透化细胞和退化细胞器中测定比活性实验
1.从标记细胞提取ATP1) 备下列材料：本实验用到的所有溶液必须用Mlli - Q纯化的水或它的等价物配制。冰冷的4%高氣酺（v/v)三-n-辛胺1,1,2-三氮三m乙烷32p标记的细胞带螺帽的聚丙烯离心管测量范围PH4~8的PH试纸小心：高氣酸■ 三-n -辛胺； U 1，2-三氯三氟乙烧；放射性物质（见附录5)2) 从标记细胞中吸出培养基，用PBS清洗两次。彻底吸去清洗液，将细胞放入冰盒。迅速加入〇.5ml冰冷的4%高氯酸，轻轻混匀以裂解细胞，冰浴5分钟s将细胞到入酸液，定量转移至一个带螺帽的离心管。于4尤全速离心5 分钟以沉淀细胞碎片。3) 将上清转移至新的离心管，放入冰浴。按 1.2比1的比例新鲜配制三- n -辛胺与1,】，2_三氯三氟乙烷的混合物，混匀。加0.6ml混合物到高氯酸样品，盖紧螺帽，用旋涡混合器振荡1分钟以上。此时一定要充分混匀，以确保完全中和。4 ) 完全混匀后，室温离......阅读全文
淀粉酶的诱导、提取和活性测定实验
实验方法原理大麦（或小麦）种子萌发时，种胚产生GA3扩散到胚乳的糊粉层细胞（被称为GA3反应的“靶细胞”），刺激其合成或激活α-淀粉酶，然后进入胚乳，使贮藏的淀粉被水解为还原酶，因此，无胚种子不能释放GA3，也不能形成与激活α-淀粉酶。外加的GA3也可代替胚的释放作用，从而诱导α-淀粉酶的合成。在一
非同位素分析报道基因活性实验
萤火虫荧光素酶法 冻融裂解的细胞的荧光素酶分析 β-半乳糖苷酶报道基因的化学发光分析 实验材料 转染细胞
胰岛素受体的溶解及活性测定实验
胰岛素受体的溶解及活性测定实验 试剂、试剂盒 纯化的鼠肝质膜 牛血清白蛋白 [125I]
非同位素分析报道基因活性实验
实验材料 转染细胞试剂、试剂盒 PBS荧光素贮液Triton甘氨酰甘氨酸仪器、耗材 橡胶细胞刮子绘图仪比色杯实验步骤 1. 用冰冷的PBS洗涤在3个60 mm 培养皿中的转染了荧光素酶表达质粒的细胞各3次， 毎次用4 ml PBS洗后吸去洗液。 2. 每个培养皿中加入350 μl Trito
由歧化作用测定的－PDHC－总活性实验
基本方案 实验方法原理 实验材料 酶样品
胰岛素受体的溶解及活性测定实验
试剂、试剂盒 纯化的鼠肝质膜牛血清白蛋白 [125I] 胰岛素猪胰岛素牛γ-球蛋白聚乙二醇 6000溶液 B 溶液 C 结合缓冲液仪器、耗材 Ti 70 转头和带盖的聚丙烯离心管实验步骤 材料与设备纯化的鼠肝质膜（得自实验 1)Ti 70 转头和带盖的聚丙烯离心管牛血清白蛋白（BSA,1%)[125
淀粉酶的诱导、提取和活性测定实验
实验方法原理大麦（或小麦）种子萌发时，种胚产生GA3扩散到胚乳的糊粉层细胞（被称为GA3反应的“靶细胞”），刺激其合成或激活α-淀粉酶，然后进入胚乳，使贮藏的淀粉被水解为还原酶，因此，无胚种子不能释放GA3，也不能形成与激活α-淀粉酶。外加的GA3也可代替胚的释放作用，从而诱导α-淀粉酶的合成。在一
细胞凋亡检测实验——Caspase3活性检测法
实验方法原理Caspase家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用，其中caspase-3为关键的执行分子，它在凋亡信号传导的许多途径中发挥功能。Caspase-3正常以酶原（32KD）的形式存在于胞浆中，在凋亡的早期阶段，它被激活，活化的Caspase-3由两个大亚基（17KD）和两个小亚基（
胰岛素受体的溶解及活性测定实验
试剂、试剂盒纯化的鼠肝质膜牛血清白蛋白[125I] 胰岛素猪胰岛素牛γ-球蛋白聚乙二醇 6000溶液 B溶液 C结合缓冲液仪器、耗材Ti 70 转头和带盖的聚丙烯离心管实验步骤材料与设备纯化的鼠肝质膜（得自实验 1)Ti 70 转头和带盖的聚丙烯离心管牛血清白蛋白（BSA,1%)[125I] 胰岛素
红墨水染色法测定种子活性实验
