特殊细胞培养实验_悬浮培养法
实验方法原理悬浮培养是使贴附性细胞呈悬浮状态生长。如所培养的细胞本身属悬浮生长类型,则无须做任何处理,在传代时先做离心处理去除旧培养液,添加新培养液即可。但在培养贴附型细胞时,因其有贴附性,必须进行干扰使细胞不能贴附,才能形成悬浮状态生长的细胞。实验材料细胞仪器、耗材培养瓶搅拌器实验步骤1. 用大培养瓶增加含有铁芯的无毒的聚苯乙烯棒,在培养中进行电磁搅拌,使细胞不能贴壁而成悬浮培养,为此必须拥有能容纳电磁搅拌器的大型温箱。2. 用试管培养细胞,把试管置入带有悬转鼓的特制温箱中进行培养,悬转鼓不停徐缓转动,干扰细胞贴壁遂成悬浮培养。悬浮培养允许培养较多量细胞,适于做细胞代谢和生化方面的研究。 ......阅读全文
特殊细胞培养实验_悬浮培养法
实验方法原理悬浮培养是使贴附性细胞呈悬浮状态生长。如所培养的细胞本身属悬浮生长类型,则无须做任何处理,在传代时先做离心处理去除旧培养液,添加新培养液即可。但在培养贴附型细胞时,因其有贴附性,必须进行干扰使细胞不能贴附,才能形成悬浮状态生长的细胞。实验材料细胞仪器、耗材培养瓶搅拌器实验步骤1. 用大
细胞培养实验——悬浮细胞培养
实验材料冻存 HeLa S3 细胞试剂、试剂盒70% 乙醇完全 MEM-10胰酶/EDTA仪器、耗材旋转瓶完全培养基-525 cm2 组织培养瓶C02 培养箱Sorvall H-6000A 转子100 ml 或 200 ml 通气旋转瓶和带滤膜的瓶盖实验步骤1. 将含有冻存 HeLa S3 细胞的安
特殊细胞培养实验_微载体细胞培养法
实验方法原理微载体细胞培养开始于60年代末期,最早使用离子交换凝胶作为载体,轻微搅动即可悬液在培养基中,因而可增加细胞附着的面积,达到大量培养细胞的目的。后来,根据细胞附着生长的特点,对微载体进行了改良,使其带有电荷或其它介质,更利于细胞附着和生长。这一方法亦可用于常规量的培养,也可用于大规模的培养
特殊细胞培养实验_单细胞分离培养法
实验方法原理从理论上说各种培养细胞都可用以进行克隆培养。但实际上,初代培养细胞和有限细胞系(二倍体细胞)比较困难。无限细胞系、转化细胞系和肿瘤细胞等则比较容易。其原因是,当体内任何细胞被置于体外培养后,对培养环境都有一个适应过程。期间细胞对营养液具有同化作用,即从培养液中摄取营养的同时,也向培养液排
特殊细胞培养实验
一、二倍体细胞培养法 加支持物培养法 单细胞分离培养法 多孔塑料培养板单细胞克隆法 球体细胞培养实验 微载体细胞培养法 悬浮培养法
特殊细胞培养实验
实验方法原理 二倍体细胞来源体内二倍体细胞,也即正常细胞的初代培养。初代培养细胞成功后能始终保持二倍体细胞性状,便成为二倍体细胞培养。二倍体细胞虽不难培养,但欲求长期呈旺盛地增殖生长、并保持二倍体细胞性状,亦非易事。为此必须采取一些有效的措施,一是低温冻存,二是妥善的培养方法。用反复传代的方法以求获
特殊细胞培养实验_加支持物培养法
实验方法原理加支持物培养法是预先向培养容器中加入各种可使细胞贴附的支持物,进行培养的方法。待细胞贴附于支持物生长增殖后,可进行各种实验和观察。观察时可把支持物从瓶中抽出,能做各种技术处理,是研究工作中常用的方法之一。各种对细胞无毒性的如玻璃、塑料、鸡卵壳膜、胶原、硅橡胶、袋泡茶包装纸等,均可做支持物
特殊细胞培养实验_球体细胞培养实验
实验方法原理大多数培养细胞都具有贴附在底物上生长成单层细胞的性质,如细胞长成片之后,让细胞片与底物脱离,更换到使细胞不易贴附的底物上继续生长时,则细胞片能卷聚成球体形,成为球体培养。实验材料细胞试剂、试剂盒Hanks培养液胰蛋白酶仪器、耗材吸管实验步骤1. 琼脂铺底的培养瓶30 ml无菌培养瓶,每
特殊细胞培养实验_一、二倍体细胞培养法
实验方法原理二倍体细胞来源体内二倍体细胞,也即正常细胞的初代培养。初代培养细胞成功后能始终保持二倍体细胞性状,便成为二倍体细胞培养。二倍体细胞虽不难培养,但欲求长期呈旺盛地增殖生长、并保持二倍体细胞性状,亦非易事。为此必须采取一些有效的措施,一是低温冻存,二是妥善的培养方法。用反复传代的方法以求获得
单细胞培养培养方法介绍细胞悬浮培养法
