报告基因：β半乳糖苷酶的原位染色实验
试剂、试剂盒 D-PBSA 染色液质粒实验步骤 一、材料非消毒物品 1. D-PBSA2. 底物：X-gal（nvitrogen），以二甲基甲酰胺配成 20 mg/mL，用多聚丙烯管-20℃ 避光保存，最长可达 6 个月 3. 固定液：1.8% 的甲醛和 0.05% 戊二醛，均以 PBSA 液配制；将 85 mL 水、10 mL 的 10×D-PBSA、5 mL 福尔马林（37% 甲醛溶液）及 0.2 mL 戊二醛（25% 溶液）混合，制备成固定液，于 4℃ 储存 4. 染色液：含 5 mmol/L 铁氰钾，5 mmol/L 亚铁氰钾，2 mmol/LMgCl2，以 D-PBSA 配制，4℃ 储存 5. 底物/染色液：1 mg/mLX-gal，以染色液配制，现用现配 6. 含 10% 甲醛的 D-PBSA 液 7. 将β-gal 的表达质粒作为报告基因转染（如：pcMV......阅读全文
培养细胞的染色实验——Giemsa染色法
实验方法原理Giemsa 染色是最常用的方法之一，它简便、快速，适用于多种细胞和染色体染色。试剂、试剂盒Giemse甘油甲醇Sorensen仪器、耗材滴管玻璃片实验步骤1. 染液制备（1）称Giemse粉0.5 g、甘油22 ml，在研钵内先用少量甘油与Giemsa充分混合，研磨至无颗粒；（2）再
培养细胞的染色实验——Feulgen染色法
实验方法原理此染色法为Feulgen早在1924年提出的一种鉴别细胞中DNA的组织化学方法。细胞中的DNA在60 ℃用1 N HCl酸解离脱氧核糖核酸，使嘌呤碱基与糖苷犍破坏，嘌呤碱脱掉，脱氧核糖的中的醛基游离；醛基能与Schiff试剂相结合，形成一种紫色的复合物。本方法中酸的离解根重要，若温度过低
什么是涡旋混合器
漩涡混合器 漩涡混合器是一种将振荡和涡旋巧妙结合的实验室仪器，能够适用于多种混匀和漩涡振荡操作，使实验更加方便，快捷。 发展过程： 1.国内一般的振荡器和涡旋器是分开的，一台机器往往只能处理一项操作，大大限制了实验的过程，目前国外出现的混匀小精灵可以解决这种矛盾，它将振荡和涡旋巧妙的结合到
报告基因分类及优缺点
报告基因（reporter gene）是一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因，其表达产物非常容易被鉴定。把它的编码序列和基因调节序列相融合，在调控序列控制下进行表达，从而利用它的表达产物来标定目的基因的表达调控。作为报告基因必须具备的条件：（1）全序列已测定（2）表达产物在手提细胞中不存在，即无背景，
鞭毛染色配制及染色方法实验
实验步骤 改良Ryui法一、实验试剂：A液：5％石炭酸： 10ml鞣酸： 2g饱和硫酸铝钾液：10mlB液：结晶紫酒精饱和液应用液：A液10份，B液1份，混合，室温存放。二、染色方法：1. 玻片的处理：要求用新的载玻片，用前须在95％酒精中浸泡24小时以上，用时从酒精中
革兰氏染色配制及染色方法实验
实验方法原理本染色法是最基本的染色法，可使用于标本涂片或菌落涂片。染色结果将细菌分为革兰氏阳性和革兰氏阴性两类。实验步骤一、实验试剂：1. 结晶紫溶液：A液：结晶紫：2g，95%乙醇：20ml。B液：草酸铵：0.8g，蒸馏水：80ml。需在用前24小时将A液. B液混合，过滤后装入试剂瓶内备用。2.
革兰氏染色配制及染色方法实验
实验方法原理本染色法是最基本的染色法，可使用于标本涂片或菌落涂片。染色结果将细菌分为革兰氏阳性和革兰氏阴性两类。实验步骤一、实验试剂：1. 结晶紫溶液：A液：结晶紫：2g，95%乙醇：20ml。B液：草酸铵：0.8g，蒸馏水：80ml。需在用前24小时将A液. B液混合，过滤后装入试剂瓶内备用。2.
