白（不需要线粒体有活性），还是要做线粒体功能？但是方法一般是把细胞磨碎（有特殊的匀浆器），然后密度梯度离心。如果需要纯度很高，那还要超速离心。需要提醒的就是，这样提取线粒体需要大量，大量的细胞。说明书上说，如Hela，要1-2ml。。。。就是说细胞离下来，得有1-2个ml
新生大鼠心脏细胞的分离和培养实验_分离及培养程序
实验材料Sprague Dawley 幼鼠试剂、试剂盒胰酶液乙醇仪器、耗材搅拌台烧杯实验步骤组织消化和分离细胞1. 在细胞操作间内，放一个加热搅拌台，上放一个装有 100 ml 灭菌水的容量 600 ml 的烧杯，加热至 37℃。2. 准备胰酶液。用水浴或温箱使胰酶液温度保持在 37℃。3. 做一个
成年大鼠心室肌肉细胞的分离和培养实验_分离ARVM细胞
实验材料鼠试剂、试剂盒KH 缓冲液混合气体仪器、耗材对流工作台或层流式超净台乙醚罩冷凝器循环水浴和水浴摇床圈型架蠕动泵台式医用离心机无菌烧杯ColorpHast pH 试纸实验步骤一、ARVM 细胞分离的准备工作1. 准备如下设备及器材：对流工作台或层流式超净台乙醚罩冷凝器循环水浴和水浴摇床带夹的圈
从细胞培养液中怎么分离蛋白质
把细胞离心下来后，用tca或(nh4)2so4沉淀下来就可以啦。再把沉淀溶解到适当的buffer里就可以做后面的实验。
从细胞培养液中怎么分离蛋白质
蛋白质分离纯化的一般程序可分为以下几个步骤：（一）材料的预处理及细胞破碎分离提纯某一种蛋白质时，首先要把蛋白质从组织或细胞中释放出来并保持原来的天然状态，不丧失活性。所以要采用适当的方法将组织和细胞破碎。常用的破碎组织细胞的方法有：1.机械破碎法这种方法是利用机械力的剪切作用，使细胞破碎。常用设备有
关于从培养组织中分离单细胞的介绍
从培养组织中分离单细胞指将愈伤组织反复继代培养，再转移至液体培养基振荡培养。这是获得单细胞使用最广泛的一种方法。将表面消毒后的植物器官新鲜切片放置在培养基(固体)上，培养基含适当比例的生长素和细胞分裂素，以保证组织培养的顺利进行。外植体切口处形成愈伤组织，逐渐生长扩展到外植体组织的整个表面。将愈
Nature－Materials吸附分离新概念：中间尺寸分子筛
近日，中山大学化学学院张杰鹏教授团队在Nature Materials发表论文，报道了配位聚合物多孔材料吸附分离研究的新进展，提出并验证了中间尺寸分子筛概念。论文第一作者为周东东博士（2016年毕业于中山大学化学学院，现为中山大学化学学院特聘副研究员），张杰鹏教授为通讯作者。论文合作者包括中山大
从豌豆组织分离叶绿体实验_叶绿体分离
实验材料叶子组织试剂、试剂盒PBF-Percoll 溶液山梨醇BSAHEPES-KOHEDTA仪器、耗材聚碳酸酯离心管实验步骤1. 制备 Percoll 梯度(1) 两个 50 ml 的聚碳酸酯离心管中分别加入 25 ml 50% 的 PBF-Percoll 溶液。50% PBF-Percoll0.
从单个核细胞中分离T细胞的方法
1）用玫瑰花结形成试验分离E＋细胞：1．制备AET-绵羊红细胞：1）在刻度离心管中，用无菌的含5％小牛血清的Hanks液洗涤绵羊红细胞3次，每次离心500×g 10分钟。2）吸净上清液，测量红细胞比容。轻击试管分散红细胞，加入4倍红细胞比容量、新鲜制备的AET溶液，混匀。室温中反应30分钟。3）用无
关于热带假丝酵母的培养方法介绍
在葡萄糖—酵母汁—蛋白胨液体培养基中培养，25℃，3天，细胞呈球形或卵球，其中大小为4~8×6~11µm。在麦芽汁琼脂上菌落为白色到奶油色，无光泽或稍有光泽。软而平滑或部分有皱纹。培养时间长时，菌落变硬。在加盖玻片的玉米粉琼脂培养基上培养，可看到大量的假菌丝和芽生孢子。 热带假丝酵母氧化烃类的
从植物器官分离单细胞的方法介绍
分离单细胞的最佳材料是叶组织，因为叶片中的细胞近似于一个同质细胞群体，较适合于特定和调控的大规模细胞培养。用机械法或酶解法可以从这种完整植物体器官(如叶细胞)分离出单细胞。1 机械法指通过机械磨碎、切割植物体从而获得游离的单细胞。用机械法可大规模地对薄壁组织细胞进行分离。2 酶解法指用专一的水解酶(
电泳分离技术－两边翘起中间凹下形态的形成原因
主要是由于凝胶的中间部分凝固不均匀所致,多出现于较厚的凝胶中。 处理办法:待其充分凝固再作后续实验。