BioRad（伯乐）WesternBlot半干法转膜的十大注意事项
首先讲转膜仪的清洗：Do not immerse the unit in liquid. Use special care when cleaning the anode plate to avoid scratching or marring the platinum. Do not use abrasives or strong detergents. The cathode plate (stainless steel) can be cleaned with a mild abrasive to remove salt that may deposit during normal operation. The entire unit can also be periodically disassembled and cleaned with water to remove salt deposits.......阅读全文
RNA的电泳，转膜和杂交
实验原理：基本同 Southern Blotting，但因RNA 是单链分子，必须消除局部区域形成的二级结构，在电场中泳动的距离才能反映它本身的大小，因而需使用变性胶进行电泳；另应特别注意防止RNA 的降解。实验材料：经检测质量好的 RNA实验步骤：1．制胶：Agarose 1%-1.2% ， 1×
转膜实验原理与操作步骤
转膜是把DNA从琼脂糖凝胶中转移到固相支持物(一般是尼龙膜)上固定，是进行各种后续研究(如 RFLP 分析，阳性克隆的筛选验证等所有涉及分子杂交的研究)的前提。 实验目的： 掌握 Southern blotting 的原理及操作步骤 实验原理： 1. 转膜的方式： 向上的毛细管
转膜后为什么要电泳
、转膜后的mark非常歪的原因是胶、膜以及滤纸（三明治组合）之间气泡没赶干净导致的。2、而条带特别不清晰就得看你的转膜时间了：转膜时间不够会导致胶上的蛋白包括mark没有完全转到膜上，转膜时间长了会导致胶上的蛋白包括mark已经穿过膜到滤纸上了。建议电泳后胶进行考马斯亮蓝染色、转膜后的膜进行丽春红染
Western－不同转膜方法的取舍
转膜:小分子量的蛋白半干转效果比较好，大分子量（100KD）以上建议湿转。具体转膜条件需要多摸一下。30-80KD半干转恒流1mA/cm2，1-1.5h 都可以，大分子湿转100V，2.5h以上应该可以，转完膜丽春红染出的条带比较清楚的话，一般都能有结果。湿转，Buffer一定要预冷，最好提前一天配
westernblotting转膜是根据什么原理
western blot中封闭主要是起去除非特异性吸附的作用在western blot转膜时，PVDF膜在甲醇活化后是带电的，因而在转膜时会将蛋白吸附。封闭的目的就是要将PVDF膜上无蛋白的部分空隙用奶粉填满，以免孵抗体的时候一抗二抗与之结合，产生非特异条带或者是背景杂乱。所以western blo
半干转印与湿式转印的区别－|－WEALTEC－威泰克
刚接触 Western Blot 不久的用户，在选购 WB 设备时，经常会遇到仪器选型的问题：为什么常见的蛋白质电泳的转膜有两种方式可以选择，干式和湿式，那么哪种方法更适合我们呢？这里我们结合美国 WEALTEC 公司的 E-Blotter 湿转槽和 YRDIMES 快速半干转印槽举例说明。
western－blot转膜－膜上有白点点怎么回事
封闭的时候才出现的白点，是不是奶粉没有完全溶解啊。重新溶解下奶粉，然后用0.45或者0.21um的滤膜过滤一下，看情形能不能好转。另外还得根据结果来看，如果白点最后显影都变成黑点，奶粉没有溶解的可能性就比较大了。
气态污染物处理技术半干法脱除SO2技术
喷雾干燥脱硫技术利用喷雾干燥的原理,在吸收剂(氧化钙或氢氧化钙)用固定喷头喷入吸收塔后,一方面吸收剂与烟气中发生化学反应,生成固体产物;另一方面烟气将热量传递给吸收剂,使脱硫反应产物形成干粉,反应产物在布袋除尘器(或电除尘器)处被分离,同时进一步去除SO2。循环流化床烟气脱硫技术利用流化床原理,将脱