抗酸染色配置以及染色方法实验
实验方法原理抗酸染色直接用于痰标本时，可以适当曾加标本涂片的厚度，以提高检出率。染厚涂片时，须掌握复染色时间，如果背景过深，影响镜检。实验步骤碱性复红染色法：（萋纳Ziehl-Neelsen法）一、实验试剂：1. 萋纳石炭酸复红溶液：碱性复红乙醇饱和溶液：10ml5％石炭酸溶液： 90m
抗酸染色配置以及染色方法实验
实验方法原理抗酸染色直接用于痰标本时，可以适当曾加标本涂片的厚度，以提高检出率。染厚涂片时，须掌握复染色时间，如果背景过深，影响镜检。实验步骤碱性复红染色法：（萋纳Ziehl-Neelsen法）一、实验试剂：1. 萋纳石炭酸复红溶液：碱性复红乙醇饱和溶液：10ml5％石炭酸溶液： 90m
脂质染色实验_苏丹－III－染色
实验材料冰冻切片试剂、试剂盒苏丹 III乙醇蒸馏水自来水甘油明胶盐酸乙醇Harris 苏木精仪器、耗材弯钩玻璃棒载玻片实验步骤苏丹 III 染色液：苏丹 III 2.5 g，70％ 乙醇 500 ml，充分溶解后，室温下形成饱和溶液，可存放较长时间。1. 冰冻组织切片厚 10～20 μm 左右，采用
鞭毛染色配制及染色方法实验
实验步骤改良Ryui法一、实验试剂：A液：5％石炭酸： 10ml鞣酸： 2g饱和硫酸铝钾液：10mlB液：结晶紫酒精饱和液应用液：A液10份，B液1份，混合，室温存放。二、染色方法：1. 玻片的处理：要求用新的载玻片，用前须在95％酒精中浸泡24小时以上，用时从酒精中取
革兰氏染色的实验流程
1、 取载玻片用纱布擦干，载玻片的一面用marker笔画一个小圈（用来大致确定菌液滴的位置）。涂菌的部位在火焰上烤一下，除去油脂。 2、 涂片： 液体培养基：左手持菌液试管，在酒精灯火焰附近5cm左右打开管盖；右手持接种环在火焰中烧灼灭菌，等冷却后从试管中沾取菌液一环，在洁净无脂的载玻片上涂
培养细胞的染色实验
Giemsa染色法 苏木精伊红染色法 Feulgen染色法 吖啶橙染色荧光观察法 实验方法原理 Giemsa 染色是最常用的方法
细菌的革兰氏染色实验
实验方法原理G＋菌细胞壁肽聚糖含量多，结构致密，脂质少，乙醇不易渗入脱色；G－菌细胞壁肽聚糖含量少，结构疏松，脂质多，乙醇容易溶解脂质而渗入脱色。G＋菌菌体含有大量核糖核酸镁盐，能与结晶紫、碘牢固结合，使乙醇不易将其脱色；G－菌菌体核糖核酸镁盐含量少，容易被乙醇脱色。G＋菌等电点比G－菌低，在同样P
线粒体的活体染色实验
实验方法原理活体染色是应用无毒或毒性较小的染色剂真实地显示活细胞内某些结构而又很少影响细胞生命活动的一种染色方法。詹纳斯绿 B是线垃体的专一性活体染色剂。线粒体中细胞色素氧化酶使染料保持氧化状态呈蓝绿色，而在周围的细胞质中染料被还原，成为无色状态。实验材料兔子试剂、试剂盒显微镜手术器材解剖盘平皿载玻
细菌的革兰氏染色实验
实验方法原理 G＋菌细胞壁肽聚糖含量多，结构致密，脂质少，乙醇不易渗入脱色；G－菌细胞壁肽聚糖含量少，结构疏松，脂质多，乙醇容易溶解脂质而渗入脱色。G＋菌菌体含有大量核糖核酸镁盐，能与结晶紫、碘牢固结合，使乙醇不易将其脱色；G－菌菌体核糖核酸镁盐含量少，容易被乙醇脱色。G＋菌等电点比G－菌低，在同样
活体染色的实验步骤
1、活细胞的检测一：台酚蓝排除法取一滴细胞悬液，与一滴2%台酚蓝溶液混合，放盖玻片，静置3分钟，显微镜下观察染色情况。活细胞不着色，死细胞呈蓝色。计算活细胞的百分比。2、活细胞的检测二：中性红法1）在小离心管中，用Hanks液对1%中性红水溶液作10倍稀释，1500rpm离心7分钟，取上清液置另一干
染色体荧光原位杂交和染色体核型分析一样吗
从定义来看： 荧光原位杂交方法是一种物理图谱绘制方法，使用荧光素标记探针，以检测探针和分裂中期的染色体或分裂间期的染色质的杂交。 染色体核型分析是将待测细胞的染色体依照该生物固有的染色体形态结构特征，按照一定的规定，人为的对其进行配对、编号和分组，并进行形态分析的过程。 从运用场景来看：
双荧光素酶报告基因检测实验技术服务
1、 实验简介Luciferase报告基因系统是以 荧光素(luciferin) 为底物来检测 萤火虫荧光素酶 (fireflyluciferase)活性的实验。荧光素底物会在荧光素酶作用下会发光（波长540-600nm），且光强能反应荧光素酶的表达量。荧光素酶的蛋白表达量与启动子活性、mRNA的
