microRNA(miRNA)综述2

miRNA的作用方式最早被发现的两个miRNAs――lin-4 and let-7被认为是通过不完全互补结合到目标靶mRNA3'非编码区端,以一种未知方式诱发蛋白质翻译抑制,进而抑制蛋白质合成,阻断mRNA的翻译。多个果蝇miRNAs也被发现和他们的目标靶mRNAs的3'非编码区有部分同源。由于miRNAs和其潜在的目标靶之间并非完全互补,这使得通过信息学的方法鉴定miRNA的目标靶位点变得困难。因而也无法确定miRNAs的作用方式是什么,以何种机制影响的翻译,以何种方式调控基因表达。miRNAs的作用目标靶和活性机制一直是各地的研究人员的关注热点。在植物中目前有一个miRNA和3个潜在的目标靶基因完全互补(这些scarecrow基因编码潜在的转录因子),尽管目前还不清楚这些基因是否就是miRNA的目标靶,这仍是第一次发现miRNA和其潜在的目标靶完全互补,也提示miRNA可能包含和 siRNA类似的作用......阅读全文

micro-RNA(miRNA)综述2

miRNA的作用方式最早被发现的两个miRNAs――lin-4 and let-7被认为是通过不完全互补结合到目标靶mRNA3'非编码区端,以一种未知方式诱发蛋白质翻译抑制,进而抑制蛋白质合成,阻断mRNA的翻译。多个果蝇miRNAs也被发现和他们的目标靶mRNAs的3'非编码区

micro-RNA(miRNA)综述3

未来要解决的问题miRNAs在多个物种中广泛被发现,而且在进化上高度保守。这些“小玩意儿”留给我们一大堆谜团:miRNA的确切功能是什么?它的目标靶是什么?作用机制是什么?也许需要对植物或者线虫的基因组进行miRNAs突变株的筛选,在果蝇中可以用targeted- disruption缺失miR

micro-RNA(miRNA)综述1

RNA一度被认为仅仅是DNA和蛋白质之间的“过渡”,但越来越多的证据清楚的表明,RNA在生命的进程中扮演的角色远比RNA我们早前设想的更为重要。RNA干扰(RNA interference)的发现使得人们对RNA调控基因表达的功能有了全新的认识,更因为可以简化替代基因敲除而成为研究基因功能的

Isolation-of-microRNA-(miRNA)

实验概要        This protocol utilizes the powerful guanidine isothiocyanate–phenol:chloroform extraction method which allows the rapid isolation of t

小分子RNA——microRNA综述(2)

未来要解决的问题miRNAs在多个物种中广泛被发现,而且在进化上高度保守。这些“小玩意儿”留给我们一大堆谜团:miRNA的确切功能是什么?它的目标靶是什么?作用机制是什么?也许需要对植物或者线虫的基因组进行miRNAs突变株的筛选,在果蝇中可以用targeted-disruption缺失miRNA序

miRNA研究之RNA标记

RNA标记RNA标记是将标记物(如放射性同位素、荧光素或酶)共价地连接到RNA,通过检测标记物,进而实现对RNA鉴别和检测的目的。RNA标记在分子探针领域应用广泛,在疾病诊断方面也很有前景。 理想的RNA标记方法应符合以下要求:1.  操作简单,灵敏度高2.  不影响碱基配对的特异性3.  不影响R

小分子RNA(miRNA)简介

一、什么是小分子RNA( MicroRNA)?    MicroRNA (miRNA) 是一类长度约为20-24个核苷酸长度的具有调控功能的非编码RNA。 miRNA 主要参与基因转录后水平的调控。这些miRNA基因首先在细胞核内转录成原始miRNA转录本(primary transcrip

RNA干扰相关知识MicroRNA(miRNA)

MicroRNA(miRNA):是含有茎环结构的miRNA前体,经过Dicer加工之后的一类非编码的小RNA分子(~21-23个核苷酸)。MiRNA,以及miRISCs(RNA-蛋白质复合物)在动物和植物中广泛表达。因之具有破坏目标特异性基因的转录产物或者诱导翻译抑制的功能,miRNA被认为在调控发

