重组的果蝇ACF的表达和纯化实验

实验材料高滴度的 Acf1-FLAG 和 ISWI 杆状病毒储液晚对数期的悬浮培养的 Sf9 细胞试剂、试剂盒公磷酸缓冲盐溶液(PBS)裂解缓冲液 FFLAG-M2 树脂 1:1(V V)悬浮液(Sigma-Aldrich)稀释缓冲液 F洗涤缓冲液 F洗脱缓冲液 F液氮牛血清白蛋白 (BSA) 标准仪器、耗材锥形离心瓶Wheaton 杜恩斯匀浆器A 型研磨棒Sorvall Superspeed 离心机实验步骤1. 杆状病毒储液在感染前扩增几天。为扩增病毒,Sf9 细胞以 2×107 细胞/皿植于 150 培养皿上,加入适当的有血清的培养液至25 ml, 并且以感染重数(MOD 为 0.1~0.5(每盘细胞加入 10~20 ul 病毒悬液)进行感染。为了获得病毒的储液储存,感染 60 h 并在无菌条件下收集培养液上清。对于高滴度的储液(将进一步用于表达感染),感染可以进行到细胞发生裂解为止(His-NAP-1 病毒约 7......阅读全文

重组的果蝇-ACF-的表达和纯化实验

实验材料高滴度的 Acf1-FLAG 和 ISWI 杆状病毒储液晚对数期的悬浮培养的 Sf9 细胞试剂、试剂盒公磷酸缓冲盐溶液(PBS)裂解缓冲液 FFLAG-M2 树脂 1:1(V V)悬浮液(Sigma-Aldrich)稀释缓冲液 F洗涤缓冲液 F洗脱缓冲液 F液氮牛血清白蛋白 (BSA) 标准

重组的果蝇-ACF-的表达和纯化实验

实验方法原理 实验材料 高滴度的 Acf1-FLAG 和 ISWI 杆状病毒储液晚对数期的悬浮培养的 Sf9 细胞试剂、试剂盒 公磷酸缓冲盐溶液(PBS)裂解缓冲液 FFLAG-M2 树脂 1:1(V V)悬浮液(Sigma-Aldrich)稀释缓冲液 F洗涤缓冲液 F洗脱缓冲液 F液氮牛血清白蛋白

重组的果蝇-NAP-1-的表达和纯化实验

实验方法原理 实验材料 晚对数期的悬浮培养的SFP细胞试剂、试剂盒 高滴度的 His-NAP-1 杆状病毒储液(Orbigen)磷酸缓冲盐溶液(PBS)裂解缓冲液 H洗涤缓冲液 H洗脱缓冲液 HHEGD 缓冲液NAP-1 纯化缓冲液 Ni-NTA牛血清白蛋白(BSA)标准 乙醇液氮仪器、耗材 离心机

使用重组的果蝇因子进行染色质装配实验

实验方法原理 实验材料 重组的 NAP-1纯化的果蝇核心组蛋白重组的 ACF质粒 DNA试剂、试剂盒 HEG 缓冲液KClPvOH PEG 溶液BSA 溶液MgCl2CaCl2重组的拓扑异构酶 Ⅰ 工作溶液缓冲液 R微球菌核酸酶储液 EDTARNase A糖原终止缓冲液 酚 氯仿 异戊醇乙醇仪器、耗

重组的果蝇-NAP-1-的表达和纯化实验2

实验材料见基本方案试剂、试剂盒见基本方案咪唑的 Superflow 层析缓冲液仪器、耗材见基本方案NTA Superflow 树脂(Qiagen)FPLC 柱实验步骤1. 实验前准备主要材料见基本方案附加材料含有 20 mmol/L 和 500 mool/L 咪唑的 Superflow 层析缓冲液N

重组的果蝇-NAP-1-的表达和纯化实验1

实验材料晚对数期的悬浮培养的SFP细胞试剂、试剂盒高滴度的 His-NAP-1 杆状病毒储液(Orbigen)磷酸缓冲盐溶液(PBS)裂解缓冲液 H洗涤缓冲液 H洗脱缓冲液 HHEGD 缓冲液NAP-1 纯化缓冲液 Ni-NTA牛血清白蛋白(BSA)标准乙醇液氮仪器、耗材离心机Wheaton 杜恩斯

使用重组的果蝇因子进行染色质装配实验1

实验材料重组的 NAP-1纯化的果蝇核心组蛋白重组的 ACF质粒 DNA试剂、试剂盒HEG 缓冲液KClPvOH PEG 溶液BSA 溶液MgCl2CaCl2重组的拓扑异构酶 Ⅰ 工作溶液缓冲液 R微球菌核酸酶储液EDTARNase A糖原终止缓冲液酚 氯仿 异戊醇乙醇仪器、耗材27℃ 和 30℃