实验方法原理生活细胞的原生质膜具有选择性吸收物质的能力，而死的细胞原生质膜丧失这种能力，于是红墨水染料可进入死细胞而使其染色。活细胞不能吸收红墨水所以不染色。这一原理仅适用于胚细胞，而胚乳细胞全部被红墨水染成红色，那么是否就判断胚乳细胞就是死细胞？所以染色机理不但与质膜透性有关，而且还与细胞（胚细胞
由歧化作用测定的－PDHC－总活性实验
实验方法原理 实验材料 酶样品试剂、试剂盒 磷酸钾MgCl2丙酮酸二磷酸硫胺二硫赤藓糖醇辅酶 ANAD+磷酸转乙酰酶乳酸脱氢酶羟胺FeCl3 试剂仪器、耗材 分光光度计实验步骤 实验所需「试剂」具体见「其他」0.98 ml 实验混合物0.02 ml 酶样品30 ℃ 培养 15 min 后将样品放于冰
由歧化作用测定的－PDHC－总活性实验
实验材料酶样品试剂、试剂盒磷酸钾MgCl2丙酮酸二磷酸硫胺二硫赤藓糖醇辅酶 ANAD+磷酸转乙酰酶乳酸脱氢酶羟胺FeCl3 试剂仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」0.98 ml 实验混合物0.02 ml 酶样品30 ℃ 培养 15 min 后将样品放于冰中，然后加入 0.2
报道基因活性的同位素分析实验
CAT活性的层析分析法 原位裂解细胞的CAT分析法 CAT活性的相-抽提分析法 人生长激素的放射免疫分析法 实验材料
红墨水染色法测定种子活性实验
实验方法原理 生活细胞的原生质膜具有选择性吸收物质的能力，而死的细胞原生质膜丧失这种能力，于是红墨水染料可进入死细胞而使其染色。活细胞不能吸收红墨水所以不染色。这一原理仅适用于胚细胞，而胚乳细胞全部被红墨水染成红色，那么是否就判断胚乳细胞就是死细胞？所以染色机理不但与质膜透性有关，而且还与细胞（胚细
淀粉酶的诱导、提取和活性测定实验
实验方法原理 大麦（或小麦）种子萌发时，种胚产生GA3扩散到胚乳的糊粉层细胞（被称为GA3反应的“靶细胞”），刺激其合成或激活α-淀粉酶，然后进入胚乳，使贮藏的淀粉被水解为还原酶，因此，无胚种子不能释放GA3，也不能形成与激活α-淀粉酶。外加的GA3也可代替胚的释放作用，从而诱导α-淀粉酶的合成。在
报道基因活性的同位素分析实验
实验材料 DNA试剂、试剂盒 PBS乙酸乙酯氯仿甲醇Tris·Cl仪器、耗材 薄层层析缸滤纸离心管离心机实验步骤 1. 100 mm 培养皿中的转染了CAT表达质粒的贴壁细胞，用PBS洗两次，每次5 ml每培养皿加入1 ml TEN溶液。将细胞置于冰浴5 min。 2. 用橡胶细胞刮子将细胞从培
红墨水染色法测定种子活性实验
实验方法原理：生活细胞的原生质膜具有选择性吸收物质的能力，而死的细胞原生质膜丧失这种能力，于是红墨水染料可进入死细胞而使其染色。活细胞不能吸收红墨水所以不染色。这一原理仅适用于胚细胞，而胚乳细胞全部被红墨水染成红色，那么是否就判断胚乳细胞就是死细胞？所以染色机理不但与质膜透性有关，而且还与细胞（胚细
NK细胞活性测定：LDH法原理和实验步骤
一、原理 活细胞的胞浆内含有LDH。正常情况下，LDH不能透过细胞膜，当细胞受到NK细胞的杀伤后，LDH释放到细胞外。LDH 可使乳酸锂脱氢，进而使NAD还原成NADH，后者再经递氢体吩嗪二甲酯硫酸盐（PMS）还原碘硝基氯化四氮唑（INT），INT 接受H＋被还原成紫红色甲月赞类化合物。在酶
免疫学实验NK细胞活性测定（NK）介绍
NK细胞活性测定（NK）介绍： 自然杀伤(NK)细胞是一群异质性多功能的免疫细胞，是与特异性免疫应答无关的自然毒杀伤细胞。它对体内多种细胞，特别是T、B淋巴细胞有调节作用。它所介导的裂解细胞作用不受主要组织相溶性复合体的限制。自然杀伤细胞不仅对癌细胞，对病毒、胞内寄生菌和老化变异细胞也具有极强
报道基因活性的同位素分析实验——CAT活性的层析分析法
报告基因 是一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因，也就是说，是一个其表达产物非常容易被鉴定的基因。把它的编码序列和基因表达调节序列相融合形成嵌合基因，或与其它目的基因相融合，在调控序列控制下进行表达，从而利用它的表达产物来标定目的基因的表达调控，筛选得到转化体。实验材料DNA试剂、试剂盒PBS乙酸乙酯
