双萤光素酶报告基因检测
萤光素酶报告基因系统广泛应用于真核生物基因表达和细胞生理学研究,包括受体活性、转录因子、细胞信号转导、mRNA加工和蛋白质折叠等。萤光素酶是理想的报告基因,因为哺乳动物细胞中不含内源性萤光素酶,一旦转录完成立刻就生成功能性的萤光素酶。单萤光素酶报告基因实验往往会受到各种实验条件的影响,而双萤光素酶报告基因通常被用来提高实验精确度,即在一个系统中同时表达和测量两个独立的报告基因。一般来说,实验组报告基因与具体实验条件的影响是相关的,而共同转染的内对照组报告基因则是用来充当校正参数,作为内参提供反应基线。将实验组的结果与内对照组的结果进行约化处理,可降低由细胞存活率或转染效率的差异而导致的结果波动,同时还可消除由取样体积、细胞裂解效率和仪器测定引起的实验误差。因此,双报告基因检测可以通过减少外部影响来获得更可靠的实验数据。 美仑双萤光素酶报告基因检测试剂盒(Meilunbio®Firefly&Renilla Lucif......阅读全文
萤光素酶的应用
萤光素酶可以在实验室中用基因工程的方法生成,并被用于多种不同的实验。萤光素酶的基因可以被合成并插入到生物体中或转染到细胞中。研究者利用基因工程已经使得小鼠、家蚕、马铃薯等一些生物可以合成萤光素酶。间接体外成像是一种强大的研究手段,可以对整个动物体中的细胞群落进行分析:将不同类型的细胞(骨髓干细胞、T
NanoLuc™萤光素酶技术
NanoLuc™萤光素酶是Promega公司推出一种新型的萤光素酶,它具有分子量更小(19.1kDa, 171个氨基酸),发光更亮,比任何现有的生物发光酶用途更加广泛的特点,它是目前性能最好的生物发光报告基因之一。NanoLuc™萤光素酶的这些属性为报
NanoLuc™萤光素酶技术
NanoLuc™萤光素酶是Promega公司推出一种新型的萤光素酶,它具有分子量更小(19.1kDa, 171个氨基酸),发光更亮,比任何现有的生物发光酶用途更加广泛的特点,它是目前性能最好的生物发光报告基因之一。NanoLuc™萤光素酶的这些属性为报告基因检测提供了新的功能,在需要更高灵敏
萤光素酶的反应机制
萤光生成反应通常分为以下两步:萤光素 +ATP→ 萤光素化腺苷酸(luciferyl adenylate) +PPi萤光素化腺苷酸 +O2→ 氧萤光素 +AMP+ 光这一反应非常节省能量,几乎所有输入反应的能量都被转化为光。与之形成鲜明对比的是人类使用的白炽灯,只有约10%的能量被转化为光,剩余的能
关于萤光素酶的简介
萤光素酶(英语:Luciferase)是自然界中能够产生生物发光的酶的统称,其中最有代表性的是一种学名为Photinus pyralis的萤火虫体内的萤光素酶。在相应化学反应中,荧光的产生是来自于萤光素的氧化,有些情况下反应体系中也包括三磷酸腺苷(ATP)。没有萤光素酶的情况下,萤光素与氧气反应
萤光素酶的应用介绍
萤光素酶可以在实验室中用基因工程的方法生成,并被用于多种不同的实验。萤光素酶的基因可以被合成并插入到生物体中或转染到细胞中。研究者利用基因工程已经使得小鼠、家蚕、马铃薯等一些生物可以合成萤光素酶。间接体外成像是一种强大的研究手段,可以对整个动物体中的细胞群落进行分析:将不同类型的细胞(骨髓干细胞、T
萤光素酶的生产反应
萤光生成反应通常分为以下两步:萤光素 +ATP→ 萤光素化腺苷酸(luciferyl adenylate) +PPi萤光素化腺苷酸 +O2→ 氧萤光素 +AMP+ 光这一反应非常节省能量,几乎所有输入反应的能量都被转化为光。与之形成鲜明对比的是人类使用的白炽灯,只有约10%的能量被转化为光,剩余的能
概述萤光素酶的应用
萤光素酶可以在实验室中用基因工程的方法生成,并被用于多种不同的实验。萤光素酶的基因可以被合成并插入到生物体中或转染到细胞中。研究者利用基因工程已经使得小鼠、家蚕、马铃薯等一些生物可以合成萤光素酶。间接体外成像是一种强大的研究手段,可以对整个动物体中的细胞群落进行分析:将不同类型的细胞(骨髓干细胞
萤光素酶的基本信息
