特殊细胞培养实验
实验方法原理 二倍体细胞来源体内二倍体细胞,也即正常细胞的初代培养。初代培养细胞成功后能始终保持二倍体细胞性状,便成为二倍体细胞培养。二倍体细胞虽不难培养,但欲求长期呈旺盛地增殖生长、并保持二倍体细胞性状,亦非易事。为此必须采取一些有效的措施,一是低温冻存,二是妥善的培养方法。用反复传代的方法以求获得大量细胞和维持细胞长期生存的办法是不妥的。因在反复传代中,难免由于培养条件的变化和其它不利影响,使细胞生物学性状发生变化。随时间延长不仅能导致细胞停止生长,并可失掉二倍体性状或发生转化。实验材料 细胞试剂、试剂盒 培养液BSS胰蛋白酶消化液仪器、耗材 培养瓶实验步骤 二倍体细胞培养方法与一般培养相同,关键在于传代,其传代程序为1. 吸除旧培养液注入另瓶中;2. 用BSS冲洗1 次;3. 用0.25%胰蛋白酶消化,加入消化液量以仅覆盖住细胞层即可;作用1~5 分钟;4. 待细胞附着松动、......阅读全文
特殊细胞培养实验
一、二倍体细胞培养法 加支持物培养法 单细胞分离培养法 多孔塑料培养板单细胞克隆法 球体细胞培养实验 微载体细胞培养法 悬浮培养法
特殊细胞培养实验
实验方法原理 二倍体细胞来源体内二倍体细胞,也即正常细胞的初代培养。初代培养细胞成功后能始终保持二倍体细胞性状,便成为二倍体细胞培养。二倍体细胞虽不难培养,但欲求长期呈旺盛地增殖生长、并保持二倍体细胞性状,亦非易事。为此必须采取一些有效的措施,一是低温冻存,二是妥善的培养方法。用反复传代的方法以求获
特殊细胞培养实验_悬浮培养法
实验方法原理悬浮培养是使贴附性细胞呈悬浮状态生长。如所培养的细胞本身属悬浮生长类型,则无须做任何处理,在传代时先做离心处理去除旧培养液,添加新培养液即可。但在培养贴附型细胞时,因其有贴附性,必须进行干扰使细胞不能贴附,才能形成悬浮状态生长的细胞。实验材料细胞仪器、耗材培养瓶搅拌器实验步骤1. 用大
特殊细胞培养实验_单细胞分离培养法
实验方法原理从理论上说各种培养细胞都可用以进行克隆培养。但实际上,初代培养细胞和有限细胞系(二倍体细胞)比较困难。无限细胞系、转化细胞系和肿瘤细胞等则比较容易。其原因是,当体内任何细胞被置于体外培养后,对培养环境都有一个适应过程。期间细胞对营养液具有同化作用,即从培养液中摄取营养的同时,也向培养液排
特殊细胞培养实验_球体细胞培养实验
实验方法原理大多数培养细胞都具有贴附在底物上生长成单层细胞的性质,如细胞长成片之后,让细胞片与底物脱离,更换到使细胞不易贴附的底物上继续生长时,则细胞片能卷聚成球体形,成为球体培养。实验材料细胞试剂、试剂盒Hanks培养液胰蛋白酶仪器、耗材吸管实验步骤1. 琼脂铺底的培养瓶30 ml无菌培养瓶,每
细胞生物基本方法:特殊培养法
特殊培养法1)二倍体细胞培养法二倍体细胞培养法与一般培养相同,关键在于传代,其传代程序为:1. 吸除旧培养液注入另瓶中。2. 用温BSS冲洗1次。3. 用0.25%温胰蛋白酶消化,加入消化液量以仅覆盖细胞层即可;作用1~5分钟。4. 待细胞附着松动、细胞质边缘
特殊细胞培养实验_微载体细胞培养法
实验方法原理微载体细胞培养开始于60年代末期,最早使用离子交换凝胶作为载体,轻微搅动即可悬液在培养基中,因而可增加细胞附着的面积,达到大量培养细胞的目的。后来,根据细胞附着生长的特点,对微载体进行了改良,使其带有电荷或其它介质,更利于细胞附着和生长。这一方法亦可用于常规量的培养,也可用于大规模的培养
特殊细胞培养实验_加支持物培养法
实验方法原理加支持物培养法是预先向培养容器中加入各种可使细胞贴附的支持物,进行培养的方法。待细胞贴附于支持物生长增殖后,可进行各种实验和观察。观察时可把支持物从瓶中抽出,能做各种技术处理,是研究工作中常用的方法之一。各种对细胞无毒性的如玻璃、塑料、鸡卵壳膜、胶原、硅橡胶、袋泡茶包装纸等,均可做支持物
特殊血培养
1.分枝杆菌血培养要求:必须用特殊的商品化分枝杆菌血培养瓶。所有培养都必须孵育至少4周。培养温度为25~30℃。说明:虽然分枝杆菌并不需要特别复杂营养的微生物,但是为了更好地从血标本中分离出分枝杆菌,需要在肉汤培养基中补充脂肪酸(如油酸)、白蛋白和二氧化碳。一些分枝杆菌菌种(如日内瓦分枝杆菌、嗜血分
特殊细胞培养实验_多孔塑料培养板单细胞克隆法
实验方法原理多孔塑料培养板克隆细胞的主要过程是1. 制备出1~2 细胞/毫升低密度的细胞悬悬液;2. 向多孔塑料培养板各孔中分别接种细胞悬液0.5~1 ml,则每孔平均含1 个细胞。3. 镜下检测每孔所含细胞数,标记下含单细胞的孔,置温箱培养,数日后凡在已标记的孔中有生长增殖的细胞群即为克隆细
如何选用特殊细胞系培养基?
