知识分享：教你辨析标记基因和报告基因
一、标记基因和报告基因的概念 标记基因(marker gene)，是一种已知功能或已知序列的基因，能够起着特异性标记的作用。标记基因是选择标记基因的简称，是指其编码产物能够使转化的细胞、组织具有对抗生素等的抗性，或者使转化细胞、组织具有代谢的优越性。在培养基中加入抗生素等选择试剂的条件下，非转化的细胞死亡或生长受到抑制，而转化的细胞能够继续存活，从而将转化的细胞、组织从大量的细胞或组织中筛选出来的一类基因。在基因工程意义上来说，它是重组DNA载体的重要标记，通常用来检验转化成功与否；在基因定位意义上来说，它是对目的基因进行标志的工具，通常用来检测目的基因在细胞中的定位。 报告基因(reporter gene)，是指其编码产物能够被快速地测定，常用来判断外源基因是否已经成功地导入受体细胞、组织或器官，并检测其表达活性的一类特殊用途的基因，主要用于判断目的基因是否成功导入到受体细胞，并在其中表达。故当报告基因......阅读全文
报告基因实验——MUG－荧光分析
实验材料组织提取物试剂、试剂盒GUS 缓冲液MUG仪器、耗材96 孔板数显荧光计实验步骤1. 分别取 25 ul 和 50 ul 组织提取物样品于 96 孔板中（黑色或者白色），包括未转化的对照组织，加 GUS 缓冲液至总体积为 200 ul，混匀。2. 加入 100 μl 含 2.5 mg/ml
报告基因分类及优缺点
报告基因（reporter gene）是一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因，其表达产物非常容易被鉴定。把它的编码序列和基因调节序列相融合，在调控序列控制下进行表达，从而利用它的表达产物来标定目的基因的表达调控。作为报告基因必须具备的条件：（1）全序列已测定（2）表达产物在手提细胞中不存在，即无背景，
腹痛用药辨析
腹痛原因很多，部位上有少腹、小腹、大腹之别。痛在脐上，病多属脾；痛在脐两侧及少腹，病多在肝；痛在脐下，病多属肾；胀痛多气滞，刺痛多血瘀，冷痛为寒，灼痛多热，隐痛多虚等。临证用药多有不同，当细辨析。 香附、川楝子止腹痛，以肝气郁滞腹痛为用，多用于少腹胀痛。然香附性微温以寒证为宜，兼入血分；川
咳嗽用药辨析
经云：“五脏六腑皆令人咳，非独肺也。”但临床中咳嗽就其病因多与肺有关，临证用药也多以清肺、补肺、肃肺、敛肺、温肺之品治之。 桑叶、菊花，疏风热而清肺热，桑叶较菊花性寒而止咳之功也强。 紫菀、款冬花有祛痰之功，治疗咳嗽痰中带血用之，其性温而不热，质润不燥，新久咳嗽兼宜，然款冬花止咳之功
转基因植物Gus报告基因的检测
一、原理Gus (b-glucuronidase)基因作为一种报告基因，在植物遗传转化研究中有广泛的用途。Gus基因来自于大肠杆菌，编码b－葡聚糖苷酶（一种水解酶），可催化底物5－溴－4－氯－3－吲哚葡聚糖醛酸苷（5－bromo-4-chloro-3-indolyl-glucronide，缩写为
德国Fevik菲维科分享冻干机知识
真空冷冻干燥是将含水物质先冻结成固态，然后使其中的水份从固态升华成气态，从而除去水份而保存物质的方法。 一、冻干机系统 1. 控制系统 控制系统有可编程程序控制器、触摸屏、外围继电器、传感器等组成。 2. 制冷系统 制冷系统由制冷压缩机及辅助设施构成，为干燥箱和冷阱
知识分享：稳转株的制备
实验原理： 利用哺乳动物系统生产蛋白的方式有两种：瞬时转染和稳转株筛选。通过稳定细胞系构建筛选稳定表达细胞株。针对瞬时转染，外源基因在短时间转录翻译得到的蛋白量较少，能够满足小量蛋白制备，大量生产成本很高。相对于此，稳定转染的是将外源基因整合到细胞自身的基因组上，随着细胞的生长分裂外源基因
电源滤波器综合知识分享
在整流电路输出的电压是单向脉动性电压，不能直接给电子电路使用。所以要对输出的电压进行滤波，消除电压中的交流成分，成为直流电后给电子电路使用。在滤波电路中，主要使用对交流电有特殊阻抗特性的器件，如：电容器、电感器。本文对其各种形式的滤波电路进行分析。一、滤波电路种类滤波电路主要有下列几种：电容滤波电路
知识分享：AAV在肺部的应用
