点突变不易扩增突变系统(简称ARMS)分析实验
实验材料 正常 ARMS 引物 突变 ARMS 引物共 同(普通)引物试剂、试剂盒 4dNTP10 X PCR 反应缓冲液已知基因型 DNA 模板轻矿物油Taq DNA 聚合酶loading缓冲液DNA 分子大小标记DNA 样本仪器、耗材 Perkin-Elmer Cetus thermal cyler (480 或 TC ) 和合适的反应管实验步骤 基本方案 ARMS 试验检测单个突变1.根据已介绍的 ARMS 引物指导栏,设计正常的、突变的和共同的 ARMS 引物以适合相应的突变。选择一个合适的参照引物,由此获得所有的引物并准备 50 umol/L 的各种溶液。2.根据表9.7.2的指导方法准备正常和突变的 ARMS 反应体系,配40 ul预先混匀的反应体系至反应管中用于一个循环,如有必要可在室温放置几天或-20°C冻存几个月。3.室温下加 5W已准备好的 10~50 ng/ul 对照DNA至每含有N和M混合引物的管中。如有......阅读全文
点突变不易扩增突变系统(简称ARMS)分析实验
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数问生物CODARARMS-PCR液态活检技术入选2018-ASCO
中国德清,2018年5月16日--领先的创新诊断产品和医学检验服务企业浙江数问生物技术有限公司宣布,其独创的高灵敏度CODAR-ARMS PCR液体活检技术研究结果入选2018年ASCO(美国临床肿瘤学会)年会会议摘要,首次在国际会议上展示CODAR-ARMS PCR技术的优越性能。 数问开
或将改变肿瘤治疗临床路径的血液EGFR突变检测技术?
一、血液EGFR检测:临床肿瘤治疗新选择 在非小细胞肺癌(NSCLC)里,EGFR基因的突变频率非常高,尤其是亚裔非吸烟的女性患者,其突变比例可高达60-70%。NSCLC临床治疗实践中,明确EGFR基因状态对指导后续靶向用药治疗至关重要。 目前,EGFR基因突变NSCLC的临床治疗主要通过
JEM:B细胞形成中新特殊蛋白的关键作用
近日,刊登于国际杂志The Journal of Experimental Medicine上的一项研究论文中,来自弗莱堡大学的研究人员通过研究在B细胞中发现了一种名为Kidins220/ARMS的新型蛋白质,同时研究者还表示,该蛋白在机体抗体的产生和B细胞形成过程中扮演着决定性的角色;目前来自
基于数字PCR的甲状腺乳头状癌BRAF-V600E突变检测新方法
近日,华山医院关明教授团队在《Clinica Chimica Acta》杂志发表题为”Detection of BRAF V600E mutation in fine-needle aspiration fluid of papillary thyroid carcinoma by drop
Genomic-Cloning-Technical-Manual
Genomic Cloning Technical ManualAn optimal strategy for genomic cloning should meet three requirements: 1) a maximum number of recombinants should be
Illumina-测序技术原理概述
基因的变异类型有多种(点击查看),对应的分子检测方法亦有多种,针对不同的需求,都有对应的理想检测方法,每个检测平台都有着自己的优势,比如:操作简单:PCR,ARMS-PCR,HRM等时间快速:ARMS-PCR,HRM等成本低:PCR,PCR-RFLP,MassARRAY等准确:Sanger等通量高:
谐波分析仪的技术参数
频率测量 测量范围:48~52Hz,中心频率50Hz,测量条件:信号基波分量不小于80%F.S. 测量误差: ≤0.02Hz 输入电压量程 10-480Vrms 输入电流量程5Arms, 200Arms(选配) 基波电压(电流)幅值 :基波电压允许误差:≤0.5%F.S.;基波电流允许
