使用重组的果蝇因子进行染色质装配实验
实验方法原理 实验材料 重组的 NAP－1纯化的果蝇核心组蛋白重组的 ACF质粒 DNA试剂、试剂盒 HEG 缓冲液KClPvOH PEG 溶液BSA 溶液MgCl2CaCl2重组的拓扑异构酶 Ⅰ 工作溶液缓冲液 R微球菌核酸酶储液 EDTARNase A糖原终止缓冲液 酚 氯仿 异戊醇乙醇仪器、耗材 27℃ 和 30℃ 水浴实验步骤 1. 实验前准备1.1 材料0.5～4.0 mg/ml 重组的 NAP－10.3～2. 0 mg/ml 纯化的果蝇核心组蛋白0.002～0.2 mg/ml 重组的 ACF1.2 试剂HEG 缓冲液300 mmol/L KCl（以 0.1～1 ml 分装，－20℃ 保存）PvOH/PEG 溶液2 mg/ml BSA 溶液（以 0.1～1 ml 分装，－20℃ 保存）0.5 mol/L ATP（以 0.1～1 ml 分装，－20℃ 保存）0.5 mol/L 磷酸肌酸5 mg/ml 肌酸激酶100 mm......阅读全文
使用重组的果蝇因子进行染色质装配实验
实验方法原理 实验材料 重组的 NAP－1纯化的果蝇核心组蛋白重组的 ACF质粒 DNA试剂、试剂盒 HEG 缓冲液KClPvOH PEG 溶液BSA 溶液MgCl2CaCl2重组的拓扑异构酶 Ⅰ 工作溶液缓冲液 R微球菌核酸酶储液 EDTARNase A糖原终止缓冲液 酚 氯仿 异戊醇乙醇仪器、耗
使用重组的果蝇因子进行染色质装配实验2
重组染色质装配反应中的核心组蛋白与 DNA 比率的滴定实验材料见基本方案试剂、试剂盒见基本方案仪器、耗材见基本方案实验步骤1. 按照基本方案 6 步骤 1～6 操作。要得到真实浓度的近似值，DNA 的浓度由 A260 值计算得到，组蛋白的浓度通过 BCA 分析系统来确定。2. 按如下所述进行 5 个
使用重组的果蝇因子进行染色质装配实验1
实验材料重组的 NAP－1纯化的果蝇核心组蛋白重组的 ACF质粒 DNA试剂、试剂盒HEG 缓冲液KClPvOH PEG 溶液BSA 溶液MgCl2CaCl2重组的拓扑异构酶 Ⅰ 工作溶液缓冲液 R微球菌核酸酶储液EDTARNase A糖原终止缓冲液酚 氯仿 异戊醇乙醇仪器、耗材27℃ 和 30℃
果蝇－S190－染色质重组抽提物的制备实验
实验方法原理 实验材料 0～6 h 果蜗胚胎试剂、试剂盒 脱色洗液胚胎洗液盐洗液缓冲液 RMgCl2 液氮仪器、耗材 细尼龙网玻璃烧杯锥形管玻璃棒塑料注射器真空吸气机Wheaton 杜恩斯匀浆器 Sorvall Superspeed 离心机Beckman 超速离心机实验步骤 1. 试剂准备：脱色洗液
果蝇－S190－染色质重组抽提物的制备实验
实验材料0～6 h 果蜗胚胎试剂、试剂盒脱色洗液胚胎洗液盐洗液缓冲液 RMgCl2液氮仪器、耗材细尼龙网玻璃烧杯锥形管玻璃棒塑料注射器真空吸气机Wheaton 杜恩斯匀浆器Sorvall Superspeed 离心机Beckman 超速离心机实验步骤1. 试剂准备：脱色洗液：50％（V/V）家用漂白
用－S190－抽提物进行染色质重组实验
实验方法原理 实验材料 S-190 抽提物核心组蛋白DNA模板试剂、试剂盒 缓冲液 RATP 混合物MgCl2CaCl2微球菌核酸酶储液EDTA Rnase A糖原终止缓冲液蛋白酶 K 酚 氯仿 异戊醇Tris· Cl乙酸铵乙醇琼脂糖凝胶TBE 缓冲液DNA 梯度仪器、耗材 水浴锅实验步骤 1. 实
用－S190－抽提物进行染色质重组实验
实验材料S-190 抽提物核心组蛋白DNA模板试剂、试剂盒缓冲液 RATP 混合物MgCl2CaCl2微球菌核酸酶储液EDTARnase A糖原终止缓冲液蛋白酶 K酚 氯仿 异戊醇Tris· Cl乙酸铵乙醇琼脂糖凝胶TBE 缓冲液DNA 梯度仪器、耗材水浴锅实验步骤1. 实验前准备1.1 材料S-1
果蝇的双因子实验
实验方法原理 自由组合定律的实质是基因的分离是独立的，而在配子中非等位基因自由组合，产生四种比例相同的配子。因此在杂种二代会出现四种表型，比例为9：3：3：1。这一实验是利用果蝇的两对相对性状：长翅与残翅、黑檀体与灰体且分别位于不同染色体上这一特征进行的长翅灰体×残翅黑檀体的双因子杂交实验，旨在验证