腺相关病毒（AAV）属于依赖病毒属，细小病毒亚科，是一类自然缺陷的单链DNA病毒。野生型AAV基因组约4.7kb，含有rep和cap基因以及两端的ITR序列。尽管人类对AAV易感，但临床还并未发现与AAV相关的疾病。根据AAV衣壳蛋白基因的变异，可将AAV分为不同的血清型。不同血清型的AAV具有不同
分享移液器的日常维护保养知识
移液器是生物、药物、化学等行业科研工作者每天都使用的工具，除了正确使用移液器，日常维护保养也十分重要： 1.维护 (1)移液器不用时,应在专用支架上竖直放置。 (2)每天使用前,应检查移液器外表面是否有灰尘和污物,要注意移液器的嘴锥处,只能用70%的酒精溶液清洁。
密度计的小知识分享
1.密度计应满足的技术条件： a.光源的辐射函数（相对辐射分布）s（λ）； b.传感器的相对光谱灵敏度s（λ）r； c.滤光片的光谱透射率τ（λ）； d.测量的几何条件和测量块的大小； e.读数的精确性和显示的线性； f.被测样本的光谱反射参数；
知识分享：细胞传代、培养的方法
实验原理： 将动物机体的各种组织从机体中取出，经各种酶（常用胰蛋白酶）、螯合剂（常用EDTA）或机械方法处理，分散成单细胞，置合适的培养基中培养，使细胞得以生存、生长和繁殖，这一过程称原代培养。 细胞在培养瓶长成致密单层后，已基本上饱和，为使细胞能继续生长，同时 也将细胞数量扩大，就
德国Fevik菲维科分享冻干机知识
真空冷冻干燥是将含水物质先冻结成固态，然后使其中的水份从固态升华成气态，从而除去水份而保存物质的方法。 一、冻干机系统 1. 控制系统 控制系统有可编程程序控制器、触摸屏、外围继电器、传感器等组成。 2. 制冷系统 制冷系统由制冷压缩机及辅助设施构成，为干燥箱和冷阱
知识分享：变性梯度凝胶电泳
实验原理 DNA 双链分子在全长不断增加温度或用化学变性剂条件处理下，两条链就会开始分开（即解链）。首先解链的区域由解链温度较低的碱基组成。GC碱基对比AT碱基对结合得要牢固，因此GC含量高的区域具有较高的解链温度。同时影响解链温度的因素还有相邻碱基间的吸引力。解链温度低的区域，通常位于端
密度计的小知识分享
1.密度计应满足的技术条件： a.光源的辐射函数（相对辐射分布）s（λ）； b.传感器的相对光谱灵敏度s（λ）r； c.滤光片的光谱透射率τ（λ）； d.测量的几何条件和测量块的大小； e.读数的性和显示的线性； f.被测样本的光谱反射参数； g.定标板的光
知识分享：细胞自噬研究详解
一、自噬简介 1、大自噬（macroautophagy），也就是通常说的自噬（autophagy），是真核细胞蛋白降解的途径之一。自噬可以被描述为细胞质内的成分（细胞器、蛋白等）被双层膜的囊泡包裹，形成自噬体（autophagosome），进而传递到溶酶体进行降解的过程。 详
分享移液器的日常维护保养知识
1.维护 (1)移液器不用时,应在支架上竖直放置。 (2)每天使用前,应检查移液器外表面是否有灰尘和污物,要注意移液器的嘴锥处,只能用70%的酒精溶液清洁。 (3)如液体不小心进入活塞室应及时清除污染物。 (4)根据使用频率,所有的移液器应定期用肥皂水清洗,或用60%的异丙醇消毒,
知识分享：光遗传学技术
光遗传学（optogenetics）又称光刺激基因工程（optical stimulation plus genetic engineering），是一种通过光学和遗传学技术在活体动物脑内精准控制细胞行为的技术。由于其高度的时空特异性，光遗传技术广泛应用于神经科学领域的研究。 2010
知识分享：Teton表达调控系统
1992年Goseen等人成功的利用原核基因调控元件构建了四环素（tetracycline,Tet）真核细胞基因调控表达系统。目前，此系统已被广泛应用于基因功能和基因治疗领域的研究。 1、四环素调控表达系统的基本原理 Tet调控表达系统通过诱导药物（如Tet）改变调控蛋白的构
双荧光素酶报告基因测试