SuperMaze动物行为视频分析软件原理及应用领域(二)
3. 八臂迷宫(Radial Arm Maze) Subjects are placed in the center of an eight-arm radial maze. Four randomly chosen arms are baited with food pellets in
基因检测技术:-契合临床多元化需求,-推动精准医疗前行
生物医学新技术的发展极大地推动了疾病诊治的水平,同时也带来医疗资讯的大爆炸和临床应用的混乱。从近期液体活检共识、NGS共识、卫计委发文规范临床应用等可知,在生物医学技术日新月异的今天,如何应用医学技术进行精准医疗,满足不断增长的多元化的临床需求,已成为生物医学领域不可避免的话题。 以临床需求为
浅谈液体活检和二代测序的规范之路
近日,“魏则西事件”将百度竞价排名、医疗市场化等问题推上了舆论的风口浪尖,同时,肿瘤免疫治疗技术也成了又一个“疫苗之殇”。新技术的发展是一个不断“试错”和“完善”的过程。医疗新技术的“试错”成本是惨痛的。对于肿瘤患者而言,我们一方面期待新技术带来生的曙光,一方面又不希望成为那个“试错”下的生命“成本
PNAS:-融合基因组学揭示横纹肌肉瘤细胞起源
基因融合一直被认为是肿瘤独有的特征。基因融合是指染色体上两个异位的基因嵌合在一起,由于染色体发生易位、缺失或者倒置造成的,通常在癌症的发生发展扮演着重要的角色,并且可以作为诊断和治疗癌症的靶标。基因融合现象最早在慢性粒细胞白血病中发现 BCR-ABL基因融合(费城染色体)。除血液系统肿瘤外,在实
动物行为轨迹分析平台
1. Morris水迷宫(Morris water maze, MWM)Morris水迷宫实验是一种强迫实验动物(大鼠、小鼠)游泳,学习寻找隐藏在水中平台的一种实验,Morris水迷宫主要用于测试实验动物对空间位置感和方向感(空间定位)的学习记忆能力,被广泛应用于学习记忆、老年痴呆、海马/外海马研究
新的药物,新的检测,肺癌诊疗新征程
肺癌是全球最常见的恶性肿瘤,死亡率居恶性肿瘤之首,其中约85%为非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)。由于人口老龄化的加剧、环境的恶化等因素,我国肺癌发病率呈现逐年上升趋势,预计到2025年,我国每年肺癌新发病例将超过100万。 肺癌治疗已进入精准医
电能表校验仪的用途与功能简介
1、自动/手动校验感应式单相电能表; 2、自动/手动校验电子式单相电能表; 3、测量工频电压有效值(5~220Vrms); 4、测量工频电流有效[3]值(10mA~100Arms); 5、测量上述电压/电流下的有功功率、电压/电流相位角、频率等参数; 6、自动记录测量数据,
简述脑血管破裂的早期症状
2021年7月,中国卒中学会在第七次学术年会期间正式发布了识别卒中早期症状的“BE FAST口诀”,前5个字母各代表一个早期症状,最后1个字母是提醒一旦发现卒中症状,就要马上拨打急救电话,立刻就医: “B”——Balance是指平衡,平衡或协调能力丧失,突然出现行走困难; “E”——Eyes
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PCR-Primer-Design(二)
Terminal Nucleotides Make a Difference Both the terminals of the primer are of vital importance for a successful amplification. The 3'-end
盘点:单核苷酸多态性(SNP)检测方法
单核苷酸多态性(Single Nucleotide Polymorphisms, SNP)主要是指在基因组水平上由单个核苷酸的变异所引起的DNA序列多态性,包括碱基的颠换、转换、插入和缺失。它是人类可遗传变异中最常见的一种,占所有已知多态性的90%以上。SNP作为第三代分子标记,被广泛应用于分子