萤光素酶(英语:Luciferase)是自然界中能够产生生物发光的酶的统称,其中最有代表性的是一种学名为Photinus pyralis的萤火虫体内的萤光素酶。在相应化学反应中,荧光的产生是来自于萤光素的氧化,有些情况下反应体系中也包括三磷酸腺苷(ATP)。没有萤光素酶的情况下,萤光素与氧气反应的速
萤光素酶的基本信息
萤光素酶(英语:Luciferase)是自然界中能够产生生物发光的酶的统称,其中最有代表性的是一种学名为Photinus pyralis的萤火虫体内的萤光素酶。在相应化学反应中,荧光的产生是来自于萤光素的氧化,有些情况下反应体系中也包括三磷酸腺苷(ATP)。没有萤光素酶的情况下,萤光素与氧气反应的速
关于萤光素酶的生物发光介绍
生物发光现象是在生物体内,由于生命过程的变化,化学反应将化学能转化为光能而发光的现象。生物发光在英语中名为bioluminescence,该词为合成词,是由希腊语中代表生命的bios与拉丁语中意为光的lumen组合而成。大部分发光与三磷酸腺苷(ATP)有关,发光的化学反应不限于在细胞内外发生。对
简述萤光素酶的基本信息
萤光生成反应通常分为以下两步: 萤光素 +ATP→ 萤光素化腺苷酸(luciferyl adenylate) +PPi 萤光素化腺苷酸 +O2→ 氧萤光素 +AMP+ 光 这一反应非常节省能量,几乎所有输入反应的能量都被转化为光。与之形成鲜明对比的是人类使用的白炽灯,只有约10%的能量被转
双萤光素酶报告基因检测
萤光素酶报告基因系统广泛应用于真核生物基因表达和细胞生理学研究,包括受体活性、转录因子、细胞信号转导、mRNA加工和蛋白质折叠等。萤光素酶是理想的报告基因,因为哺乳动物细胞中不含内源性萤光素酶,一旦转录完成立刻就生成功能性的萤光素酶。单萤光素酶报告基因实验往往会受到各种实验条件的影响,而双萤光素
萤火虫萤光素酶在ATP检测中的应用
前言:生物发光是一种在生物体内由酶将化学能转化为光能的现象,在自然界中有超过30种生物发光体系,而我们所熟知的萤火虫的发光体系就是其中研究最早,应用也最广泛的一种。萤火虫的发光现象是由其体内的萤光素酶(luciferase)的催化下三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP
关于Promega萤光素酶技术发光史里程碑介绍
1990年12月,Promega首次提出萤火虫萤光素酶(Luc)作为一种新兴报告基因技术的应用可能性。当时的人们认为,萤火虫萤光素酶具备的生物发光特性、极高的灵敏度和快速简单的检测流程等特点,可能会对分子生物学家的研究产生重要的影响。几个月后,第一代萤火虫萤光素酶报告基因载体和检测试剂在Prom
D萤光素-Protocol-在生物发光检测中的应用
D-萤光素,萤火虫萤光素酶的化学发光底物,广泛用于体外生物发光、体内活体成像。萤萤之光,照亮您的科研之路! ■ Q: D-萤光素的作用原理D-萤光素 (D-Luciferin) 是萤火虫萤光素酶 (Firefly Luciferase) 的化学发光底物。在ATP 和萤光素酶存在下,萤光素能够被氧化发
萤光显微镜原理
萤光显微镜原理:(A) 光源:光源幅射出各种波长的光(以紫外至红外)。(B) 激励滤光源:透过能使标本产生萤光的特定波长的光,同时阻挡对激发萤光无用的光。 (C) 萤光标本:一般用萤光色素染色。 (D) 阻挡滤光镜:阻挡掉没有被标本吸收的激发光有选择地透射萤光,在萤光中也有部分波长被选择透过。 以紫
萤光显微镜计数检测
用 + 号表示荧光强度:无荧光(-)、可疑荧光(±)、荧光清楚可见(+)、荧光明亮(++)、荧光闪亮(+++~++++)。
“萤光”闪烁揭示早期星系形成
美国科学家基于韦布空间望远镜的观测数据,发现在宇宙约6亿年时形成的小质量星系——“萤火虫闪烁”的详细观测数据,有助于为早期星系形成提供新知,增进人们对银河系演化的理解。相关研究12月12日发表于《自然》。我们能探测到的最遥远的星系来自宇宙只有当前年龄约5%的时候。不过,这些星系的质量只有银河系的约万
荧光素酶的分析
