冰冻组织制备及切片实验
实验材料 冰冻组织试剂、试剂盒 异戊烷OCT多聚-L-赖氨酸仪器、耗材 滤纸切片机加热槽冰冻机细毛刷实验步骤 1. 将一个50 ml 硬质玻璃烧杯浸入盛有液氮的烧瓶(或敞口聚苯乙烯盒)中冰冻,烧杯中加CryoKwik(或异戊烷)。2. 在滤纸条一端以铅笔注明标签,用镊子将样品放于另一端。 3. 保证CryoKwik 呈液状(必要的话,通过接触一热的金属棒使其熔化),将样品浸于冷的CryoKwik 中1 min。 4. 置带样品的滤纸条于冰冻切片仪的样品槽中,并固定在有一薄层OCT化合物的切片托盘上。5. 将冰冻切片仪中的样品切片托盘放入预冷的加热槽中或CO2喷射型冰冻器中冰冻,直至OCT化合物凝结,并在冰冻切片仪中放置10 min 以上,使温度均衡。6. 用一预冷的剃须切片,将样品块修成梯形(在不会......阅读全文
组织芯片的制备——冰冻组织芯片
实验材料新鲜组织试剂、试剂盒OCT 包埋剂切片黏合剂仪器、耗材1 mm 孔径针载玻片实验步骤将每个需要制备 TMA 的新鲜组织,不经固定包埋在 OCT 包埋剂中, -20℃ 中冻成块。另外,再将 OCT 包埋剂倒在长 3 cm×宽 1.5 cm×高 lcm 的模具中, -20℃ 中冻成块。用特制的
组织病理实验_冰冻切片
组织病理实验广泛应用于生物学、解剖学、病理学、肿瘤学、法医学、临床诊断学等实验方法原理冰冻切片是指将组织在冷冻状态下直接用切片机切片。它实际上是以水为包埋剂,将组织进行冰冻至坚硬后切片的。在冰冻切片前组织不经过任何化学药品处理或加热过程,大大缩短了制片时间。同时,由于此法不需要经过脱水、透明和浸蜡等
冰冻组织制备及切片实验
实验材料 冰冻组织试剂、试剂盒 异戊烷OCT多聚-L-赖氨酸仪器、耗材 滤纸切片机加热槽冰冻机细毛刷实验步骤 1. 将一个50 ml 硬质玻璃烧杯浸入盛有液氮的烧瓶(或敞口聚苯乙烯盒)中冰冻,烧杯中加CryoKwik(或异戊烷)。2. 在滤纸条一端以铅笔注明标签,用镊子将样品放于另一端。 3.
冰冻组织制备及切片实验
实验材料冰冻组织试剂、试剂盒异戊烷OCT多聚-L-赖氨酸仪器、耗材滤纸切片机加热槽冰冻机细毛刷实验步骤1. 将一个50 ml 硬质玻璃烧杯浸入盛有液氮的烧瓶(或敞口聚苯乙烯盒)中冰冻,烧杯中加CryoKwik(或异戊烷)。2. 在滤纸条一端以铅笔注明标签,用镊子将样品放于另一端。 3. 保证C
冰冻切片前的组织怎样保存
冰冻切片是不需要固定的,冰冻切片新鲜取材后,应立刻放入冰冻切片机内切片。如不能立即切片,要放入液氮中速冻,然后放在-70度低温冰箱内长期保存抗原性不会丢失。在手术台上取下的组织放到冷冻机里面-20度左右冻成硬块,制成切片用于快速诊断,该诊断仅作参考,应以石蜡诊断为主。
冰冻切片前的组织怎样保存
冰冻切片组织可先固定后冻存,也可直接冻存,直接冻存一般采取液氮中速冻,然后转入-20度保存,冻存组织应避免反复冻融,且尽快进行切片或用OCT包埋(包埋后可放置较长时间)。未包埋的组织在-20度长期保存的组织会逐渐脱水(比如肌肉),影响形态学观察。
冰冻切片前的组织怎样保存
冰冻切片组织可先固定后冻存,也可直接冻存,直接冻存一般采取液氮中速冻,然后转入-20度保存,冻存组织应避免反复冻融,且尽快进行切片或用OCT包埋(包埋后可放置较长时间)。未包埋的组织在-20度长期保存的组织会逐渐脱水(比如肌肉),影响形态学观察。
冰冻组织固定和蔗糖浸制实验
实验方法原理 实验材料 冰冻组织试剂、试剂盒 PBSPFA蔗糖实验步骤 1. 于4℃,在2%PFA固定液(做免疫组织化学时)或4%PFA固定液(做原位杂交时) 中,固定小的组织样品或分离的胚胎(如第7、第8天的小鼠胚胎)30 min。2. 在PBS中清洗组织样品2次。3. 在30%蔗糖中浸制样品,直