重组的果蝇－ACF－的表达和纯化实验
实验方法原理 实验材料 高滴度的 Acf1－FLAG 和 ISWI 杆状病毒储液晚对数期的悬浮培养的 Sf9 细胞试剂、试剂盒 公磷酸缓冲盐溶液（PBS）裂解缓冲液 FFLAG-M2 树脂 1：1（V V）悬浮液（Sigma－Aldrich）稀释缓冲液 F洗涤缓冲液 F洗脱缓冲液 F液氮牛血清白蛋白
重组的果蝇－ACF－的表达和纯化实验
实验材料高滴度的 Acf1－FLAG 和 ISWI 杆状病毒储液晚对数期的悬浮培养的 Sf9 细胞试剂、试剂盒公磷酸缓冲盐溶液（PBS）裂解缓冲液 FFLAG-M2 树脂 1：1（V V）悬浮液（Sigma－Aldrich）稀释缓冲液 F洗涤缓冲液 F洗脱缓冲液 F液氮牛血清白蛋白 （BSA） 标准
果蝇单因子杂交实验（图）
根据孟德尔的颗粒遗传学理论，基因是一个独立的结构与功能单位．在杂合状态时不发生混淆，完整地从一代传递到下一代．由该基因的显隐性决定其在下一代的性状表现。单因子杂交是指一对等位基因间的杂交。孟德尔第一定律指出，一对杂合状态的等位基因保持相对的独立性，其自交后代中表型分离比为 3 ： l 。本实验将观察
重组的果蝇－NAP－1－的表达和纯化实验
实验方法原理 实验材料 晚对数期的悬浮培养的SFP细胞试剂、试剂盒 高滴度的 His－NAP－1 杆状病毒储液（Orbigen）磷酸缓冲盐溶液（PBS）裂解缓冲液 H洗涤缓冲液 H洗脱缓冲液 HHEGD 缓冲液NAP－1 纯化缓冲液 Ni－NTA牛血清白蛋白（BSA）标准 乙醇液氮仪器、耗材 离心机
染色质重组的意义
染色质重组过程中，核小体滑动可能是一种重要机制，它不改变核小体结构，但改变核小体与DNA 的结合位置。实验证明，这种滑动能被核小体上游的“十字形”结构阻断。但“滑动”机制并不能解释所有实验现象。人们推测，在重组过程中，还有其他机制如核小体可能与DNA 分离，然后核小体经过重排，结构变化后，与DNA
重组的果蝇－NAP－1－的表达和纯化实验1
实验材料晚对数期的悬浮培养的SFP细胞试剂、试剂盒高滴度的 His－NAP－1 杆状病毒储液（Orbigen）磷酸缓冲盐溶液（PBS）裂解缓冲液 H洗涤缓冲液 H洗脱缓冲液 HHEGD 缓冲液NAP－1 纯化缓冲液 Ni－NTA牛血清白蛋白（BSA）标准乙醇液氮仪器、耗材离心机Wheaton 杜恩斯
重组的果蝇－NAP－1－的表达和纯化实验2
实验材料见基本方案试剂、试剂盒见基本方案咪唑的 Superflow 层析缓冲液仪器、耗材见基本方案NTA Superflow 树脂（Qiagen）FPLC 柱实验步骤1. 实验前准备主要材料见基本方案附加材料含有 20 mmol/L 和 500 mool/L 咪唑的 Superflow 层析缓冲液N
研究发现染色质装配因子1具有重要表观遗传调控作用
中国科学院生物物理研究所焦仁杰研究员课题组最新研究发现，染色质装配因子 1（chromatin assembly factor 1, CAF-1）对异染色质区域的基因表达发挥十分重要的表观遗传调控作用。他们的成果已被细胞生物学研究领域的专业期刊J. Cell Sci.接受发表。
果蝇的双因子实验——正反交法
通过实验正确理解分离定律的实质，掌握果蝇的杂交技术，并学会记录交配结果和掌握统计处理方法。来源：《遗传学实验教程》实验方法原理自由组合定律的实质是基因的分离是独立的，而在配子中非等位基因自由组合，产生四种比例相同的配子。因此在杂种二代会出现四种表型，比例为9：3：3：1。这一实验是利用果蝇的两对相对
果蝇实验技术
一、实验原理 果蝇（fruit fly）是双翅目（Diptera）昆虫，属果蝇属（genus Drosophila），约有2500个种。通常用作遗传学实验材料的是黑腹果蝇（Drosophila melanogaster）。果蝇优点： 1. 饲养容易。在常温下，以玉米粉等作饲料就可以生长，繁殖。 2.