使用重组的果蝇因子进行染色质装配实验2

重组染色质装配反应中的核心组蛋白与 DNA 比率的滴定实验材料见基本方案试剂、试剂盒见基本方案仪器、耗材见基本方案实验步骤1. 按照基本方案 6 步骤 1~6 操作。要得到真实浓度的近似值,DNA 的浓度由 A260 值计算得到,组蛋白的浓度通过 BCA 分析系统来确定。2. 按如下所述进行 5 个

果蝇-S190-染色质重组抽提物的制备实验

实验方法原理 实验材料 0~6 h 果蜗胚胎试剂、试剂盒 脱色洗液胚胎洗液盐洗液缓冲液 RMgCl2 液氮仪器、耗材 细尼龙网玻璃烧杯锥形管玻璃棒塑料注射器真空吸气机Wheaton 杜恩斯匀浆器 Sorvall Superspeed 离心机Beckman 超速离心机实验步骤 1. 试剂准备:脱色洗液

果蝇-S190-染色质重组抽提物的制备实验

实验材料0~6 h 果蜗胚胎试剂、试剂盒脱色洗液胚胎洗液盐洗液缓冲液 RMgCl2液氮仪器、耗材细尼龙网玻璃烧杯锥形管玻璃棒塑料注射器真空吸气机Wheaton 杜恩斯匀浆器Sorvall Superspeed 离心机Beckman 超速离心机实验步骤1. 试剂准备:脱色洗液:50%(V/V)家用漂白

果蝇实验技术

一、实验原理 果蝇(fruit fly)是双翅目(Diptera)昆虫,属果蝇属(genus Drosophila),约有2500个种。通常用作遗传学实验材料的是黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)。果蝇优点: 1. 饲养容易。在常温下,以玉米粉等作饲料就可以生长,繁殖。 2.

首款无血浆组分的造血干细胞培养基上市

  STEMCELL Technologies公司近日推出了StemSpan™ ACF,一款新的无动物来源成分、化学限定的造血干细胞培养基,它不含动物或人类血浆来源的组分。尽管无血清培养基上市已久,但这是第一款不含有动物和人类蛋白,只含有重组和合成组分的完整培养基,用于造血干细胞的培养和扩增。

果蝇的伴性遗传

实验概要1、正确认识伴性遗传的正、反交的差别,进一步认识伴性遗传的特点。  2、记录杂交结果,掌握统计处理方法。实验原理位于性染色体上的基因叫作伴性基因,其遗传方式与位于常染色体上的基因有一定差别,它在亲代与子代之间的传递方式与雌雄性别有关,伴性基因的这种遗传方式称为伴性遗传(sex-linked

果蝇数量性状实验

【实验目的】1、以果蝇(Drosophila melanogaster)腹片着生的小刚毛为对象,研究数量性状遗传的特点。2、学习估算遗传(heritability)【实验原理】在生物中凡是可数、可度、可衡等并可用数字形式描述的性状,称数量性状(quantitative character)。数量性状

果蝇数量性状实验

【实验目的】1、以果蝇(Drosophila melanogaster)腹片着生的小刚毛为对象,研究数量性状遗传的特点。2、学习估算遗传(heritability)【实验原理】在生物中凡是可数、可度、可衡等并可用数字形式描述的性状,称数量性状(quantitative character)。数量性状

果蝇数量性状实验

【实验目的】1、以果蝇(Drosophila melanogaster)腹片着生的小刚毛为对象,研究数量性状遗传的特点。2、学习估算遗传(heritability)【实验原理】在生物中凡是可数、可度、可衡等并可用数字形式描述的性状,称数量性状(quantitative character)。数量性状

果蝇数量性状实验

【实验目的】1、以果蝇(Drosophila melanogaster)腹片着生的小刚毛为对象,研究数量性状遗传的特点。2、学习估算遗传(heritability)【实验原理】在生物中凡是可数、可度、可衡等并可用数字形式描述的性状,称数量性状(quantitative character)。数量性状

果蝇数量性状实验

【实验目的】 1、以果蝇(Drosophila melanogaster)腹片着生的小刚毛为对象,研究数量性状遗传的特点。 2、学习估算遗传(heritability)【实验原理】   在生物中凡是可数、可度、可衡等并可用数字形式描述的性状,称数量性状(quantitative character)

果蝇做菜你敢吃吗?以色列推出果蝇蛋白粉

  蛋白质是最重要也是最贵的营养物质之一。以色列一家初创企业表示,果蝇幼虫可以生产出大量既经济又安全的蛋白质。  从营养学的角度来看,果蝇幼虫富含蛋白质、钙、铁、镁等营养要素,而且不含胆固醇,是一种非常健康的食材。另外果蝇还具有培养周期短、速度快的特点,与其他昆虫相比,果蝇的饲养成本也十分低廉。  