科研中的“新星”技术——MicroRNA荧光定量PCR

Micro RNA简介微小RNA(microRNA,简称miRNA)是生物体内源长度约为20-23个核苷酸的非编码单链小分子RNA,通过与靶mRNA的互补配对而在转录后水平上对基因的表达进行负调控,导致mRNA的降解或翻译抑制。是由具有发夹结构的约70-90个碱基大小的单链RNA前体经过Dicer酶

RNAseq综述(四)

设计更好的RNA-seq实验仔细设计DGE RNA-seq实验对于获取高质量和生物意义数据有着非常重要的意义。尤其是要考虑到复制的层次,测序深度以及单端还是双端测序。重复与实验功效(replication and experimental power)在一个实验中,足够的生物学重复(biologic

RNAseq综述(八)

使用核糖体分析方法检测活跃的翻译RNA-seq的主要用途在于研究样本中的mRNA的种类与数量,但是mRNAs的存在与否并不直接关系到蛋白质的合成。现在有两种方法可以研究转录以外的翻译情况,可以让研究者们更好的理解翻译组(translatome):一种是多核糖体表达谱(polysomal pr

RNAseq综述(五)

第1阶段-测序读长的比对(alignment)与组装(assembly)测序完成后,分析的起点就是数据文件,这个数据文件包含了测序计数的碱基,这些数据文件通常是以FASTQ文件的格式存在。处理这些FASTQ文件最常见的第一步操作就是将测序读长回贴到已知的转录组上(或已经注释的基因组上),将每个测序读

RNAseq综述(九)

通过研究RNA分子内的相互作用来研究RNA的结构核糖体RNA和tRNA构成细胞的大部分RNA。它们与其他结构非编码RNA一起在细胞中发挥各种作用,例如从基因调节到翻译。现存主要有两种研究RNA结构的方法:基于核酸酶的方法和化学探针方法。核糖核酸酶消化于1965年首次用于研究RAN(tRNA(Ala)

RNAseq综述(六)

单细胞分析scRNA-seq于2009年首次报道,当时的研究者在含有裂解缓冲液的EP管中分离了单个卵母细胞。单细胞测序对生物学新问题的解释,以及现有的实验室和计算方法以极快的速度发展,甚至最近几年综述都已经过时了。每种scRNA-seq方法都需要将实体组织进行分离,分离出单个细胞(使用不同的方法),

RNAseq综述(三)

改良RNA-seq建库方法RNA-seq最初用于分析多聚腺苷酸化的转录本,使用的方法源于早期的表达序列标签(expressed-sequence tag)和芯片研究。然而,下一代测序的使用指出了这些方法的局限性,而这些局限性在芯片数据中并不明显。因此,在RNA-seq首次报道后不久,就有研究

RNAseq综述(二)

短读长cDNA测序短读长已经成了在整个转录组范围内对基因进行检测和定量的事实方法(de facto method),部分原因是这种方法比芯片成本更低,操作更方便,但是其主要原因还是因为这种方法能生成更全面,更高质量的数据,这种方法能够 对整个转录组中的基因表达水平进行定量。使用Illumina短读长

RNAseq综述(七)

动态RNA-seq分析(Beyond steady-state RNA analysis)DGE分析是使用RNA-seq来检测稳态下的mRNA表达水平,这一表达水平是通过mRNA的转录,加工和降解速度来决定的。但是,RNA-seq也可以用于研究涉及转录,翻译所涉及的过程与动力学特征,这些研究为基因表

RNAseq综述(一)

摘要在过去的十年中,RNA测序(RNA-seq)已经成为在全转录组范围内分析差异基因表达和mRNAs差异剪接的重要工具。然而,随着下一代测序技术的发展,RNA-seq技术也在不断发展。现在,RNA-seq用于研究RNA生物学的许多方面,其中包括单细胞基因表达、翻译(翻译组,translatome)和

营养所在WIREs-RNA期刊发表综述论文

  7月21日,中国科学院上海生命科学研究院营养科学研究所研究员应浩受Wiley Interdisciplinary Reviews: RNA期刊的邀请,在线发表了题为Micro-managers of hepatic lipid metabolism and NAFLD的综述。该综述由应浩和刘威、

小分子RNA——microRNA综述(1)

