知识分享：蛋白质含量的测定方法
实验原理： 蛋白质含量测定法，是生物化学研究中最常用、最基本的分析方法之一。目前常用的有四种古老的经典方法，即定氮法、双缩尿法（Biuret法）、Folin－酚试剂法（Lowry法）和紫外吸收法。另外还有一种近十年才普遍使用起来的新的测定法，即考马斯亮蓝法（Bradford法）。其中Bradford法和Lowry法灵敏度最高，比紫外吸收法灵敏10～20倍，比Biuret法灵敏100倍以上。定氮法虽然比较复杂，但较准确，往往以定氮法测定的蛋白质作为其他方法的标准蛋白质。 值得注意的是，这后四种方法并不能在任何条件下适用于任何形式的蛋白质，因为一种蛋白质溶液用这四种方法测定，有可能得出四种不同的结果。每种测定法都不是完美无缺的，都有其优缺点。在选择方法时应考虑：①实验对测定所要求的灵敏度和精确度；②蛋白质的性质；③溶液中存在的干扰物质；④测定所要花费的时间。考马斯亮蓝法（Bradford法），由于其突出的优点，正得到......阅读全文
用－Bradford方法测定蛋白质含量实验
实验方法原理溶解蛋白质，与染料混匀，l0min 后阅读 O.D.。实验步骤材料十二烷基硫酸钠（SLS,SDS)，水溶 3.5 mmol/L 或 0.3mol/L NaOH。考马斯亮蓝 G-250, 0.12 mmol/L(0.01%)，溶于 4.7 % 乙醇和 85 % (W/V ) 磷酸：将 10
用－Bradford方法测定蛋白质含量实验
实验方法原理 溶解蛋白质，与染料混匀，l0min 后阅读 O.D.。 实验步骤 材料 十二烷基硫酸钠（SLS,SDS)，水溶 3.5 mmol/L
国家标准检测蛋白质含量测定方法
蛋白质含量测定方法就是检测N元素的含量，像三聚氰胺的问题，就是通过增加N的含量使“蛋白质”含量提高的。国家标准检测蛋白质含量的方法叫做凯氏定氮法，食物中的蛋白质在催化加热条件下分解，导致氨和硫酸结合产生硫酸铵。 碱蒸馏采用无硫，硼酸吸收，用硫酸或盐酸标准滴定溶液滴定，根据酸耗计算氮含量，再乘以转化系
蛋白质含量的测定实验
FOLIN酚法 考马斯亮蓝法 实验方法原理 FOLIN 酚法所用的试剂有两部分组成。试剂甲可与蛋白质中的肽键起显色反应, 试剂乙在碱性条件下极
蛋白质含量的测定实验
实验方法原理 FOLIN 酚法所用的试剂有两部分组成。试剂甲可与蛋白质中的肽键起显色反应, 试剂乙在碱性条件下极不稳定, 易被酚类化合物还原成蓝色(蛋白质中的酚基将磷钼酸-磷钨酸还原成蓝色复合物)。在一定条件下, 蓝色强度与蛋白质的量成正比, 范围约在25～250 μg/ ml 蛋白质浓
蛋白质含量测定实验
Bradford法 实验材料 蛋白质 试剂、试剂盒
蛋白质含量测定实验
实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 牛血清NaCl考马斯亮蓝仪器、耗材 分光光度计离心机实验步骤 分别在两组微量离心管中各加入0.5 mg/ml 牛血清白蛋白，以 0.15 mmol/l NaCl补足至100 μl，同时以两管100 μl 的0.15 mmol/l NaCl作空白对照。2. 每管各加
蛋白质含量测定实验
folin—酚试剂法 考马斯亮蓝法 实验方法原理 这种蛋白质测定法是最灵敏的方法之一。过去此法是应用最广泛的一种方法，由于其试剂乙的配制较为困难（
知识分享：细胞转染原理及常见转染方法的比较
实验原理： 转染是将外源性基因导入细胞内的一种专门技术。随着基因与蛋白功能研究的深入，转染目前已成为实验室工作中经常涉及的基本方法。 常规转染技术可分为两大类,一类是瞬时转染,一类是稳定转染（永久转染）。前者外源 DNA /RNA不整合到宿主染色体中,因此一个宿主细胞中可存在多个拷贝
知识分享：WesternBlot实验方法及注意事项
