病毒的培养方法实验
实验方法原理 鸡胚培养方法操作简便,适用于流感病毒,痘病毒,疱疹病毒和脑炎病毒等的培养。最常用的鸡胚接种方法有四种,即绒毛尿囊膜接种法,羊膜腔(羊水囊)接种法,尿囊腔接种法和卵黄囊接种法。根据不同病毒和不同目的采用适宜的接种方法。实验步骤 1. 鸡胚的检查将9~11 日龄鸡胚置于检卵器上,照视观察鸡胚是否生活,根据①小血管是否清晰;②胚胎是否活动,观察小鸡的眼睛黑点是否移动。如果鸡胚不动,血管昏暗模糊,变黑或苍白都表示已死亡。2. 接种用铅笔标明天然气室及鸡胚位置,然后在绒毛尿囊膜发育区〈照视时呈现红色〉近胚位处的气室边缘作一记号,定为注射入口。用碘酒消毒注射入口和天然气室端的蛋壳,再用电钻,口腔科用牙钻和小锉刀,于注射入口和天然气室端的蛋壳上锯一小孔,勿伤及卵膜。用大头针通过火焰消毒后刺穿气室端所开小孔的卵膜,这样可避免在注射时液体回流出来。将鸡胚横卧于蛋架上,用无菌l 毫升注射器抽取病毒液体,针头与卵......阅读全文
重要病毒测序完成:基因交换病毒很棘手
生物通报道:研究人员已经对来自大猩猩和黑猩猩的埃博拉病毒进行了首次测序,并且发现这种病毒比之前想象的更加易变。令人意外的是,他们还发现这种病毒的不同病毒株能够交换基因——这意味着开发一种成功疫苗将变得更难。 埃博拉病毒(Ebola virus)能导致发烧和出血,并且90%的感染者会死亡。自1976
武汉病毒所发现蜱传脑炎病毒受体
蜱传脑炎病毒(tick-borne encephalitis virus,TBEV)是一种由蜱虫传播的黄病毒,感染人可导致脑炎、脑膜炎等中枢神经系统疾病及死亡。TBEV发现于20世纪30年代,其细胞受体未知,阻碍着对病毒感染致病机制的理解和抗病毒药物的研发。 近期,中国科学院武汉病毒研究所/生
HIV病毒(艾滋病病毒)抗原检测介绍
第四代艾滋病病毒抗原抗体检测可以同时检出艾滋病病毒抗体和HIVp24抗原,广泛用于临床。与单纯抗体检测相比,提高了准确性,尤其是对慢性艾滋病病毒感染者的敏感性和特异性接近100%。此外,第四代艾滋病病毒检测将艾滋病窗口期缩短至14~21天,有助于早期发现艾滋病病毒感染。不足之处是,增加了非特异性
慢病毒和假病毒有什么区别
装甲病毒(假病毒)是将特定的核酸片段包裹于病毒外壳蛋白内,国外已广泛应用于核酸检测试剂、基因诊断试剂和科研试剂的对照。国内大多数声称装甲病毒(假病毒)的多为慢病毒,慢病毒仍有感染性;装甲病毒(假病毒)与慢病毒不同,由MS2噬菌体外壳蛋白包裹外源核酸片段,无感染性,无自主复制能力,生物安全性高,核酸稳
什么是病毒?病毒是不是微生物?
病毒是生物界中最小的一类生物,没有完整的细胞结构、必须寄生在活细胞内、并且繁殖方式是“复制”的非细胞型生物,它依靠掠夺别人的营养生存,危害大。病毒的直径在10~300nm,因而大多数病毒只能在电子显微镜下看到,所以病毒是微生物的一种。
汉坦病毒疫苗与抗病毒研究介绍
近年来HFRS疫苗的研制取得了较大的进展,有些类型的疫苗已经国家批准生产使用,有的已进入临床观察中,有的正在试验室研制和检测中。 中国已经研制成功并试生产的3种单价灭活疫苗经大面积人群接种观察,安全性较好,并具有较好的血清学和流行病学效果。近期(基础免疫后1年)和中期(基础免疫后2年)平均保护
病毒包装技术——病毒包装实验经验总结
第一,细胞状态、载体系统、目的基因对病毒包装影响(基因大小、序列情况、蛋白功能毒性等)是三个主要影响病毒质量的因素。第二,细胞状态需要有丰富的细胞培养经验来判断,比如包装或转染感染前一定要重视细胞干净细微污染与否、饱满立体感是否好、铺板均匀细胞密度适中否等性状。另外转染时细胞的密度要十分注意,一般在
病毒包装技术6——腺病毒包装流程介绍
1. 细胞的准备 a) 复苏293细胞,传代培养1-2代,调整好细胞状态,务必4代以内完成转染实验。 b) 在转染前1天,用胰酶消化传代,将5×105细胞接种于6孔板或87.5px皿中,加入2ml完全培养基(DMEM+10%FBS+1%P/S+1%Glutamax),摇匀后置于5%
