细胞因子生物学活性检测
实验方法原理 白细胞介素1是一种重要的细胞因子,主要由单核-巨噬细胞产生,IL-1不仅对多种免疫活性细胞有重要的调节功能,而且与发热、炎症发生以及某些疾病的病理变化有关。目前对IL-1产生水平的检测主要应用生物学活性检测的方法。一、ConA刺激小鼠胸腺细胞检测IL-1生物学活性 小鼠胸腺细胞在丝裂原刺激下表达IL-1受体,在有IL-1同时存在的条件下,IL-1可协同丝裂原促T细胞的增殖作用。根据加入IL-1后增殖水平(3H-TdR掺入率)的增加可计算出样品中IL-1的活性单位,或计算出刺激指数。二、应用EL-4 CTLL检测IL-1生物学活性 小鼠胸腺瘤细胞系EL4的某些亚克隆细胞表面具有高密度IL-1受体,在IL-1诱导下产生高水平的IL-2,通过用IL-2依赖株CTLL-2检测IL-2的生物学活性,从而反映检测样品中IL-1的水平。实验材料 ConAEL4细胞CTLL-2细胞试剂、试剂盒 FCS RPMI......阅读全文
IL6生物学活性检测实验
实验材料IL-6的诱生试剂、试剂盒FCS-RPMI-1640培养液谷氨酰胺HEPES青霉素链霉素PBSA缓冲液仪器、耗材离心机培养箱摇床实验步骤 1. IL-6的诱生:诱生过程与IL-2基本相同。用于诱导产生IL-6的细胞可用PBMC。诱生剂用PHA。2. IL-6的生物学活性测定:采用MH60
IL4生物学活性检测实验
实验材料IL-4诱生试剂、试剂盒生理盐水淋巴细胞分层液FCS-IMDM培养液PHA仪器、耗材细胞培养板培养箱实验步骤一、IL-4生物学活性测定 CT.4S细胞悬液制备①↓接种细胞于96孔培养板②↓加待测样品和标准品③↓加3H-TdR④↓收集细胞,测定3H-TdR掺入量⑤↓绘制标准曲线,计算待测样品的
TNFα生物学活性检测方法——光密度法
TNF的生物学活性之一是能直接杀伤肿瘤细胞。TNF与相应受体结合后向细胞内移,被靶细胞溶酶体摄取导致溶酶体稳定性降低,各种酶外泄,引起细胞溶解。肿瘤细胞株对TNF-α的敏感性有很大的差异,用放线菌素D、丝裂酶素C、放线菌酮等处理肿瘤细胞,可明显增强TNF-α杀伤肿瘤细胞活性。实验材料小鼠L929细胞
简述细胞因子的生物学作用
细胞因子还有其他的生物学作用,比如促进细胞凋亡和促进创伤组织修复。肿瘤坏死因子超家族中的一些细胞因子可以直接杀伤或者诱导靶细胞的凋亡,比如TNF-a和LT-α可以杀伤被病毒感染的靶细胞或肿瘤细胞。转化生长因子一B(TGF-B)可以刺激成纤维细胞和成骨细胞而促进损伤组织的修复,表皮生长因子可促进上
简述细胞因子的生物学作用
细胞因子还有其他的生物学作用,比如促进细胞凋亡和促进创伤组织修复。肿瘤坏死因子超家族中的一些细胞因子可以直接杀伤或者诱导靶细胞的凋亡,比如TNF-a和LT-α可以杀伤被病毒感染的靶细胞或肿瘤细胞。转化生长因子一B(TGF-B)可以刺激成纤维细胞和成骨细胞而促进损伤组织的修复,表皮生长因子可促进上
抗体的生物学活性
抗体的生物学功能:可以中和毒素和阻止病原体入侵。识别并特异性结合抗原,执行该功能的结构是抗体的V区,其中CDR部位在识别和结合特异性抗原的过程中起决定性作用;激活补体产生攻膜复合物使细胞溶解破坏。人的抗体IgG1~3和IgM与相应抗原结合后,可因构象改变而使其CH2和CH3结构域内的补体结合点暴露,
补体的生物学活性
补体系统是人和某些动物种属,在长期的种系进化过程中获得的非特异性免疫因素之一,它也在特异性免疫中发挥效应,它的作用是多方面的。补体系统的生物学活性,大多是由补体系统激活时产生的各种活性物质(主要是裂解产物)发挥的。补体成分及其裂解产物的生物活性列于表3-6。补体成分或裂解产物生物活性作用机制C5
生物学活性测定方法
用于细胞因子生物学活性测定,对细胞因子前体或其降解产物与可溶性受体结合的细胞因子、细胞因子聚合物等,均不能用此法检测。细胞因子受体拮抗物、细胞因子的天然抗体和类细胞因子等,也将干扰细胞因子活性的测定。细胞因子生物学活性测定法主要具有以下特点:①操作繁琐;②易受干扰;③敏感性较高;④特异性不高。