液体活检在CTCs检测的应用
2015年,液体活检被《麻省理工大学科技评论》评选为年度十大突破技术,据Piper Jaffray预测,2026年广义液体活检全球市场总容量约326亿美元,包括癌症领域286亿美元、无创产前诊断(NIPT)20亿美元、器官移植20亿美元。在众多应用场景中,液体活检在癌症领域的应用占据超过85%的
李辉教授PNAS:融合基因组学揭示横纹肌肉瘤细胞起源
基因融合一直被认为是肿瘤独有的特征。弗吉尼亚大学的一组研究人员从干细胞肌肉分化发生的融合基因事件入手,分析了横纹肌肉瘤细胞的起源,这是首次从融合基因的角度来研究肿瘤细胞的起源。这项研究在线发表于10月31日《美国国家科学院院刊》(PNAS)杂志上,文章的第一作者谢仲秋博士毕业于湖南大学,博士期间从事
MassARRAY核酸质谱系统,带您玩转基因检测
基因检测在遗传性疾病、肿瘤、感染性疾病的诊疗、预后预测、用药指导等多个方面起着举足轻重的作用。目前检测手段众多且各具特色。以PCR为基础的检测手段,诸如ARMS-PCR,荧光定量PCR、数字PCR等,操作简便,快速,数据分析简单,但是由于通量的限制,无法满足上临床对多个基因、多位点检测的需求。高通量
规范中国EGFR血液检测,推动肺癌精准治疗
近年来,随着医学诊断技术特别是分子诊断技术的不断提高,针对肺癌的新的驱动基因不断被发现,基于驱动基因的新型靶向药物不断涌现,肺癌精准治疗成为了关注的热点。在此背景下,《非小细胞肺癌(NSCLC)血液EGFR基因突变检测中国专家共识》于2015年12月8日在中华医学会会刊《中华医学杂志》上发表。该
Principles-of-Aseptic-Technique——4
P REPARATION OF THE SURGEONIn a laboratory setting, the extent of surgeon preparation will depend on the facilities and the need for strict attention
pcr电泳条带图的解读
前 言 基因的变异类型有多种,对应的分子检测方法亦有多种,当前资本市场驱动着分子检测市场,并极力追捧NGS技术,因为其通量高,灵敏度高且性价比高。小编承认NGS是分子检测的必然发展趋势,但是短时间内,NGS并不会取代其他分子检测方法,因为针对不同的需求,都有对应的理想检测方法,每个检测平台都有
全国ctDNA基因突变检测室间质量评价调查活动结果报告
二O一六年十一月,国家卫生计生委临床检验中心发布了2016年全国肿瘤游离DNA(ctDNA)基因突变检测室间质量评价调查活动结果报告。内容如下。 肿瘤游离DNA(ctDNA)基因突变检测对肿瘤靶向治疗、早期治疗应答评估和耐药监测的实时评估等都具有一定的临床应用价值。由于组织样本的局限性,临床上
PCR技术肿瘤检测市场又添重磅产品
目前,国内除了燃石医学和诺禾致源分别获批了NGS肿瘤检测试剂盒外,其余公司的肿瘤检测试剂盒均基于PCR技术和基因芯片,只要是由于PCR技术壁垒相对较低,国产化程度高。并且随着ddPCR技术的不断成熟,是PCR肿瘤检测试剂盒的应用更为广泛。 1.重磅产品 2018年8月24日,国家药品监督管理
PCR多基因联合检测再上新台阶!检测产品“艾惠健”获批
国家药品监督管理局(CFDA)批准厦门艾德生物医药科技股份有限公司(简称“艾德生物”,股票代码:300685)的新一代多基因联合检测试剂盒(商品名:艾惠健)上市,该试剂盒可检测肺癌EGFR、ALK、ROS1、KRAS、BRAF、HER-2、RET、MET、NRAS、PIK3CA等核心驱动基因,是
常用的分子生物学基本技术(三)
DNA序列分析(DNA sequencing) 应用各种突变检测技术检测到的基因突变,最后都需用序列分析才能确定突变类型及突变位置,其效率可以达到100%。现在的测序方法已与经典的方法有了很大的不同,其基本原理虽仍是双脱氧终止法,但自动化程度大为提高,操作更简便,测序时间也大大缩短。随着PCR技术与