培养某一类型细胞没有固定的培养条件。在MEM中培养的细胞,很可能在DMEM或M199中同样很容易生长。总之,首选MEM做粘附细胞培养、RPMI-1640做悬浮细胞培养是一个好的开始。
特殊细胞试验对培养基的要求
放射性同位素32P常用于细胞信号的转导研究。由于磷酸化是常见的蛋白修饰和信号转导形式,因此,32P标记的磷酸盐可掺入到被磷酸化修饰的蛋白中而被检测到,从而反映出磷酸化蛋白的浓度。在这一过程中,具体位点的磷酸化以及上游的作用信号都是待验证的因素。在该研究中,模型细胞、带有突变位点的转染质粒、捕获蛋白和
特殊细胞培养实验_一、二倍体细胞培养法
实验方法原理二倍体细胞来源体内二倍体细胞,也即正常细胞的初代培养。初代培养细胞成功后能始终保持二倍体细胞性状,便成为二倍体细胞培养。二倍体细胞虽不难培养,但欲求长期呈旺盛地增殖生长、并保持二倍体细胞性状,亦非易事。为此必须采取一些有效的措施,一是低温冻存,二是妥善的培养方法。用反复传代的方法以求获得
特殊培养基
选择性培养基 选择性培养基是指根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基。其功能是使混合菌样中的劣势菌变成优势菌,从而提高该菌的筛选效率。 酵母菌富集培养基 葡萄糖5%,尿素0.1%,硫化铵0.1%,磷酸二氢钾0.25%,磷酸氢二钠0.05%,七水合硫酸镁0.1
细胞培养实验室的特殊设备简介
细胞培养实验室除了应配备上述的常用基本设备以外,如有条件,可添置一些特殊或先进的设备仪器,以便更有效、更精确、更深入地进行实验室工作。例如: (1)酶联免疫检测仪——可用于进行免疫学测定及细胞毒性、药物敏感性检测等。 (2) 超低温冰箱(-80℃)——便于储存某些试剂及标本。 (3)旋转培
特殊培养基的属性
RPMI-1640 Medium RPMI-1640广泛应用于哺乳动物、特殊造血细胞、正常或恶性增生的白细胞,杂交瘤细胞的培养,是目前应用十分广泛的培养基。主要用于悬浮细胞培养。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴细胞、T细胞淋巴瘤细胞以及HCT-15上皮细
特殊培养基的介绍
选择性培养基 选择性培养基是指根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基。其功能是使混合菌样中的劣势菌变成优势菌,从而提高该菌的筛选效率。 酵母菌富集培养基 葡萄糖5%,尿素0.1%,硫化铵0.1%,磷酸二氢钾0.25%,磷酸氢二钠0.05%,七水合硫酸镁0.1
培养基按其特殊用途分类
培养基按其特殊用途可分为加富培养基、选择性培养基和鉴别培养基。(1)加富培养基。是在培养基中加入血、血清、动植物组织提取液,用以培养要求比较苛刻的某些微生物。(2)选择性培养基。是根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求或对一些物理、化学抗性而设计的培养基。利用这种培养基可以将所需要的微生物从混杂的微
特殊型式的卵裂细胞谱系介绍
以蛔虫为例,德国生物学家T·H·博韦里研究了马副蛔虫卵的分裂过程。受精卵第1次分为上下两个裂球。其中居于动物极者称AB,植物极者称P1。在第2次分裂时两个卵裂面的方位不同,AB按胚胎的头尾轴分为A和B,P1仍分裂为上下两个裂球,上面的裂球名 EMST,下面的裂球名 P2。 AB分裂过程中,由染色体
星型胶质细胞的特殊类型
除上述典型的星形胶质细胞外,还有几种特殊类型的星形胶质细胞。如小脑的伯格曼胶质细胞(Bergmanglial cell);视网膜的米勒细胞(Muller glial cell),又称放射状胶质细胞(radial neuroglia cell);脑垂体的垂体细胞和正中隆起等处的伸展细胞(tanyc