慢病毒和其他病毒的特征比较介绍
常用的病毒载体有腺病毒、逆转录病毒和慢病毒。逆转录病毒载体只能感染分裂期细胞,而且容量有限,腺病毒一般不能整合到染色体上,只能进行瞬时感染。与其它逆转录病毒相比,慢病毒(LV)具有可以感染非分裂期细胞、容纳外源性基因片段大,可以长期表达等显著优点。慢病毒不产生任何有效的细胞免疫应答,可作为一种体
病毒包装技术——腺相关病毒(AAV)包装(二)
2.3 蛋白质分析 为了分析AAV Rep和Cap蛋白质表达,按照2.2部分所述进行质粒转染。转染后48小时,将培养物刮到冷PBS/Mg(PBS含有5mM MgCl2),细胞低速离心沉淀收获。细胞沉淀在冰上用200ml STM-NP缓冲液(25mM蔗糖,10mM Tris-HCl,pH8
简述艾滋病毒的病毒的特点
主要攻击人体的辅助T淋巴细胞系统,一旦侵入机体细胞,病毒将会和细胞整合在一起终生难以消除; 广泛存在于感染者的血液、精液、阴道分泌物、乳汁、脑脊液、有神经症状的脑组织液中,其中以血液、精液、阴道分泌物中浓度最高; 对外界环境的抵抗力较弱,对乙肝病毒有效的消毒方法对艾滋病病毒消毒也有效; 感
武汉病毒所人工合成杆状病毒
合成生物学技术作为21世纪的一门新兴生物学技术,推动了生命科学乃至整个自然科学领域的发展。病毒的人工合成为深入揭示病毒的本质和功能,以及病毒的遗传改造提供了强有力的工具。以往,对病毒人工合成的探索主要集中在RNA病毒上,而目前已知最大的RNA病毒基因组也仅有~30 kb。迄今为止,所报道成功合成
病毒包装技术——腺相关病毒(AAV)包装(一)
摘要:腺相关病毒(AAV)是一种人细小病毒, 因为能作为一种基因治疗载体而受到广泛关注。目前大多数生成rAAV的实验方案需要共转染一个载体质粒和一个表达病毒复制和结构基因的包装质粒到腺病毒(Ad)感染的培养细胞中。但是也可以通过新的辅助质粒(pH3和pH5),排除了Ad共转染的需求。辅助质粒表达AA
病毒中和实验_固定抗血清-稀释病毒法
实验材料已知标准的抗病毒血清 (20抗体单位 0. 1 ml)试剂、试剂盒已知阴性血清 (56℃ 30 min 灭活)宿主:敏感细胞、敏感动物、鸡胚仪器、耗材细胞培养板水浴锅细胞培养箱实验步骤(以细胞培养为例):①用细胞维持液连续 10倍稀释病毒分离物10-1~10-8);②取 0. 6ml不同浓度
病毒中和实验_固定病毒-稀释抗血清法
中和试验 (neutralization test)是在体外适当条件下孵育病毒与特异性抗体的混合物,使病毒与抗体相互反应,再将混合物接种到敏感的宿主体内,然后测定残存的病毒感染力的一种方法。凡是能与病毒结合,并使其失去感染力的抗体称为中和抗体。因为病毒要依赖于活的宿主系统复制增殖,因此,中和试验必须
武汉病毒所关于荆门蜱虫病毒与黄病毒的比较研究获进展
荆门病毒是近十年来在世界各地陆续被发现的一类分节段的正链RNA病毒,因其代表种荆门蜱虫病毒(JMTV)最早在湖北省荆门地区的一种微小扇头蜱样本中分离得到而得名。2018年至今,陆续在有发热头疼症状或有过被蜱虫叮咬经历的患者血液样本中检测到荆门病毒,其基因组特征亦趋于多样化,对人类健康具有现实和潜
顿挫病毒介绍
有些宿主细胞不能全部提供病毒复制所需的必要因子,致使所复制的病毒为不完整的、无感染性的病毒颗粒或亚颗粒。这类感染过程有以下3种类型:1.流产感染流产感染分为依赖于细胞的流产感染和依赖于病毒的流产感染。病毒感染的细胞是病毒不能复制的非允许细胞,将导致依赖于细胞的流产感染。非允许细胞内,缺失某些参与病毒
“以毒攻毒”病毒抗癌
一种经过基因工程编辑的疱疹病毒能够激发人体内的免疫细胞,使之对癌症产生免疫应答,这一疗法已成为同类研究中首个在美国获批使用的抗癌疗法,它为期待已久的抗癌疗法铺平了道路。10月27日,美国食品与药品管理局(FDA)批准了用一种通过基因工程编辑的病毒,即talimogene laherparepve
病毒转化细胞