RNA一度被认为仅仅是DNA和蛋白质之间的“过渡”,但越来越多的证据清楚的表明,RNA在生命的进程中扮演的角色远比我们早前设想的更为重要。RNA 干扰(RNA interference)的发现使得人们对RNA调控基因表达的功能有了全新的认识,更因为可以简化/替代基因敲除而成为研究基因功能的有

细胞凋亡综述2

在凋亡早期,活化的Caspase-3是主要的功能蛋白酶。凋亡细胞内,32kD的原酶裂解为17kD和12kD的亚单位,两个亚单位组成二聚体,即活化的Caspase-3,活化的Caspase-3进一步水解活化其它Caspase酶及胞浆内目标(如D4-GDI)和核内目标(如PARP)。Bcl-2家族Bcl

miRNA研究之RNA提取试剂的选择

RNA提取试剂的选择RNA提取对于科研人员来说并不陌生,但是要得到好的结果却不是一件很容易的事情。事实上,现在市面上的丰富的RNA提取试剂基本上可以满足科研人员的需要,为什么往往提取的RNA却容易失败呢?RNA提取失败的主要现象有三个:提取的RNA降解、提取的RNA量偏低以及提取的RNA纯度低。究竟

Cell综述:RNA修饰的新作用

  迄今为止,科学家们已经发现了上百种RNA修饰类型,但是其中大多数在mRNA和调控非编码RNAs中还是很罕见的。近期的一些研究发现指出,这些修饰中有至少有一些含量丰富,且保守性强。本期Cell杂志以此为中心,介绍了两种RNA修饰方式的分子机制,和生物学功能。  这两种RNA修饰方式分别是N6-甲基

【锐赛小课堂】miRNA研究之RNA标记

  RNA标记是将标记物(如放射性同位素、荧光素或酶)共价地连接到RNA,通过检测标记物,进而实现对RNA鉴别和检测的目的。RNA标记在分子探针领域应用广泛,在疾病诊断方面也很有前景。   理想的RNA标记方法应符合以下要求:   1. 操作简单,灵敏度高   2. 不影响碱基配对的特异性

腺病毒载体综述2

其他疗法    随着高龄人口的增加,对于人神经退化疾病如帕金森氏病的治疗提出了一个重要的挑战。腺病毒,因其可以感染有丝分裂后的细胞,同时具有潜在的高转导效率和在中枢神经系统免疫特惠区(immunologically privileged site)中的低病原性,因此是进行神经疾病基因治疗的有效载体。

RNA干涉(RNA-Interference,RNAi)(2)

早期的 RNAi 技术可用在研究与胚胎发育相关基因的功能上,但是由于细胞分裂造成 dsRNA 的稀释,使得这种方法在研究成体的基因功能时有一定的局限性。为弥补早期 RNAi 技术的不足,Tavernarakis 等将 RNAi 技术做了一些改进及更动,将目的基因之标的序列以反向重复的方式,由

特殊样本核酸纯化方案

快速、方便、高效的纯化实验方案创新的 InhibitEX buffer 高效去除 PCR 抑制剂灵敏度高,适合多种下游应用可在 QIAcube 上自动操作图 22. 从不同粪便样本纯化 DNA 产量从 7 个不同的粪便样本中同时利用 QIAamp Fast DNA Stool Mini Kit

miRNA研究之动物总RNA的提取与电泳

动物总RNA的提取与电泳I.实验目的与要求A. 理解和掌握提取和纯化动物总RNA的技术原理和操作方法。B. 理解和掌握通过电泳鉴定提取所得的动物总RNA的技术原理和操作方法。II. 实验原理和背景知识A. RNA是生命活动中基因表达过程非常重要的生物大分子,如mRNA,它携带了DNA的全部编码信息。

单克隆抗体综述2

1、抗CD20单抗的情况 2、抗CD6单抗情况 目前该单抗是属于抗CD6的IgG1亚型的单克隆抗体。该单抗是针对淋巴瘤细胞,可治疗牛皮癣、类风湿关节炎。古巴分子免疫学中心(CIM)开发的人源化抗CD6单抗正在进行针对类风湿关节炎的I期临床试验。原来CIM开发过鼠源抗CD6单抗,并进行过治疗牛皮癣、类

Study-on-a-TwoDimensional-Scanning-MicroMirror-and-Its-Application-...2

In order to realize the decoupling measurement for two deflection angles and obtain the large piezoresistive coefficients for the high measureme