冰冻切片固定实验
实验方法原理原位杂交中所用冰冻切片必须用多聚甲醛固定，然后再脱水。实验材料冰冻组织试剂、试剂盒PFAPBS乙醇仪器、耗材加湿盒实验步骤1. 将承有切片的载玻片放入加湿盒中，加4%PFA覆盖整个切片，盖上加湿盒，如为预先未固定过的组织，则于室温放置20 min，如是固定过的组织则放置5 min。2. 吸去固定液，用毛细吸管或用喷水瓶以3xPBS冲冼切片，并温育5 min。3. 用1xPBS重复步骤2操作，吸去PBS，按顺序以30%、60%、80%、95%和100%乙醇依次冲洗切片，每次2 min。4. 晾干载玻片并保存在放有干燥剂的密封盒中，于-70℃存放可达数周。开盒前应将其平衡至室温。 图一、加湿盒展开 注意事项1. 固定及时是冷冻切片制作的第一要 素 ,固定的最佳时机应在切片后马上将裱好组织切片的载玻片放进固定液中固定。固定液要保持新鲜，经常更换。2. 甲醇......阅读全文
冰冻切片固定实验
实验材料 冰冻组织试剂、试剂盒 PFAPBS乙醇仪器、耗材 加湿盒实验步骤 1. 将承有切片的载玻片放入加湿盒中，加4%PFA覆盖整个切片，盖上加湿盒，如为预先未固定过的组织，则于室温放置20 min，如是固定过的组织则放置5 min。2. 吸去固定液，用毛细吸管或用喷水瓶以3×PBS冲冼切片，
冰冻切片固定实验
实验方法原理原位杂交中所用冰冻切片必须用多聚甲醛固定，然后再脱水。实验材料冰冻组织试剂、试剂盒PFAPBS乙醇仪器、耗材加湿盒实验步骤1. 将承有切片的载玻片放入加湿盒中，加4%PFA覆盖整个切片，盖上加湿盒，如为预先未固定过的组织，则于室温放置20 min，如是固定过的组织则放置5 min。2.
组织病理实验_冰冻切片
组织病理实验广泛应用于生物学、解剖学、病理学、肿瘤学、法医学、临床诊断学等实验方法原理冰冻切片是指将组织在冷冻状态下直接用切片机切片。它实际上是以水为包埋剂，将组织进行冰冻至坚硬后切片的。在冰冻切片前组织不经过任何化学药品处理或加热过程，大大缩短了制片时间。同时，由于此法不需要经过脱水、透明和浸蜡等
冰冻切片
实验概要冰冻切片（frozen section）是一种在低温条件下使组织快速冷却到一定硬度，然后进行切片的方法。实验步骤1. 冷冻切片的制作方法 1) 将恒冷箱冷冻切片机的速冻头和箱内温度调整到适宜的切温度，一般情况下为-18～-25℃。 2) 在标本冷冻托上涂布一层冷冻包埋剂——OCT
冰冻组织制备及切片实验
实验材料 冰冻组织试剂、试剂盒 异戊烷OCT多聚-L-赖氨酸仪器、耗材 滤纸切片机加热槽冰冻机细毛刷实验步骤 1. 将一个50 ml 硬质玻璃烧杯浸入盛有液氮的烧瓶（或敞口聚苯乙烯盒）中冰冻，烧杯中加CryoKwik（或异戊烷）。2. 在滤纸条一端以铅笔注明标签，用镊子将样品放于另一端。 3.