冰冻组织固定和蔗糖浸制实验
实验材料冰冻组织试剂、试剂盒PBSPFA蔗糖实验步骤1. 于4℃,在2%PFA固定液(做免疫组织化学时)或4%PFA固定液(做原位杂交时) 中,固定小的组织样品或分离的胚胎(如第7、第8天的小鼠胚胎)30 min。2. 在PBS中清洗组织样品2次。3. 在30%蔗糖中浸制样品,直至组织沉下(1~3
冰冻切片实验技巧(四):脂肪组织的处理
脂肪组织无疑是冰冻切片者的绊脚石,道理很简单脂肪不会结冰,把温度降低让脂肪变硬可以切出较薄的片子,但是这个温度对同一组织中的其他成分来说显得太低而不合适切片,当脂肪破碎影响切片时这个问题就变得明显,下面是一些我的经验总结。1.尽可能的削掉不需要的脂肪组织当我准备切淋巴结时,我会先检查一遍,小心翼翼地
脑组织冰冻切片的步骤和注意事项
1.固定。大鼠或小鼠灌注取脑,取脑后用多聚甲醛浸泡固定,即能达到冲洗的目的,又不损害组织。2.脱水。先后用15%,20%,30%的PB蔗糖溶液 进行脑组织梯度脱水,脑组织沉下去就是脱水好了。3.冰冻切片,推荐瑞沃德冷冻切片机。取出脑组织,用OCT胶包埋,一层层的包埋,注意:不能有气泡,否则营销切片;
组织免疫荧光是用石蜡切片还是冰冻切片
二者应该都是可以的,具体要看自身的实验条件哪个操作更方便以及抗体的性质。看你的实验要求,冰冻片要求较高(低温环境,液氮,冰冻切片机,OCT包埋剂等等),石蜡片的制作就比较简单,试剂也较便宜。另外看你购买的抗体适用于哪种片子免疫组化的话,一般大都使用石蜡切片。免疫荧光染色的话,都可以的,冰冻切片比较容
冰冻血浆和新鲜冰冻血浆区别
新鲜冷冻血液与一般冷冻血液的差别取决于规定的标准不一样。新鲜冷冻血液在有限的时间与温度下产生,而一般冷冻血液在保存期内当然沉定而成。抗凝全血于6-8钟头以内在4℃标准下抽滤将血液分离出来,并快速在-30℃下列冷冻成块,即是新鲜冷冻血液,冷冻情况一直持续到应用以前,有效期限为1年,产品内带有所有的凝血
冰冻切片
实验概要冰冻切片(frozen section)是一种在低温条件下使组织快速冷却到一定硬度,然后进行切片的方法。实验步骤1. 冷冻切片的制作方法 1) 将恒冷箱冷冻切片机的速冻头和箱内温度调整到适宜的切温度,一般情况下为-18~-25℃。 2) 在标本冷冻托上涂布一层冷冻包埋剂——OCT
冰冻蚀刻的冰冻蚀刻原理
冰冻蚀刻(freeze-etching)亦称冰冻断裂(freeze-fracture)。标本置于-100˚C的干冰或-196˚C的液氮中,进行冰冻。然后用冷刀骤然将标本断开,升温后,冰在真空条件下迅即升华,暴露出断面结构,称为蚀刻(etching)。蚀刻后,向断面以45度角喷涂一层蒸汽铂,再以90度
冰冻蚀刻的冰冻蚀刻原理
冰冻蚀刻(freeze-etching)亦称冰冻断裂(freeze-fracture)。标本置于-100˚C的干冰或-196˚C的液氮中,进行冰冻。然后用冷刀骤然将标本断开,升温后,冰在真空条件下迅即升华,暴露出断面结构,称为蚀刻(etching)。蚀刻后,向断面以45度角喷涂一层蒸汽铂,再以90度
冰冻蚀刻的冰冻蚀刻原理
冰冻蚀刻(freeze-etching)亦称冰冻断裂(freeze-fracture)。标本置于-100˚C的干冰或-196˚C的液氮中,进行冰冻。然后用冷刀骤然将标本断开,升温后,冰在真空条件下迅即升华,暴露出断面结构,称为蚀刻(etching)。蚀刻后,向断面以45度角喷涂一层蒸汽铂,再以90度
冰冻切片组织蛋白酶B(CATHEPSIN-B)活性原位荧光染色检...