报道基因活性的同位素分析实验——CAT活性的相抽提分析法
实验材料转染细胞试剂、试剂盒氯霉素Tris·ClTMPD二甲苯仪器、耗材离心机离心管培养箱实验步骤一、来源于哺乳动物细胞1. 按“CAT活性的层析分析法”中的步骤1~5的冻融法，制备哺乳动物细胞提取物。如果用胰蛋白酶消化或制细胞方法来收集细胞，则将原位裂解法的步骤1至4用以下的步骤2至4代替。 2
抑制剂对酶活性的影响实验报告实验结果及分析
影响酶作用的因素：影响酶促反应的因素常有酶的浓度，底物浓度，pH值，温度，抑制剂，激活剂等.其变化规律有以下特点： 1、酶浓度对酶促反应的影响：在底物足够，其它条件固定的条件下，反应系统中不含有抑制酶活性的物质及其它不利于酶发挥作用的因素时，酶促反应的速度与酶浓度成正比。2、底物浓度对酶促反应的影响
研究生在实验室，情商比智商更重要
很多研究生导师似乎都有相近的体会，对于进入实验室的相对成熟的研究生来说，智商的差别似乎并不大，情商的差别倒是比较明显，而且对研究生的学习和研究过程影响更大，因此，研究生的情商比智商更重要。 据英国《简明不列颠百科全书·智力商数》词条所载：将一般人的平均智商定为100，人们的智商是以平均数字10
研究生在实验室，情商比智商更重要
文 ｜ 梁宋平（湖南师范大学原副校长、教授）很多研究生导师似乎都有相近的体会，对于进入实验室的相对成熟的研究生来说，智商的差别似乎并不大，情商的差别倒是比较明显，而且对研究生的学习和研究过程影响更大，因此，研究生的情商比智商更重要。据英国《简明不列颠百科全书·智力商数》词条所载：将一般人的平均智商定
变压器变比测试仪的实验目的
1.检查变比是否与铭牌值相符，以保证达到要求的电压变换。 2.检查电压分接开关指示位置是否正确。 3.检查各线圈的匝数比，可判断变压器是否存在匝间短路。 4.测出三相变压器本身变压比的不平衡度。 5.提供变压比的准确程度，以判断变压器能否并列运行。
IL6生物学活性检测实验
实验材料 IL-6的诱生试剂、试剂盒 FCS-RPMI-1640培养液谷氨酰胺HEPES青霉素链霉素PBSA缓冲液仪器、耗材 离心机培养箱摇床实验步骤 1. IL-6的诱生：诱生过程与IL-2基本相同。用于诱导产生IL-6的细胞可用PBMC。诱生剂用PHA。2. IL-6的生物学活性测定：采用M
由－NAD＋还原反应测定－OGDHC－总活性的实验
实验材料OGDHC试剂、试剂盒磷酸钾NAD＋焦磷酸硫胺素MgCl2α-酮戊二酸二硫赤藓糖醇辅酶 A仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」0.98 ml 实验混合物0.02 ml 酶样品37 ℃ 时，于 340 nm 处吸收值发生变化，ε340＝6.3×103 l/（mol·cm）
IL6生物学活性检测实验
实验材料IL-6的诱生试剂、试剂盒FCS-RPMI-1640培养液谷氨酰胺HEPES青霉素链霉素PBSA缓冲液仪器、耗材离心机培养箱摇床实验步骤 1. IL-6的诱生：诱生过程与IL-2基本相同。用于诱导产生IL-6的细胞可用PBMC。诱生剂用PHA。2. IL-6的生物学活性测定：采用MH60
IL10生物学活性检测实验
实验材料小鼠IL-4试剂、试剂盒FCS-IMDM培养液rh IL-10标准品3H-TdR仪器、耗材离心机培养箱实验步骤D36细胞悬液制备①↓接种细胞于96孔培养板②↓加待测样品和标准品③↓加3H-TdR④↓收集细胞，测定3H-TdR掺入量⑤↓绘制标准曲线，计算待测样品的IL-10的活性单位⑥展开 注
水体中活性磷酸盐的测定方法－实验步骤
正磷酸盐常被称为活性磷，因为只有这种磷酸盐会和比色法测定磷酸盐的试验中所用的试剂直接发生反应。正磷酸盐测定 钼酸铵分光光度法在酸性条件下，正磷酸盐与钼酸铵反应生成黄色的磷钼杂多酸，再用抗坏血酸还原成橉钼蓝，于710nm最大吸收波长处分光光度法。具体方法网上可下载。