冰冻组织制备及切片实验
实验材料冰冻组织试剂、试剂盒异戊烷OCT多聚-L-赖氨酸仪器、耗材滤纸切片机加热槽冰冻机细毛刷实验步骤1. 将一个50 ml 硬质玻璃烧杯浸入盛有液氮的烧瓶（或敞口聚苯乙烯盒）中冰冻，烧杯中加CryoKwik（或异戊烷）。2. 在滤纸条一端以铅笔注明标签，用镊子将样品放于另一端。 3. 保证C
石蜡切片与冰冻切片
一、组织和细胞标本类型：（一） 组织标本类：1、 石蜡切片：组织形态保存好2、 冰冻切片：抗原性保存好（二）细胞标本类：1、组织印片 2、细胞培养片（细胞爬片） 3、细胞涂片二、组织取材1、脑组织和神经组织应采用灌注固定后，再进行后固定。2、组织取材注意事项：（1）标本新鲜：组织要求离体后30min
冰冻切片的原位杂交实验
实验材料 冰冻切片试剂、试剂盒 Tris·ClEDTA甘氨酸PBSSSC乙醇甲酰胺硫酸葡聚糖DTTNaCl仪器、耗材 加湿盒水浴锅培养箱实验步骤 1. 从冰箱中取出载玻片，平衡至室温，再打开玻片盒。置载玻片于架中，浸泡于以50 mmol/l Tris·Cl（pH7.5）/5 mmol/l EDTA
冰冻切片的原位杂交实验
基本方案 实验材料 冰冻切片 试剂、试剂盒
冰冻切片的原位杂交实验
细胞RNA的原位杂交实验用于在混杂的细胞群体和组织中、定位特异的mRNA在细胞中的存在位置。冰冻切片（frozen section）是一种在低温条件下使组织快速冷却到一定硬度，然后进行切片的方法。因其制作过程较石蜡切片快捷、简便，而多应用于手术中的快速病理诊断。实验材料冰冻切片试剂、试剂盒Tris·
冰冻切片免疫荧光实验步骤
1.组织用4%多聚甲醛固定6-8小时，转至20%蔗糖溶液至组织沉底。2.冰冻切片8-10μm，推荐瑞沃德冷冻切片机，温度稳定，切片质量高。室温放置30分钟以上防脱片，-20℃保存。从冰箱拿出的冰冻切片在室温放置30分钟以上再进行免疫荧光。3.1xPBS洗3次，每次3-5分钟。4.用2%BSA室温或3
冰冻切片免疫荧光实验步骤
1.组织用4%多聚甲醛固定6-8小时，转至20%蔗糖溶液至组织沉底。2.冰冻切片8-10μm，推荐瑞沃德冷冻切片机，温度稳定，切片质量高。室温放置30分钟以上防脱片，-20℃保存。从冰箱拿出的冰冻切片在室温放置30分钟以上再进行免疫荧光。3.1xPBS洗3次，每次3-5分钟。4.用2%BSA室温或3
冰冻切片的定义
冰冻切片（frozen section）是一种在低温条件下使组织快速冷却到一定硬度，然后进行切片的方法。因其制作过程较石蜡切片快捷、简便，而多应用于手术中的快速病理诊断。冰冻切片的种类较多，有低温恒冷箱冰冻切片法，二氧化碳冰冻切片法，甲醇循环制冷冰冻切片法等。这些方法，随着时代的变迁，科技的发展
冰冻切片的应用
（1）在手术进行中，突然发现病人的病变与原诊断，原定手术方案不相符合，或者怀疑时，需要病理确定。 （2）了解淋巴结内是否有转移的肿瘤细胞，或者转移的程度，以利于确定是否需要彻底扫除淋巴结或者其它的治疗措施。 （3）对于已确定为恶性肿瘤的患者，则需要了解其手术范围是否足够，上下切缘是否有残存的
GFP骨的冰冻切片实验方法
Protocol for Frozen section of GFP Bone:Fix the bone in 4% Paraformaldehyde at 4�C under constant agitation for 3 days.Decalcification in 14% EDTA sol
冰冻切片实验技巧（三）－学会看片子
这里指的是片子滑过刀片时就要辨别出质量的好坏，如果到镜下才发现片子的缺陷那就无法挽救。1. 观察片子的厚薄尽管冰冻切片机可以设置厚度，但人为辨别片子的厚度是否合适仍然很重要。片子太薄看起来象半透明的镜纸，片子太厚看起来混浊、柔性差，对我来说，5-6um的片子较合适，象一张薄的打印纸。 2. 片子破裂
石蜡切片和冰冻切片的比较
（1）要求做冰冻切片的不一定能做石蜡切片，这是今天我向一老师请教得出的结论。因为作石蜡切片时要高温烤片，可能会破坏组织的抗原性，如果组织的抗原性较稳定，则可作石蜡切片；但是要求做石蜡切片的，可作冰冻切片。（2）冰冻切片的优点是能够较好的保存组织的抗原免疫活性，做免疫组化时不需抗原修复这一步。缺点是细
石蜡切片、冰冻切片及振动切片的区别