实验原理： WesternBlot印迹方法，又称为免疫印记，是将获得的蛋白质样品通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，对不同分子量的蛋白质进行分离，并通过转移电泳将凝胶上分离到的蛋白质转印至固相支持物（NC膜或PVDF膜）上，用抗靶蛋白的非标记抗体（一抗）与转印后膜上的靶蛋白进行特异性结合，再与
四种测定蛋白质含量的经典方法比较
三氯醋酸-丙酮沉淀法是最为常用的总蛋白提取方法,具有降低次生代谢物质干扰、减少蛋白降解等优点。该法所提取的蛋白,浓度较高,蛋白质组分完全,各组分的量较均匀,杂质少,离子浓度小,不仅可用于一维电泳( SDS-PAGE)分析,还可用于二维电泳(2-DE)分析。只不过该法成本较高,较为耗时,操作也
分享移液器的日常维护保养知识
移液器是生物、药物、化学等行业科研工作者每天都使用的工具，除了正确使用移液器，日常维护保养也十分重要： 1.维护 (1)移液器不用时,应在专用支架上竖直放置。 (2)每天使用前,应检查移液器外表面是否有灰尘和污物,要注意移液器的嘴锥处,只能用70%的酒精溶液清洁。
知识分享：AAV在肺部的应用
腺相关病毒（AAV）属于依赖病毒属，细小病毒亚科，是一类自然缺陷的单链DNA病毒。野生型AAV基因组约4.7kb，含有rep和cap基因以及两端的ITR序列。尽管人类对AAV易感，但临床还并未发现与AAV相关的疾病。根据AAV衣壳蛋白基因的变异，可将AAV分为不同的血清型。不同血清型的AAV具有不同
密度计的小知识分享
1.密度计应满足的技术条件： a.光源的辐射函数（相对辐射分布）s（λ）； b.传感器的相对光谱灵敏度s（λ）r； c.滤光片的光谱透射率τ（λ）； d.测量的几何条件和测量块的大小； e.读数的性和显示的线性； f.被测样本的光谱反射参数； g.定标板的光
密度计的小知识分享
1.密度计应满足的技术条件： a.光源的辐射函数（相对辐射分布）s（λ）； b.传感器的相对光谱灵敏度s（λ）r； c.滤光片的光谱透射率τ（λ）； d.测量的几何条件和测量块的大小； e.读数的精确性和显示的线性； f.被测样本的光谱反射参数；
分享移液器的日常维护保养知识
1.维护 (1)移液器不用时,应在支架上竖直放置。 (2)每天使用前,应检查移液器外表面是否有灰尘和污物,要注意移液器的嘴锥处,只能用70%的酒精溶液清洁。 (3)如液体不小心进入活塞室应及时清除污染物。 (4)根据使用频率,所有的移液器应定期用肥皂水清洗,或用60%的异丙醇消毒,
知识分享：稳转株的制备
实验原理： 利用哺乳动物系统生产蛋白的方式有两种：瞬时转染和稳转株筛选。通过稳定细胞系构建筛选稳定表达细胞株。针对瞬时转染，外源基因在短时间转录翻译得到的蛋白量较少，能够满足小量蛋白制备，大量生产成本很高。相对于此，稳定转染的是将外源基因整合到细胞自身的基因组上，随着细胞的生长分裂外源基因
知识分享：mRNA的分离和纯化
实验原理 从细胞或组织中得到RNA是一种混合物，其中包括tRNA，rRNA和mRNA，其中RNA为75％～ 85％，tRNA占10％～16％，而mRNA仅占1%～5％，并且mRNA基因序列不同，分子量大小不均一，各基因的表达丰度也不一样。每克细胞可分离出5-10mg RNA。 真核生
变频串联谐振设备知识分享
串联谐振变压器优点1、所需电源容量大大减小。串联谐振电源是利用谐振电抗器和被试品电容谐振产生高电压和大电流的，在整个系统中，电源只需要提供系统中有功消耗的部分，因此，试验所需的电源功率只有试验容量的1/Q.2、设备的重量和体积大大减少。串联谐振电源中，不但省去了笨重的大功率调压装置和普通的大功率工频
恒温摇床基础知识分享
恒温摇床具有不锈钢万用夹具、数显控温、无极调速和良好的热循环功能，是一种多用途的生化器，是植物、生物、微生物、遗传、病毒、环保、医学等科研，教育和生产部门作精密培养制备不可缺少的实验室设备，适用于各大中院校、油化工、卫生防疫、环境监测等科研部门作为生生、生化、细胞、菌种等各种液态、固态化合物的振荡