主要用途冰冻切片组织蛋白酶B(CATHEPSIN B)活性原位荧光染色检测试剂是一种旨在通过荧光染料甲酚紫标记的多肽底物作为探针,自由进入细胞内,受到组织蛋白酶B水解后,呈现荧光现象,以分析样品酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种冰冻组织内组织蛋白酶B的
冰冻切片组织冯库萨(VON-KOSSA)染色试剂盒使用说明
主要用途冰冻切片组织冯库萨(VON KOSSA)染色试剂是一种旨在使用银还原技术,分析固定处理的组织细胞样本中钙沉积现象的权威而经典的技术方法。该技术经过精心改良VON KOSSA方法、成功实验证明的。主要适用于冰冻切片的组织钙沉积和钙化结节检测;同时也适合动物原生代或培养细胞的检测。广泛用
冰冻切片组织冯库萨(VON-KOSSA)染色试剂盒使用说明
冰冻切片组织冯库萨(VON KOSSA)染色试剂盒产品说明书(中文版) 主要用途 冰冻切片组织冯库萨(VON KOSSA)染色试剂是一种旨在使用银还原技术,分析固定处理的组织细胞样本中钙沉积现象的权威而经典的技术方法。该技术经过精心改良VON KOSSA方法、成功实验证明的。主要适用
冰冻切片固定实验
实验材料 冰冻组织试剂、试剂盒 PFAPBS乙醇仪器、耗材 加湿盒实验步骤 1. 将承有切片的载玻片放入加湿盒中,加4%PFA覆盖整个切片,盖上加湿盒,如为预先未固定过的组织,则于室温放置20 min,如是固定过的组织则放置5 min。2. 吸去固定液,用毛细吸管或用喷水瓶以3×PBS冲冼切片,
冰冻切片的定义
冰冻切片(frozen section)是一种在低温条件下使组织快速冷却到一定硬度,然后进行切片的方法。因其制作过程较石蜡切片快捷、简便,而多应用于手术中的快速病理诊断。冰冻切片的种类较多,有低温恒冷箱冰冻切片法,二氧化碳冰冻切片法,甲醇循环制冷冰冻切片法等。这些方法,随着时代的变迁,科技的发展
冰冻切片的应用
(1)在手术进行中,突然发现病人的病变与原诊断,原定手术方案不相符合,或者怀疑时,需要病理确定。 (2)了解淋巴结内是否有转移的肿瘤细胞,或者转移的程度,以利于确定是否需要彻底扫除淋巴结或者其它的治疗措施。 (3)对于已确定为恶性肿瘤的患者,则需要了解其手术范围是否足够,上下切缘是否有残存的
如何运输冰冻细胞
干冰保存就可以吧,快递公司有这种业务;之前做过把细胞复苏后,将培养瓶灌满培养液包好直接带走,不过时间不能太长
冰冻切片固定实验
实验方法原理原位杂交中所用冰冻切片必须用多聚甲醛固定,然后再脱水。实验材料冰冻组织试剂、试剂盒PFAPBS乙醇仪器、耗材加湿盒实验步骤1. 将承有切片的载玻片放入加湿盒中,加4%PFA覆盖整个切片,盖上加湿盒,如为预先未固定过的组织,则于室温放置20 min,如是固定过的组织则放置5 min。2.
中国冰冻圈科学大会探索减缓冰冻圈影响科学对策
第一届中国冰冻圈科学学术大会日前在京召开。会议以“冰冻圈变化、影响与可持续发展”为主题,探讨了冰冻圈的变化机理以及对全球和区域气候、环境的影响,并探索减缓和适应冰冻圈影响的技术和科学对策。 冰冻圈科学委员会主席秦大河介绍说,2000年世界气候研究计划专门启动了新的核心计划——气候与冰冻圈计划,
冰冻切片组织蛋白酶B活性原位荧光染色检测试剂盒
冰冻切片组织蛋白酶B(CATHEPSIN B)活性原位荧光染色检测试剂盒产品说明书(中文版) 主要用途 冰冻切片组织蛋白酶B(CATHEPSIN B)活性原位荧光染色检测试剂是一种旨在通过荧光染料甲酚紫标记的多肽底物作为探针,自由进入细胞内,受到组织蛋白酶B水解后,呈现荧光现象,
冰冻切片的制作技巧
这个主要看组织固定包埋技术和冰冻切片机性能吧,固定包埋因人而异,因为需要快速出诊断报告,这一点要求切片机的速冻效果好,机器能马上进入工作状态。这一点我觉得深圳瑞沃德厂家的冰冻切片机设计的很好,可以上班前自动唤醒(无需人员手动),上班了,机器也就可以马上进入工作状态。样本快速制冷,2-3分钟就可以了
徕卡冰冻超薄切片技术
徕卡冰冻超薄切片技术是使样品迅速冷冻,然后用冷冻切片机进行徕卡冷冻超薄切片。它省去了普通超簿切片法中繁杂的化学固定与包埋操作,在细胞化学研究中有着特殊的用途。为了很好保存形态结构,必须使游离水形成玻璃态的冰,防止产生冰晶。这就要求很高的冰冻速率(~度/秒),这对于传热性能差的生物材料来说是困难的。
怎么切好冰冻切片
冰冻组织的取材,就是选择好合适的组织块,放在一个小的金属托上进行速冻,冻到一定的硬度后,就在病理切片机进行切片。然后将切片放入酒精或者专有的固定液里固定,最后进行相应的染色及封片。再盖上盖玻片,贴上病理号标签,这样一张冰冻切片就制作完成了。