果蝇细胞中发现五种主要染色质类型
该发现构成了描述表观基因组的新框架荷兰科学家在果蝇细胞中发现五种主要染色质类型 转录活性常染色质与受阻遏异染色质的染色质传统分类曾是一个有用的模型，但它应该进行升级，以适应人们日益增加的有关染色质功能域的知识。一项在果蝇中对与蛋白质有关的53种染色质进行的大规模综合性全基
生物物理所揭示染色质组装因子CAF1介导核小体装配的结构基础
在真核细胞分裂过程中，染色质结构的重新建立对于维持基因组完整性和表观遗传信息传递至关重要。DNA复制一方面破坏母链DNA的亲本核小体，另一方面新生核小体必须在DNA子链上重建。染色质组装因子CAF-1是在进化过程中保守的异源三聚体组蛋白伴侣复合物，负责将新合成的H3-H4组蛋白装配到子链DNA上，完
中国科学家揭示染色质组装因子CAF1介导核小体装配的结构基础
原文地址：http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/8/507585.shtm8月25日，中国科学院生物物理研究所许瑞明课题组联合该所李国红、朱冰课题组，在国际学术期刊《科学》杂志发表论文，揭示染色质组装因子CAF-1介导核小体装配的结构基础。在真核细胞分裂过程
染色质组装因子的概念
中文名称染色质组装因子1英文名称chromatin assembly factor-1;CAF-1定 义与新生DNA链结合，特异地识别组蛋白H3和H4及H3/H4组成的四聚体。定位结合于复制叉之后，可增加H3/H4四聚体的稳定性。需经磷酸化后才有活性，其缺失将严重影响细胞周期进程，使其阻滞在S期。
果蝇数量性状实验
【实验目的】1、以果蝇（Drosophila melanogaster）腹片着生的小刚毛为对象，研究数量性状遗传的特点。2、学习估算遗传（heritability）【实验原理】在生物中凡是可数、可度、可衡等并可用数字形式描述的性状，称数量性状（quantitative character）。数量性状
果蝇数量性状实验
【实验目的】1、以果蝇（Drosophila melanogaster）腹片着生的小刚毛为对象，研究数量性状遗传的特点。2、学习估算遗传（heritability）【实验原理】在生物中凡是可数、可度、可衡等并可用数字形式描述的性状，称数量性状（quantitative character）。数量性状
果蝇数量性状实验
【实验目的】1、以果蝇（Drosophila melanogaster）腹片着生的小刚毛为对象，研究数量性状遗传的特点。2、学习估算遗传（heritability）【实验原理】在生物中凡是可数、可度、可衡等并可用数字形式描述的性状，称数量性状（quantitative character）。数量性状
果蝇数量性状实验
【实验目的】 1、以果蝇（Drosophila melanogaster）腹片着生的小刚毛为对象，研究数量性状遗传的特点。 2、学习估算遗传（heritability）【实验原理】 在生物中凡是可数、可度、可衡等并可用数字形式描述的性状，称数量性状（quantitative character）
果蝇数量性状实验
【实验目的】1、以果蝇（Drosophila melanogaster）腹片着生的小刚毛为对象，研究数量性状遗传的特点。2、学习估算遗传（heritability）【实验原理】在生物中凡是可数、可度、可衡等并可用数字形式描述的性状，称数量性状（quantitative character）。数量性状
重组细胞因子的要求
1. 真实性：重组蛋白产品一致经过N末端氨基酸序列分析；必要时应用SDS-PAGE, RP-HPLC和质谱(MS)检测其真实性。2. 纯度：应用SDS-PAGE和RP-HPLC方法分析产品纯度。3. 生物活性：进行相应的体外(in vitro)或体内(in vivo)活性检测。4. 蛋白含量：通过紫
重组细胞因子的状态
市场上主流的重组蛋白产品，多在不含载体蛋白或其他添加物(如BSA、HAS、蔗糖等)的条件下，以低盐的形式做冻干处理，因此微量(多以微克计量)的细胞因子在冻干过程中会沉积于管内，形成很薄或不可见的蛋白层，所以建议在收到试剂后，务必于开盖前先离心20-30秒，使可能附于管盖或管壁的蛋白成分聚集于冻干馆的
果蝇的双因子杂交材料、原理和步骤
一、实验目的：通过两对性状个体杂交，观察F2的分离现象及其比例，了解两对非等位基因间的自由组合。同时掌握果蝇的杂交技术，并学会记录交配结果和掌握统计处理方法。 二、实验材料： 灰体残翅 EEvgvg 黑檀体长翅 eeVgVg 三、实验原理： 果蝇的灰体基因（E）