消化炉知识经验点分享
很多人只知道凯氏定氮仪，对消化炉却没有太多的了解，最终出现测定结果不准确、误差等一系列问题。因此在利用专业仪器开展试验前，我们必须熟知仪器本身及配套设备的构造原理及操作注意事项。消化炉也不例外，它是为加速样品消化煮解时间，提高蛋白质测定速度的理想仪器。它还能将消化管内溢出的有害气体，经过抽气
恒温摇床基础知识分享
恒温摇床具有不锈钢万用夹具、数显控温、无极调速和良好的热循环功能，是一种多用途的生化器，是植物、生物、微生物、遗传、病毒、环保、医学等科研，教育和生产部门作精密培养制备不可缺少的实验室设备，适用于各大中院校、油化工、卫生防疫、环境监测等科研部门作为生生、生化、细胞、菌种等各种液态、固态化合物的振荡培
单晶培养科研实验知识分享
好多同学/老师一直培养不出单晶，或者周期太长了，希望这个分享能得到一些帮助。单晶培养的方法多种多样，如升华法、共结晶法等。最简单的最实用常用的有1.溶剂缓慢挥发法；2.液相扩散法；3.气相扩散法。99％的单晶是用以上三种方法培养出来的。一、单晶培养要点 1、一般以10--25mg 为佳，如果你只有2
知识分享：质粒提取实验步骤
实验原理 现在较常用的质粒提取方法有三种:碱裂解法、煮沸法和去污剂裂解法，前两种方法较为剧烈，适用于较小的质粒（＜15Kb），而去污剂裂解法则比较温合，一般用于分子量较大的质粒（＞15Kb）。 碱裂解法是一种最广泛使用的制备质粒DNA的方法。其原理为：染色体DNA远大于质粒DNA，且
白度测定仪的保养和使用知识点分享
白度测定仪是制粉行业必不可少的仪器之一，通过测定面粉的白度为评价面粉质量提供参考。为了帮助大家更准确的测定面粉白度，小编今天为大家整理了一些关于该仪器的知识要点。第一是仪器的保养，正确方法如下：①白度测定仪随机工作标准白板，应定期送上级计量单位或行业测试中心站核准，每年一次。如果受到污染，经清洗后
Bradford法蛋白质含量的测定
原理：这一方法基于考马斯亮蓝G-250 有红蓝两种不同的形式。在一定浓度的乙醇及酸性条件下，可配成淡红色的溶液，当与蛋白质结合后，产生蓝色化合物，反应迅速而稳定。反应化合物在 465-595nm处有最大的光吸收值，化合物颜色的深浅与蛋白浓度的高低成正比关系，因此可检测595nm的光吸收值的大
几种蛋白质含量测定方法的差异化比较
蛋白质测定有很多种方法，如标准方法中规定的凯氏定氮法，就是蛋白质含量的经典测定方法，另外还有根据这一原理发展而来的蛋白质测定仪，是蛋白质含量测定最常用的仪器之一。另外，还有微波消解法，比色法等等，都是测定蛋白质含量的非常好的方法。下面我们就具体实践过程中得到的蛋白质含量测定方法的结果，来作一比较
小麦面粉蛋白质含量三种测定方法的比较
小麦面粉蛋白质含量三种测定方法的比较 小麦是世界上种植面积最广、总产量最多、营养价值最高、总贸易量最大的粮食作物。小麦品质差异在很大程度上影响其经济价值．其中面粉蛋白含量是衡最其加工品质的重要指标，现在测定小麦面粉蛋白含量仍常用经典的凯氏定氮法，这种方法具有很高的准确度和精密度，但费时费工，需
蛋白质含量的测定方法及常见注意事项汇总！
蛋白质含量是实验室的基础性操作，衡量食品的营养成分时，要测定蛋白质含量，但由于蛋白质组成及其性质的复杂性，在食品分析中，通常用食品的总氮量表示，蛋白质是食品含氮物质的主要形式，每一蛋白质都有其恒定的含氮量，用实验方法求得某样品中的含氮量后，通过一定的换算系数。即可计算该样品的蛋白质含量。 一
蛋白质印迹法的测定蛋白质含量
1、制作标准曲线（1 ）从－20℃取出1mg/ml BSA，室温融化后，备用。（2） 取18个1.5ml离心管，3个一组，分别标记为0μg，2.5μg，5.0μg，10.0μg，20.0μg，40.0μg。（3 ）按下表在各管中加入各种试剂。0μg2.5μg5.0μg10.0μg20.0μg40.0