萤光素或萤光素酶不是特定的分子,而是对于所有能够产生萤光的底物和其对应的酶的统称,虽然它们各不相同。不同的能够控制发光的生物体用不同的萤光素酶来催化不同的发光反应。最为人所知的发光生物是萤火虫,而其所采用不同的萤光素酶与其他发光生物如萤光菇(发光类脐菇,Omphalotus oleariu'
绿萤光蛋白的发光原理
我们知道,荧光的发光是被一定波长光激发后,电子被激发到高能级,随后向低能级跃迁的过程中发出比激发光波长更长的荧光,这也就是上面提到的受激辐射。我们将能接受光辐射,并跃迁发出颜色光的基团叫做生色团。绿色荧光蛋白含有一个三肽的单位Ser(65)-Tyr(66)-Gly(67),在蛋白质折叠的时候,这三个
莹光、荧光、萤光,有何区别
莹光,就如萤火虫在夜晚发出的光亮。许多古瓷画面,由于年深日久地受自然界空气流动的磨损,以及气温变化的影响,使釉面分子散失,从而形成一种如玉似脂的光泽,叫做“莹光”或“酥光”。荧光,又作“萤光”,是指一种光致发光的冷发光现象。
荧光素酶实验(luciferase-assay)通常变化多少倍才算明显
Dual-Luciferase®Reporter Assay System E1910Dual-Luciferase® Reporter (DLR™) Assay System (Dual-Luciferase® 双萤光素酶报告基因检测系统) 为双报告基因检测提供有效的手段。 在DLR™ 检测中,萤
实用的荧光素酶报告基因检测工具的分类
荧光素酶(Luciferase)是自然界中能够催化荧光素产生生物发光的酶的统称,其中最有代表性的是来自萤火虫体内(Firefly)和海肾(Renilla)体内的两类萤光素酶,分别命名为F-Luciferase和R-Luciferase,同时近年来研究得较多的来源于高斯氏菌的高斯荧光素酶(Gauss
纤维素酶能否酶解纤维素
成熟棉纤维的主要成分是纤维素,纤维素是天然高分子化合物,由葡萄糖分子按β-1,4糖苷键连接而成。棉纤维中大分子的排列比较复杂,纤维内某些区域由于大分子的横向吸引使大分子排列比较整齐密实,缝隙孔洞较少,这称为结晶区。相反,另一些区域大分子排列比较紊乱,堆砌比较疏松,其中有较多的缝隙孔洞,密度较低,这称
生物发光技术在生命科学中的应用(二)
为了进一步提高检测基因的效率,我们对萤光素酶基因序列的密码子进行了优化,使得它在多种哺乳细胞中的表达水平提高了5~10倍;同时,为了减少对基因的非特异性调控,我们也对萤光素酶的载体进行了优化,去除了载体上哺乳动物转录因子结合序列的保守序列,从而大大降低了实验的本底,显着提高了实验的相对信号强度。优化
关于荧光素酶的基本介绍
萤光素酶(英文名称:Luciferase)是自然界中能够产生生物荧光的酶的统称,其中最有代表性的是一种学名为Photinus pyrali'的萤火虫体内的萤光素酶,萤火虫发光的腹部或海洋的蓝色发光波浪将大自然中生物发光奇迹呈现于世。在生物化学和分子生物学的早期,这一现象被认为是发展生物分
生物发光技术在生命科学中的应用
随着发光(luminescence)技术在多种生物实验中的广泛应用,生物发光(bioluminescence)技术越来越成为首选的生物检测手段。在这篇文章中,我们将详细讨论生物发光技术在生物检测中的应用,以及它与其它发光检测手段相比所显示出的优点。 1 生物发光的特点 根据产生光子的
荧光素和荧光素酶是什么
荧光素也就是FDAFDA可透过细胞膜并作为荧光素积蓄在活细胞内。由于荧光素较BCECF或Calcein的亲水性低,因此荧光素从细胞中渗漏的量也高。FDA也可用于流式细胞仪。荧光素的激发和发射波长分别为488nm和530nm。荧光素酶(英文名称:Luciferase)是自然界中能够产生生物荧光的酶的统
荧光素酶的种类以及应用
在细胞和基因的微观世界中研究探索,遗传报告基因是非常有用的"可视化和量化"工具,具有广泛的应用。荧光素酶(萤光素酶)以出色的灵敏度、使用方便、可以定量检测而成为理想的报告基因。荧光素酶不是特定的分子,是一类中能催化产生生物发光的酶的统称,不同来源的荧光素酶各有特点,可催化底物发出不同颜色的光,有的还