果蝇的伴性遗传实验

实验方法原理 果蝇的红眼与白眼是一对由性染色体上的基因控制的相对性状。用红眼雌果蝇与白眼雄果蝇交配,F1代雌雄均为红眼果蝇,F1代相互交配,F2代则雌性均为红眼,雄性红眼:白眼=1:1;相反用白眼雌果蝇与红眼雄果蝇交配,F1代雌性均为红眼,,雄性都是白眼,F1相互交配得F2代,雌蝇红眼与白眼比例为1

果蝇培养基的制作

一、实验目的 掌握果蝇培养基的配制方法。二、实验原理 果蝇在水果摊或果园里常可见到,但它不是以水果为生,而是吃生长在水果上的酵母菌,因此,凡能发酵的基质都可以作为果蝇的饲料。常用的饲料有玉米饲料、米粉饲料、香蕉饲料等。三、实验器具与药品 高压灭菌锅, 电子天平 ,微波炉,培养管,搪瓷缸,纱布、药棉,

果蝇白眼突变基因的克隆

【实验目的】掌握T克隆的原理和方法。了解质粒提取的原理和方法。【实验原理】外源DNA与载体分子的连接就是DNA重组,这样重新组合的DNA叫做重组体或重组子。重组的DNA分子是在DNA 连接酶的作用下,有Mg2+ 、ATP存在的连接缓冲系统中,将载体分子与外源DNA分子进行连接。Taq DNA

癌症、果蝇与EGFR的关系

  癌症和果蝇的腿有什么共同之处?你可能一时半会儿回答不上来。答案是它们都受到同一种分子的调控。这种蛋白质几乎存在于地球上的每一种生物中,它就是表皮生长因子受体(EGFR)。  如今,哥伦比亚大学的神经科学家确定了EGFR在动物胚胎发育过程中的各种作用,从四肢发育到癌症增殖。这项新成果发表在《PLO

果蝇的双因子实验

实验方法原理 自由组合定律的实质是基因的分离是独立的,而在配子中非等位基因自由组合,产生四种比例相同的配子。因此在杂种二代会出现四种表型,比例为9:3:3:1。这一实验是利用果蝇的两对相对性状:长翅与残翅、黑檀体与灰体且分别位于不同染色体上这一特征进行的长翅灰体×残翅黑檀体的双因子杂交实验,旨在验证

果蝇:-人类的远房“小表弟”

  当我们辛勤忙碌了一整天回到家中,在厨房准备开火,却看见几只个头矮小的果蝇们也在忙碌着觅食,它们已经在我们的厨房组建家庭,结婚生子。尽管你看到厨房里美味的香蕉上沾满了果蝇们的足迹,会心生厌烦,非常想杀之而后快,可你不知道的是这小小的果蝇也为人类做出了不少贡献,最近一项研究还发现,果蝇可能与人类存在

关于DNA重组的重组修复介绍

  有丝分裂和减数分裂期间由各种外源因子(例如紫外线,X射线,化学交联剂)引起的DNA损伤都可以通过同源重组修复机制(HRR)来修复。  人类和啮齿动物中减数分裂期间HRR所必需的基因产物的缺陷会导致不育 。人类HRR所必需的基因产物(例如BRCA1和BRCA2)的缺陷同时会增加患癌症的风险。在细菌

关于基因重组的自然重组的介绍

  自然界不同物种或个体之间的基因转移和重组是经常发生的,它是基因变异和物种进化的基础。自然界的基因转移的方式有:  接合作用:当细胞与细胞、或细菌通过菌毛相互接触时,质粒DNA就可从一个细胞(细菌)转移至另一细胞(细菌),这种类型的DNA转移称为接合作用(conjugation )。  转化作用(

疫苗生产降血清细胞培养工艺优化方案

随着国家药品监督管理部门对药品生产监管力度越来越大,生物制药和疫苗生产企业对产品安全性管理要求越来越高,在疫苗生产过程中采用无动物源成份的原辅料是日益增长的要求趋势,但目前,绝大部分疫苗生产还离不开细胞培养过程中血清成份的添加,但使用血清,必须面对血清带来的系列问题和缺点: 1.批间差较大:每批血清

果蝇也会“触景伤身”

原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/6/502849.shtm

果蝇体内发现瘦素

    当谈到脂肪,果蝇比你想象的更像人类。   研究人员已经发现,这种昆虫能够大量炮制一种名为瘦素的激素——类似的激素在人体中能够有助于控制食欲和新陈代谢。  瘦素的发现在研究人员中引起了强烈的兴趣——在此之前,他们认为只有脊椎动物才能够分泌瘦素。这一发现为更好地了解瘦素的功效敞开