一、石蜡切片 把修好的蜡块装在旋转切片机上，即可进行切片(section)。切片必须保持切片刀锐利，切片厚度通常为5～7um，也可根据染色需要切成不同厚度，一般不旋转式切片机超过10um。切好的蜡带，放人40℃左右的温水中将蜡片展平。良好的切片应无刀痕、裂痕，切片厚度均一平整。切片如有上述
细胞固定切片和包埋实验
哺乳动物肌梭的初级终末—使 用 1 um 连续切片的光学显微镜研究实验 实验材料 猫 部分显露肌梭
细胞固定切片和包埋实验
经验交流（0）实验材料猫 部分显露肌梭 试剂、试剂盒二甲砷酸钠缓冲液
细胞固定切片和包埋实验
哺乳动物肌梭的初级终末—使 用 1 um 连续切片的光学显微镜研究实验实验材料猫 部分显露肌梭试剂、试剂盒二甲砷酸钠缓冲液戊二醛四氧化锇乙醇环氧乙烷甲苯胺蓝派罗宁仪器、耗材玻片实验步骤一、固定将取出的肌肉置于含 5% 戊二醛的 0.1mol/l 二甲砷酸钠缓冲液内，PH 值为 7.2, 原位固定 5
怎么切好冰冻切片
冰冻组织的取材，就是选择好合适的组织块，放在一个小的金属托上进行速冻，冻到一定的硬度后，就在病理切片机进行切片。然后将切片放入酒精或者专有的固定液里固定，最后进行相应的染色及封片。再盖上盖玻片，贴上病理号标签，这样一张冰冻切片就制作完成了。
冰冻切片的制作技巧
这个主要看组织固定包埋技术和冰冻切片机性能吧，固定包埋因人而异，因为需要快速出诊断报告，这一点要求切片机的速冻效果好，机器能马上进入工作状态。这一点我觉得深圳瑞沃德厂家的冰冻切片机设计的很好，可以上班前自动唤醒（无需人员手动），上班了，机器也就可以马上进入工作状态。样本快速制冷，2-3分钟就可以了
冰冻切片免疫荧光
实验原理抗原抗体结合主要试剂固定液、梯度蔗糖、磷酸盐缓冲液、封闭液、一抗、荧光标记的二抗、DAPI、荧光抗淬灭封片剂主要设备冰冻切片机、荧光显微镜或激光共聚焦显微镜实验材料组织切片实验步骤切片提取新鲜组织置于4%多聚甲醛中固定；2.梯度蔗糖脱水：10%-20%-30%；3.冰冻包埋剂包埋并切片，切片
徕卡冰冻超薄切片技术
徕卡冰冻超薄切片技术是使样品迅速冷冻，然后用冷冻切片机进行徕卡冷冻超薄切片。它省去了普通超簿切片法中繁杂的化学固定与包埋操作，在细胞化学研究中有着特殊的用途。为了很好保存形态结构，必须使游离水形成玻璃态的冰，防止产生冰晶。这就要求很高的冰冻速率（~度/秒），这对于传热性能差的生物材料来说是困难的。
冰冻切片免疫荧光
实验概要冰冻切片免疫荧光实验原理抗原抗体结合主要试剂固定液、梯度蔗糖、磷酸盐缓冲液、封闭液、一抗、荧光标记的二抗、DAPI、荧光抗淬灭封片剂主要设备冰冻切片机、荧光显微镜或激光共聚焦显微镜实验材料组织切片实验步骤切片1.提取新鲜组织置于4%多聚甲醛中固定；2.梯度蔗糖脱水：10%-20%-30%；3
冰冻切片的制作步骤
冷冻切片 1、取出组织支承器，放平摆好组织，周边滴上包埋剂，速放于冷冻台上冰冻，用吸热器压住组织，至包埋剂与组织冻结成白色冰体即可切片（1~3分种）。 2、将冷冻好的组织块，夹紧于切片机持承器上，启动粗进退键，转动旋钮，将组织修平。 3、调好欲切的厚度，根据不同的组织而定，原则上是细胞密集的薄切，纤
冰冻组织固定和蔗糖浸制实验
实验材料冰冻组织试剂、试剂盒PBSPFA蔗糖实验步骤1. 于4℃，在2%PFA固定液（做免疫组织化学时）或4%PFA固定液（做原位杂交时） 中，固定小的组织样品或分离的胚胎（如第7、第8天的小鼠胚胎）30 min。2. 在PBS中清洗组织样品2次。3. 在30%蔗糖中浸制样品，直至组织沉下（1~3
冰冻组织固定和蔗糖浸制实验
实验方法原理 实验材料 冰冻组织试剂、试剂盒 PBSPFA蔗糖实验步骤 1. 于4℃，在2%PFA固定液（做免疫组织化学时）或4%PFA固定液（做原位杂交时） 中，固定小的组织样品或分离的胚胎（如第7、第8天的小鼠胚胎）30 min。2. 在PBS中清洗组织样品2次。3. 在30%蔗糖中浸制样品，直
冰冻切片实验技巧（四）：脂肪组织的处理
脂肪组织无疑是冰冻切片者的绊脚石，道理很简单脂肪不会结冰，把温度降低让脂肪变硬可以切出较薄的片子，但是这个温度对同一组织中的其他成分来说显得太低而不合适切片，当脂肪破碎影响切片时这个问题就变得明显，下面是一些我的经验总结。1.尽可能的削掉不需要的脂肪组织当我准备切淋巴结时，我会先检查一遍，小心翼翼地