实验概要病毒转化细胞实验步骤1.血液制备:柠檬酸(Citric Acide)或肝素抗凝取血1~2ml,分装入管中,每管0.5ml全血,置于4℃冰箱中30分钟。2.EBV病毒转化:从液氮中取出冻存的0.5ml全血,在37℃水中迅速解冻。3.将解冻细胞与10ml不含血清的RPMI 1640混合,2500
病毒传播途径
1.水平传播 水平传播是指病毒在人群中不同个体之间的传播,包括病毒从动物到人的传播。常见的水平传播方式有以下几种。 (1)经呼吸道传播:病毒经空气、飞沫等吸入感染,如流感病毒、风疹病毒等。 (2)经消化道传播:病毒污染了食物和水源,经口食入而感染。如甲型肝炎病毒、脊髓灰质炎病毒等。 (3
病毒的危害
致瘤作用 有 一些病毒能诱发良性肿瘤,如痘病毒科的兔纤维瘤病毒、人传染性软疣病毒和乳多泡病毒科的乳头瘤病毒;另有一些能诱发恶性肿瘤,按其核酸种类可分为DNA肿瘤病毒和RNA肿瘤病毒。DNA肿瘤病毒包括乳多泡病毒料的SV40和多瘤病毒,以及腺病毒科和疱疹病毒科的某些成员,从肿瘤细胞中可查出病毒核
什么是病毒
病毒是一种极微小的生物,只能在电子显微镜下才能看到。病毒病常发生在高温、干旱条件下。主要是借助蚜虫、叶蝉、椿象等昆虫与植物汁液接触传染。病毒主要在杂草、块茎(如马铃薯、甘薯)、种子和昆虫体内过冬。干旱年份蚜虫繁殖快,病毒病发生也重。
诺瓦克病毒介绍
瓦克病毒(NV)和诺瓦克样病毒(NLV)是一组世界范围内引起的急性无菌性胃肠炎的重要病原。 诺瓦克病毒1968年在美国得名;1990年Jiang等人克隆了诺瓦克病毒的全基因组并表达了其结构蛋白,获得了形态结构和生物学特征与天然病毒相似的病毒样颗粒,随着分子生物学和免疫学技术的发展,人们逐渐发
病毒检测方法
检测病毒方法有:特征代码法、校验和法、行为监测法、软件模拟法, 这些方法依据的原理不同,实现时所需开销不同,检测范围不同,各有所长。1、特征代码法:特征代码法被早期应用于SCAN、CPAV等著名病毒检测工具中。国外专家认为特征代码法是检测已知病毒的最简单、开销最小的方法。 2、校验和法:将正常文件
病毒的特点
特点①病毒很小,结构极其简单;②遗传载体的多样性:有 DNA 病毒、RNA 病毒,这两种病毒均有双链和单链之分;③彻底的寄生性;④以复制和装配的方式进行增殖。
脑炎病毒介绍
病毒性脑炎是由虫媒脑炎病毒引起的以中枢神经系统损伤为主要表现的疾病。虫媒脑炎病毒是一类经吸血节肢动物叮咬一个脊椎动物传给另一个脊椎动物的病毒。人偶尔被带毒媒介叮咬而受染。节肢动物媒介吸食病毒血症期的脊椎动物血血液而被终身感染,甚至病毒可在节肢动物内经卵传代。病毒在节肢动物组织内增殖不引起损伤和产
病毒的特征
病毒是颗粒很小、以纳米为测量单位、结构简单、寄生性严格,以复制进行繁殖的一类非细胞型微生物。病毒是比细菌还小、没有细胞结构、只能在细胞中增殖的微生物。由蛋白质和核酸组成。大部分要用电子显微镜才能观察到。 原指一种动物来源的毒素。“病毒”一词源于拉丁文。病毒能增殖、遗传和演化,因而具有生命最基本
腺病毒简介
腺病毒载体的优点:1. 宿主范围广, 对人致病性低腺病毒载体系统可广泛用于人类及非人类蛋白的表达。腺病毒可感染一系列哺乳动物细胞,因此在大多哺乳动物细胞和组织中均可用来表达重组蛋白。特别需要指出的是:腺病毒具有嗜上皮细胞性,而人类的大多数的肿瘤就是上皮细胞来源的。另外,腺病毒的复制基因和致病基因均已
病毒分类系统
自从1898年贝杰林克(Beijerinck)首次提出“病毒”的概念以来,已经过去100多年时间。病毒的种类由最初的几十种、几百种,发展到今天的4000多种,为了使如此多的病毒种类能够得到科学的命名和分类,国际病毒分类委员会(International Comittee on Taxonomy of
猫杯状病毒
虽然我们年年都打猫三联,但是,猫三联是预防什么病的呢? 猫瘟,猫杯状,猫疱疹。 杯状病毒是什么鬼? 从近年来大量的研究数据、统计数据、还有笔者的临床接诊经验来看,杯状病毒的检出量,是上述三种传染病中检出量最高的。而猫上呼吸道疾病中,杯状病毒感染占50% 那么我们先来看看这杯状病毒到底是个