特殊的细胞亚群促进周围细胞发育和生长
一项刊登在国际杂志Cell上的研究报告中,来自麦克马斯特大学等机构的科学家们通过研究在人类干细胞中发现了一类特殊的细胞亚群,其似乎能发送信号促进周围细胞发育和生长。这种人类多能性创始人细胞(human pluripotent founder cells)及其鉴别细胞过程的发现或有望帮助科学家们更
细胞培养实验——悬浮细胞培养
实验材料冻存 HeLa S3 细胞试剂、试剂盒70% 乙醇完全 MEM-10胰酶/EDTA仪器、耗材旋转瓶完全培养基-525 cm2 组织培养瓶C02 培养箱Sorvall H-6000A 转子100 ml 或 200 ml 通气旋转瓶和带滤膜的瓶盖实验步骤1. 将含有冻存 HeLa S3 细胞的安
培养细胞形态和培养细胞形态分析
培养细胞形态 体外培养细胞根据它们在培养器皿是否能贴附于支持物上生长特征,可分为贴附型生长和悬浮型生长两大类。贴附型细胞在培养时能贴附在支技物表面生长。如羊水细胞为贴附型细胞,常表现为成纤维型细胞和上皮细胞生长。悬浮型细胞在培养中悬浮生长。 1、成纤维型细胞 在培养中的细胞
单细胞培养培养方法介绍细胞悬浮培养法
用液体培养基对保持良好的分散状态的单个细胞或小的细胞聚集体于摇床上进行培养的方法,称为细胞悬浮培养法(cell suspension culture)。依据培养目的不同,可分为浅层培养和深层培养。浅层培养是指使培养材料的一部分裸露于液体培养基表面,采用静止培养的方式,适用于各种器官和组织的培养。深层
特殊荧光试剂让癌干细胞“现身”
日本研究人员研究发现,一种荧光试剂能够与癌干细胞结合,不仅可以让癌干细胞发光可见,还具有遏制癌干细胞的作用。这一发现将有助于促进开发治疗癌症的新方法。 癌干细胞是指具有干细胞性质的癌细胞,有“自我复制”以及“多细胞分化”等能力。这类细胞被认为有形成肿瘤乃至发展成癌症的潜力。现在的癌症治疗主要是
神经细胞具有特殊“预组装”技术
加拿大蒙特利尔神经学研究所及其附属医院和麦吉尔大学的一项新研究发现,神经细胞具有一种特殊的“预组装技术”,可促进神经细胞连接(突触)处的蛋白制造,从而让大脑迅速形成记忆和塑化。 大脑是可塑的,其通过重组路径并在神经细胞间创建新的连接,来适应日常生活中的各种体验。这种可塑性要求有关新信息及体
细胞特殊类型坏死的概念和表现
干酪样坏死:干酪样坏死主要见于由结核杆菌引起的坏死,是凝固性坏死的一种特殊类型。由于组织分解较彻底,加上含有较多的脂质,因而坏死组织略带黄色,质软,状似干酪,故称干酪样坏死。光镜下不见组织轮廓只见一些红染的无结构颗粒物质。脂肪坏死:属液化性坏死,分为酶解性和创伤性两种。前者常见于急性胰腺炎。纤维素样
细胞培养实验——贴壁细胞培养
实验材料冻存细胞试剂、试剂盒70% 乙醇PBS胰酶/EDTA仪器、耗材25 cm2 和 150 cm2 组织培养瓶CO2 培养箱实验步骤1. 将含有冻存细胞的安瓿放入 37℃ 水浴中解冻。2. 用 70% 乙醇对安瓿的顶端进行消毒,打开安瓿,用吸管将细胞转移到含有 5 ml 起始培养基的 25 cm
动物细胞培养——细胞培养介绍
实验方法原理目的细胞培养的评判性检查。应用检查常规维持的一致性;在复苏、传代、冻存前培养状况的评估;对新的或实验性情形反应的评估;确认明显的污染物。训练目标熟悉不同类型和不同密度的细胞培养的外观;数码或胶片相机的使用;灭菌物品和污染物间的区别,健康的和不健康的培养物间的区别;培养物生长阶段的评估。监
细胞培养技术的细胞培养方式
高等生物是由多细胞构成的整体,在整体条件下要研究单个细胞或某一群细胞在体内(in vivo)的功能活动是十分困难的。但是如果把活细胞拿到体外(in vitro)培养进行观察和研究,则要方便得多。活细胞离体后要在一定的生理条件下才能存活和进行生理活动,特别是高等动植物细胞要求的生存条件极其严格,稍有不