双荧光素酶报告基因检测实验技术服务
1、 实验简介Luciferase报告基因系统是以 荧光素(luciferin) 为底物来检测 萤火虫荧光素酶 (fireflyluciferase)活性的实验。荧光素底物会在荧光素酶作用下会发光（波长540-600nm），且光强能反应荧光素酶的表达量。荧光素酶的蛋白表达量与启动子活性、mRNA的
半乳糖苷酶活性的整体封片染色和免疫组化检测
实验材料小鼠或鸡的整个胚胎、组织或外植体试剂、试剂盒磷酸盐缓冲液（PBS)冰冷β-半乳糖苷酶固定剂β-半乳糖苷酶洗涤缓冲液β-半乳糖苷酶染色液仪器、耗材5 mL或10 mL的聚苯乙烯或聚丙烯帽盖的试管或1.5〜2 mL的离心管转动平台染色用密闭箱附有盖玻片的下陷载玻片或箱式载玻片纤光照明的解剖显微镜
Luciferase－报告基因技术
Luciferase 报告基因技术自然界中广泛分布着生物发光有机体，其中包括细菌、真菌、鱼、昆虫等。在这些生物发光有机体中催化生物发光反应的各种酶都称之为荧光素酶（Luciferases），底物则命名为荧光素（Luciferin）。自1986— 1987 年首次被当作报告基因使用以来，荧光素酶基因已
Luciferase－报告基因技术
Luciferase 报告基因技术自然界中广泛分布着生物发光有机体，其中包括细菌、真菌、鱼、昆虫等。在这些生物发光有机体中催化生物发光反应的各种酶都称之为荧光素酶（Luciferases），底物则命名为荧光素（Luciferin）。自1986— 1987 年首次被当作报告基因使用以来，荧光素酶基因已
报告基因检测概述
报告基因检测是功能基因组学研究的一个重要手段，在真核基因表达调控研究和相关药物或蛋白筛选工作中，有广泛的应用。报告基因检测系统，是把顺式调控元件（即DNA非编码序列）与某一种非常容易被鉴定的蛋白（即报告基因产物）的编码序列连接起来，通过测定该报告基因在细胞内的表达产物的量或活性，来判断顺式调控元件的
免疫学实验HCG半定量
HCG半定量介绍： HCG 红血球淀集抑制半定量试验(以下简称 HCG 半定量)灵敏度高，故对早孕、先兆流产、外孕能及早做出诊断，并能对滋养细胞疾病进行诊断,疗效判定及随访。本法较放免要求设备简单、迅速、经济,基层医院都可开展放免、酶标法虽较本法更灵敏,但对滋养细胞疾病的诊断尚无肯定的标准。HCG
β半乳糖苷酶活性的整体封片免疫组化检测实验
半乳糖苷酶活性的整体封片染色和免疫组化检测 准备大组织的厚切片进行β-半乳糖苷酶染色 实验方法原理 实验材料
原位杂交实验原理与方法
一、目的本实验的目的是学会原位杂交的使用方法。了解各种原位杂交的基本原理和优缺点。二、原理原位杂交组化（简称原位杂交，in situ hybridization histochemistry；ISHH）属于分子杂交的一种，是一种应用标记探针与组织细胞中的待测核酸杂交，再应用标记物相关的检测系统，在核
原位杂交实验要求及步骤
原位杂交组织（或细胞）化学 （In situ Hybridization Histochemistry，ISHH） 简称原位杂交（In Situ Hybridization），属于固相分子杂交的范畴，它是用标记的DNA或RNA为探针，在原位检测组织细胞内特定核酸序列的方法。根据所用探针和靶核酸的不同
原位杂交实验原理与方法
一、目的本实验的目的是学会原位杂交的使用方法。了解各种原位杂交的基本原理和优缺点。二、原理原位杂交组化（简称原位杂交，in situ hybridization histochemistry；ISHH）属于分子杂交的一种，是一种应用标记探针与组织细胞中的待测核酸杂交，再应用标记物相关的检测系统，
原位杂交实验要求及步骤
原位杂交可以用于（1）固相分子杂交；（2）标记的DNA或RNA为探针，在原位检测组织细胞内特定核酸序列。实验方法原理根据探针的标记物是否直接被检测，原位杂交又可分为直接法和间接法两类。直接法主要用放射性同位素、荧光及某些酶标记的探针与靶核酸进行杂交，杂交后分别通过放射自显影、荧光显微镜术或成色酶促反