炎性细胞因子的生物学效应
炎性细胞因子是一类主要由免疫系统细胞生成的具有许多强大生物学效应的内源性多肽,可介导多种免疫反应。炎性细胞在体内高度表达可引起多种类似心衰症状的所谓心衰表型,包括进行性左室功能低下、肺水肿、左室重构、胚胎基因表达等,形成了关于心衰的细胞因子假说,即心衰进展部分是由心脏本身及外周循环中炎性细胞因子
细胞因子分子生物学方法
这是一类利用细胞因子的基因探针检测特定细胞因子基因表达的技术。目前所有公认的细胞因子的基因均已克隆化,故能较容易地得到某一细胞因子的cDNA探针或根据已知的核苷酸序列人工合成寡聚核苷酸探针。利用基因探针检测细胞因子mRNA表达的方法多种多样,常使用斑点杂交、Northernblot、逆转录PCR
细胞因子的检测
白介素2受体(IL-2R,CD25)实验步骤展开γ干扰素(IFN-γ)实验步骤展开α肿瘤坏死因子(TNF-α)实验步骤展开
细胞因子的检测
随着免疫学理论研究的深入,发现的细胞因子日益增多,并在免疫应答的调节和效应中起着重要作用,其在体内水平的高低直接反映机体的免疫状况。细胞因子检测的方法主要分三类:①细胞生物学活性检测法。②免疫学标记技术,常用ELISA。③分子生物学方法,常用逆转录PCR检测细胞因子的mRNA转录的情况。现以生物活性
细胞因子的检测
白介素2受体(IL-2R,CD25) γ干扰素(IFN-γ) α肿瘤坏死因子(TNF-α) 实验步骤
简述抗体的生物学活性
抗体的生物学功能:可以中和毒素和阻止病原体入侵。识别并特异性结合抗原,执行该功能的结构是抗体的V区,其中CDR部位在识别和结合特异性抗原的过程中起决定性作用;激活补体产生攻膜复合物使细胞溶解破坏。人的抗体IgG1~3和IgM与相应抗原结合后,可因构象改变而使其CH2和CH3结构域内的补体结合点暴露,
白细胞介素6生物学活性检测
实验方法原理IL-6在体外能促进B细胞杂交瘤的生长,故又称为杂交瘤生长因子(HGF)。小鼠B细胞杂交瘤7TD1是一株对IL-6依赖的细胞系,由Van Snick 1986年建立,只有在IL-6存在的培养基中才能生长,可以作为指示细胞来测定待检样品中IL-6水平。这类IL-6依赖的小鼠B细胞杂交瘤细胞
白细胞介素1生物学活性检测
实验方法原理白细胞介素1是一种重要的细胞因子,主要由单核-巨噬细胞产生,IL-1不仅对多种免疫活性细胞有重要的调节功能,而且与发热、炎症发生以及某些疾病的病理变化有关。目前对IL-1产生水平的检测主要应用生物学活性检测的方法。一、ConA刺激小鼠胸腺细胞检测IL-1生物学活性 小鼠胸腺细胞在丝裂原刺
白细胞介素2生物学活性检测
实验方法原理IL-2主要由活化T细胞产生,又为T细胞增殖所必需,故称T细胞生长因子( TCell Growth factor, TCGF )。IL-2产生的水平反映T细胞的功能,仅是免疫调节重要的研究对象,而且与临床多种疾病密切相关,CTLL是C57BL/6来源的。鼠杀伤性T淋巴细胞细胞系,由Gil
促炎性细胞因子的生物学效应
炎性细胞因子是一类主要由免疫系统细胞生成的具有许多强大生物学效应的内源性多肽,可介导多种免疫反应。炎性细胞在体内高度表达可引起多种类似心衰症状的所谓心衰表型,包括进行性左室功能低下、肺水肿、左室重构、胚胎基因表达等,形成了关于心衰的细胞因子假说,即心衰进展部分是由心脏本身及外周循环中炎性细胞因子
PeproTech细胞因子溶解使用说明—活性单位篇
PeproTech的细胞因子都是无载体蛋白的冻干粉状态,规格都是质量单位如μg。同时细胞因子又是有生物活性的蛋白,在文献中经常会看到细胞因子的工作浓度用U/mL来表示,比如Human PDGF-BB的使用浓度是120 U/mL。那么,如何对PeproTech的细胞因子进行活性单位U和质量单位的换算呢
细胞因子ELISA检测——人细胞因子多重检测ELISA试剂盒