在用萤火虫荧光素酶定量基因表达时 ，通常采用第二个报告基因来减少实验的变化因素。但传统的共报告基因（比如CAT，β-Gal，GUS）不够便利。因为各自的测试化学，处理要求，检测特点存在差异。Promega提供一种先进的双报告基因技术，结合了萤火虫荧光素酶测试和海洋腔肠荧光素酶测试。双荧光素酶报告基因
双萤光素酶报告基因检测
萤光素酶报告基因系统广泛应用于真核生物基因表达和细胞生理学研究，包括受体活性、转录因子、细胞信号转导、mRNA加工和蛋白质折叠等。萤光素酶是理想的报告基因，因为哺乳动物细胞中不含内源性萤光素酶，一旦转录完成立刻就生成功能性的萤光素酶。单萤光素酶报告基因实验往往会受到各种实验条件的影响，而双萤光素
白度测定仪的保养和使用知识点分享
白度测定仪是制粉行业必不可少的仪器之一，通过测定面粉的白度为评价面粉质量提供参考。为了帮助大家更准确的测定面粉白度，小编今天为大家整理了一些关于该仪器的知识要点。第一是仪器的保养，正确方法如下：①白度测定仪随机工作标准白板，应定期送上级计量单位或行业测试中心站核准，每年一次。如果受到污染，经清洗后
荧光素酶报告基因的应用原理
应用原理转录因子是一种具有特殊结构、行使调控基因表达功能的蛋白质分子，也称为反式作用因子。某些转录因子仅与其靶启动子中的特异序列结合，这些特异性的序列被称为顺式作用元件，转录因子的DNA结合域和顺式作用元件实现共价结合，从而对基因的表达起抑制或增强的作用。荧光素酶报告基因实验（luciferase
荧光素酶报告基因的技术流程
启动子的预测转录因子的预测报告基因质粒的构建实验方法及结果分析 用生物信息学方法分析并预测启动子区可能的转录因子结合位点。设计引物用PCR法从基因组DNA中克隆所需的靶启动子片段，将此片段插入到荧光素酶报告基因质粒（pGL3-basic）中。筛选阳性克隆，测序。扩增克隆并提纯质粒备用。扩增转录因子质
荧光素酶报告基因的应用原理
应用原理转录因子是一种具有特殊结构、行使调控基因表达功能的蛋白质分子，也称为反式作用因子。某些转录因子仅与其靶启动子中的特异序列结合，这些特异性的序列被称为顺式作用元件，转录因子的DNA结合域和顺式作用元件实现共价结合，从而对基因的表达起抑制或增强的作用。荧光素酶报告基因实验（luciferase
荧光素酶报告基因的应用原理
应用原理转录因子是一种具有特殊结构、行使调控基因表达功能的蛋白质分子，也称为反式作用因子。某些转录因子仅与其靶启动子中的特异序列结合，这些特异性的序列被称为顺式作用元件，转录因子的DNA结合域和顺式作用元件实现共价结合，从而对基因的表达起抑制或增强的作用。荧光素酶报告基因实验（luciferase
荧光素酶报告基因的技术流程
（1） 用生物信息学方法分析并预测启动子区可能的转录因子结合位点。（2）设计引物用PCR法从基因组DNA中克隆所需的靶启动子片段，将此片段插入到荧光素酶报告基因质粒（pGL3-basic）中。（3）筛选阳性克隆，测序。扩增克隆并提纯质粒备用。（4） 扩增转录因子质粒，提纯备用。同时准备相应的空载质粒
荧光素酶报告基因的应用原理
应用原理转录因子是一种具有特殊结构、行使调控基因表达功能的蛋白质分子，也称为反式作用因子。某些转录因子仅与其靶启动子中的特异序列结合，这些特异性的序列被称为顺式作用元件，转录因子的DNA结合域和顺式作用元件实现共价结合，从而对基因的表达起抑制或增强的作用。荧光素酶报告基因实验（luciferase
荧光素酶报告基因的应用原理
应用原理转录因子是一种具有特殊结构、行使调控基因表达功能的蛋白质分子，也称为反式作用因子。某些转录因子仅与其靶启动子中的特异序列结合，这些特异性的序列被称为顺式作用元件，转录因子的DNA结合域和顺式作用元件实现共价结合，从而对基因的表达起抑制或增强的作用。荧光素酶报告基因实验（luciferase
转染实验常用的报告基因（植物、动物）
报告基因(reporter gene)是一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因，是一个其表达产物非常容易被鉴定的基因。把它的编码序列和基因表达调节序列相融合形成嵌合基因，或与其 它目的基因相融合，在调控序列控制下进行表达，从而利用它的表达产物来标定目的基因的表达调控，筛选得到转化体。