用液体培养基对保持良好的分散状态的单个细胞或小的细胞聚集体于摇床上进行培养的方法,称为细胞悬浮培养法(cell suspension culture)。依据培养目的不同,可分为浅层培养和深层培养。浅层培养是指使培养材料的一部分裸露于液体培养基表面,采用静止培养的方式,适用于各种器官和组织的培养。深层
特殊细胞培养实验_多孔塑料培养板单细胞克隆法
实验方法原理多孔塑料培养板克隆细胞的主要过程是1. 制备出1~2 细胞/毫升低密度的细胞悬悬液;2. 向多孔塑料培养板各孔中分别接种细胞悬液0.5~1 ml,则每孔平均含1 个细胞。3. 镜下检测每孔所含细胞数,标记下含单细胞的孔,置温箱培养,数日后凡在已标记的孔中有生长增殖的细胞群即为克隆细
悬浮细胞培养经验
6 细胞培养基的选择 6.1根据细胞特点、蛋白表达及病毒特点和培养方式选择细胞培养基 商售工业用细胞培养基主要是干粉培养基,常用的培养基主要包括199、MEM、RPMI-1640、DMEM、DMEM/F12等系列,根据细胞的特性及工业化的生产需求,开发或生产的同一系列的细胞培养基在成份上也有
悬浮细胞培养系统概述
悬浮细胞培养系统是一种用于水产学领域的分析仪器,于2018年11月30日启用。 1技术指标 1、主体材质采用高硼硅酸盐玻璃材质。2、顶盖开口包含16个开口以上。3、可实现数据的传输,导出,打印,数据储存,曲线比较,跟踪。4、溶氧控制采用自适应PID控制模式。 2、主要功能 主要用于水产动
悬浮培养法介绍
悬浮培养是使帖壁细胞呈悬浮状态生长。如所需培养的细胞本身属悬浮生长型,则无须做任何处理;在传代时先做离心处理去除旧培养液,添加新培养液即可。但在培养帖附型细胞时,必须进行干扰细胞不能帖附,方法有二:(1)用大培养瓶增加含有铁芯的无毒的聚苯乙烯棒,在培养中进行电磁搅拌,使细胞不能帖壁而成悬浮培养。(2
悬浮细胞培养方法求心得
悬浮细胞一般几天离心一次,觉得好难养啊!求心得?丁香园网友goingba认为:你养的是什么细胞,原代吗?我觉得悬浮细胞最好养了,不用消化,关于几天离一次心,要看你的细胞生长状态了,我养过血液肿瘤细胞,增值比较快,我一般是第二天半量换液(加等量培养基后一分二),第三天若长得比较满,就离心换液。若你不想
细胞培养悬浮培养工艺分类及选择
细胞悬浮培养工艺按照培养方式分为批培养、流加培养及灌注培养。批培养能直观反映细胞在生物反应器中的生长、代谢变化,操作简单,但初期代谢废产物较多,抑制细胞生长,细胞生长密度不高;流加培养操作简单、产率高、容易放大,应用广泛,但需要进行流加培养基的设计;灌注培养的培养体积小,回收体积大,产品在罐内停留时
细胞培养实验室的特殊设备简介
细胞培养实验室除了应配备上述的常用基本设备以外,如有条件,可添置一些特殊或先进的设备仪器,以便更有效、更精确、更深入地进行实验室工作。例如: (1)酶联免疫检测仪——可用于进行免疫学测定及细胞毒性、药物敏感性检测等。 (2) 超低温冰箱(-80℃)——便于储存某些试剂及标本。 (3)旋转培
初代细胞培养实验——消化培养法
初代培养或原代培养,可以用于:(1)从供体获取组织后的首次培养;(2)组织和细胞刚刚离体,生物性状尚未发生很大的变化,具有二倍体遗传性状,在供体来源充分、生物条件稳定的情况下(年龄、性别),在一定程度上能反映体内状态。实验方法原理合成培养基胰蛋白酶消化培养法,能把组织块分散成细胞团或单个细胞,便于细
病毒的培养方法实验——传代细胞培养法
实验方法原理从人及动物某些组织,特别是肿瘤组织,经多次传代可建立传代细胞系,这种细胞能无限地传代,某些传代细胞对病毒敏感范围较广,可用作病毒的分离鉴定,如HeLa 细胞,Hep-2 细胞及KB 细胞。三种细胞均来自人肿瘤组织细胞,HeLa 细胞来自子宫颈癌,Hep-2 细胞来自喉癌而KB 细胞来自上
初代细胞培养实验——组织块培养法
实验材料组织试剂、试剂盒Hanks培养液胰蛋白酶NaHCO3仪器、耗材吸管培养瓶烧杯眼科剪眼科镊实验步骤1. 剪切把组织小块(1cm3)置入小烧杯或青霉素小瓶中,用Hanks液漂液二三次以去掉表面血污,吸净Hanks液,用眼科剪反复剪切成1mm3块为止;2. 摆布用弯头吸管吸取若干小块,置入培养
粘附细胞培养与悬浮培养之间有何区别?