急性炎症是消除入侵的异物,病原体和其它有害刺激物的初始阶段。如果刺激持续存在,将发生慢性炎症。在慢性炎症过程中,组织的破坏和细胞类型的转移同时发生。调节程序的细胞因子概况取决于炎症的原因,位置和进展。 GM-CSF是一种细胞外同型二聚体多蛋白,具有造血生长因子和免疫调节功能。它可以产生并作用于多种细
细胞因子的检测方法
细胞因子(cytokine)是由细胞分泌的具有生物活性的小分子蛋白物质的统称。在免疫应答过程中,细胞因子在免疫调节、炎症应答、肿瘤转移等生理和病理过程中起重要作用。细胞因子的检测不仅是基础免疫研究的有较手段,同时在临床疾病诊断、病程观察、疗效判断及细胞因子治疗监测方面具有重要价值。但是,由于细胞因子
细胞因子的检测方法
细胞因子(cytokine)是由细胞分泌的具有生物活性的小分子蛋白物质的统称。在免疫应答过程中,细胞因子在免疫调节、炎症应答、肿瘤转移等生理和病理过程中起重要作用。细胞因子的检测不仅是基础免疫研究的有较手段,同时在临床疾病诊断、病程观察、疗效判断及细胞因子治疗监测方面具有重要价值。 但
细胞因子的检测方法
细胞因子的检测方法细胞因子(cytokine)是由细胞分泌的具有生物活性的小分子蛋白物质的统称。在免疫应答过程中,细胞因子在免疫调节、炎症应答、肿瘤转移等生理和病理过程中起重要作用。细胞因子的检测不仅是基础免疫研究的有较手段,同时在临床疾病诊断、病程观察、疗效判断及细胞因子治疗监测方面具有重要价值。
检测细胞因子的方法
目前检测细胞因子的方法主要有生物学测定、免疫学测定、分子生物学技术和流式细胞仪等。生物学测定也叫生物活性测定,主要根据各种细胞因子的不同生物活性检测。免疫学测定是目前使用最为广泛的方法,主要利用细胞因子蛋白或多肽的抗原性,获得特异性抗血清或单克隆抗体,利用抗原抗体特异性反应的特性,用免疫学技术定
细胞因子的检测方法
细胞因子(cytokine)是由细胞分泌的具有生物活性的小分子蛋白物质的统称。在免疫应答过程中,细胞因子在免疫调节、炎症应答、肿瘤转移等生理和病理过程中起重要作用。细胞因子的检测不仅是基础免疫研究的有较手段,同时在临床疾病诊断、病程观察、疗效判断及细胞因子治疗监测方面具有重要价值。但是,由于细胞因子
简述白介素1的生物学活性
1.局部作用局部低浓度的IL-1主要发挥免疫调节作用。 ①与抗原协同作用,可使CD4+T细胞活化,IL-2R表达; ②促进B细胞生长和分化,可使脾细胞的溶血空斑数(PFC)增加100倍,这说明IL-1也促进抗体的形成; ③促进单核-巨噬细胞等APC的抗原递呈能力; ④与IL-2或干扰素协
LIF的生物学活性的介绍
(1)调节细胞的增殖、分化和表型:LIF抑制小鼠胚胎干细胞(embryonic stem cell,ES)的分化。对于造血系统中的肿瘤细胞,LIF常显示出抑制效应,同时诱导这些肿瘤细胞的分化,例如LIF可抑制小鼠白血病M1细胞的增殖,诱导其转变为巨噬细胞表型,如表达Fc受体,并获得吞噬能力等。对
免疫球蛋白生物学活性
免疫球蛋白的重要生物学活性为特异性结合抗原,并通过重链C区介导一系列生物学效应(表2-2),包括激活补体、亲和细胞而导致吞噬、胞外杀伤及免疫炎症,最终达到排除外来抗原的目的。(一)抗原结合作用抗体分子在结合抗原时,其Fab片段的V区与抗原决定簇的立体结构(构象)必须吻合,特别与高变区的氨基酸残基直接
生物学活性测定方法学评价
用于细胞因子生物学活性测定,对细胞因子前体或其降解产物与可溶性受体结合的细胞因子、细胞因子聚合物等,均不能用此法检测。细胞因子受体拮抗物、细胞因子的天然抗体和类细胞因子等,也将干扰细胞因子活性的测定。细胞因子生物学活性测定法主要具有以下特点:①操作繁琐;②易受干扰;③敏感性较高;④特异性不高。
新生物学活性测定方法介绍
近年来,抗体药物的接连上市和重磅销售引发国内外抗体类生物治疗药物的研发热潮。活性测定是对药物的有效成分和含量以及药物效价的测定,是确保抗体类药物有效性的重要质控指标。现阶段抗体药物的活性分析方法主要是体外( in vitro) 检测,主要有基于细胞、转基因细胞以及新技术应用三方面对抗体药物活性测定的