细胞培养实验有两种基本的细胞生长系统:在人工基质上的单层培养(即粘附培养)或在培养基中自由漂浮(悬浮培养)。来源于脊椎动物的大部分细胞,除造血细胞系及少数其它细胞系外,均依赖固着性的生长,因此需要专门培养于适当的基质上,且该基质必须经过特殊处理,才能成功地粘附和扩增(即组织-培养处理)。不过,许多细
家兔椎间盘细胞培养实验——贴块法
家兔椎间盘细胞培养可以:(1)获得家兔椎间盘细胞;(2)用于椎间盘相关课题研究;(3)用于家兔模型研究。实验方法原理首先建立家兔椎间盘细胞的体外培养系统,其中,第一组给予纯氧,另外3组给予不同浓度的臭氧:30 ug/ml,60 ug/ml和80 ug/ml,然后于15 min及30 min后,采用台
神经胶质细胞培养实验_酶消化法
神经胶质细胞培养可以:(1)获得神经胶质细胞;(2)用于神经胶质细胞电生理特性,如膜电位、去极化等;(3)用于免疫应答研究。实验方法原理胶质细胞具有复杂多样的结构和表达丰富的分泌产物,它含有大部分神经递质、神经肽、激素及神经营养因子受体、离子通道、神经活性氨基酸亲和载体、细胞识别分子,并能分泌多种神
神经胶质细胞培养实验_酶消化法
神经胶质细胞培养可以:(1)获得神经胶质细胞;(2)用于神经胶质细胞电生理特性,如膜电位、去极化等;(3)用于免疫应答研究。实验方法原理胶质细胞具有复杂多样的结构和表达丰富的分泌产物,它含有大部分神经递质、神经肽、激素及神经营养因子受体、离子通道、神经活性氨基酸亲和载体、细胞识别分子,并能分泌多种神
悬浮细胞在细胞培养瓶中的接种
实验方法原理淋巴样细胞通常呈悬浮状生长。常用的培养液为含 10%~15%FBS 的 RPMI1640 各种细胞系间最佳接种密度和平台期细胞密度各不相同。当培养一种新的细胞系时其最佳原则为按 1:2 和 1:4 的比例传代细胞,在 3~4 天时间内进行细胞计数以计算每毫升细胞数。细胞在传代后 24~3
悬浮细胞在细胞培养瓶中的接种
实验方法原理 淋巴样细胞通常呈悬浮状生长。常用的培养液为含 10%~15%FBS 的 RPMI1640 各种细胞系间最佳接种密度和平台期细胞密度各不相同。当培养一种新的细胞系时其最佳原则为按 1:2 和 1:4 的比例传代细胞,在 3~4
细胞培养实验——贴壁细胞培养
实验材料冻存细胞试剂、试剂盒70% 乙醇PBS胰酶/EDTA仪器、耗材25 cm2 和 150 cm2 组织培养瓶CO2 培养箱实验步骤1. 将含有冻存细胞的安瓿放入 37℃ 水浴中解冻。2. 用 70% 乙醇对安瓿的顶端进行消毒,打开安瓿,用吸管将细胞转移到含有 5 ml 起始培养基的 25 cm
细胞悬浮培养法的相关介绍
用液体培养基对保持良好的分散状态的单个细胞或小的细胞聚集体于摇床上进行培养的方法,称为细胞悬浮培养法(cell suspension culture)。依据培养目的不同,可分为浅层培养和深层培养。浅层培养是指使培养材料的一部分裸露于液体培养基表面,采用静止培养的方式,适用于各种器官和组织的培养。
细胞培养实验
贴壁细胞培养 悬浮细胞培养 实验方法原理 实验材料 冻存细胞
细胞培养实验
贴壁细胞培养 悬浮细胞培养 实验方法原理 实验材料 冻存细胞