western－blot－半干转时滤纸上出现蓝色
western blot 半干转时滤纸上出现蓝色marker一般是代表转过了western blot 半干转一般是电压10V转膜30分钟就可以了，时间长了就转到滤纸上去了所以western blot 半干转时滤纸上出现蓝色marker一般是代表转过了
转膜时间太长，小蛋白会不会从膜中穿过
影响因素应该有很多；一、首先需确定目的蛋白是否在胶上：跑完电泳可以先考马斯亮蓝染胶，如果在marker的指示下看到了目的蛋白的清晰条带，基本可以确定蛋白已经在胶上跑开。二、膜的准备：1.根据被转移的蛋白分子量大小，选择不同孔径的pvdf膜。因为随着膜孔径的不断减小，膜对低分子量蛋白的结合就越牢固。通
转膜时间太长，小蛋白会不会从膜中穿过
影响因素应该有很多；一、首先需确定目的蛋白是否在胶上：跑完电泳可以先考马斯亮蓝染胶，如果在marker的指示下看到了目的蛋白的清晰条带，基本可以确定蛋白已经在胶上跑开。二、膜的准备：1.根据被转移的蛋白分子量大小，选择不同孔径的pvdf膜。因为随着膜孔径的不断减小，膜对低分子量蛋白的结合就越牢固。通
转膜时间太长，小蛋白会不会从膜中穿过
影响因素应该有很多；一、首先需确定目的蛋白是否在胶上：跑完电泳可以先考马斯亮蓝染胶，如果在marker的指示下看到了目的蛋白的清晰条带，基本可以确定蛋白已经在胶上跑开。二、膜的准备：1.根据被转移的蛋白分子量大小，选择不同孔径的pvdf膜。因为随着膜孔径的不断减小，膜对低分子量蛋白的结合就越牢固。通
关于Southern杂交的转膜的介绍
即将凝胶中的单链DNA片段转移到固相支持物上。而此过程最重要的是保持各DNA片段的相对位置不变。DNA是沿与凝胶平面垂直的方向移出并转移到膜上，因此，凝胶中的DNA片段虽然在碱变性过程已经变性成单链并已断裂，转移后各个DNA片段在膜上的相对位置与在凝胶中的相对位置仍然一样，故而称为印迹（blot
western转膜后marker拖尾原因
western转膜有时候marker深，有时候浅是很正常的事情因为不同批次转膜的时候，电压电流缓冲液温度等等条件不可能完全保持一致，在各种条件变化的情况下，很容易造成批次间的差异，具体表现就是有时候marker深，有时候浅所以western转膜有时候marker深，有时候浅是很正常的事情
western－blotting转膜是根据什么原理
原理：westernblotting转膜一般采用“滤纸-凝胶-膜-滤纸”夹心法，凝胶靠近负极，膜靠近正极。因为蛋白上结合有sds，因而带负电，在电流的作用下会从负极向正极运动，从而转移到膜上。
western－blot－的转膜缓冲液
目的是为了消除电荷对电泳的影响，western各步骤的缓冲液基本上都是要加的。
RNA样品的转膜（虹吸印迹法）
实验概要本实验介绍了RNA样品的转膜（即虹吸印迹法）的操作步骤等。主要试剂1. 20×SSC：175.3g NaCl，88.2g柠檬酸钠，DEPC水定容1000ml NaOH调pH至7.0，高压后备用。 2. 6×SSC：用20×SSC稀释。主要设备1. 紫
western－blotting转膜是根据什么原理
原理：westernblotting转膜一般采用“滤纸-凝胶-膜-滤纸”夹心法，凝胶靠近负极，膜靠近正极。因为蛋白上结合有sds，因而带负电，在电流的作用下会从负极向正极运动，从而转移到膜上。
Western－Blot转膜时胶和膜放反了有影响吗
那蛋白就都转到滤纸上去了，没有到膜上。你找点丽春红染染膜看看，估计膜上什么也没有哇。不用往下做了。当然，如果你在膜上看到预染Marker了，还是值得再去尝试一下的。
PVDF膜活化处理完后不转膜能保存吗
PVDF膜即聚偏二氟乙烯膜（polyvinylidene fluoride）是蛋白质印迹法中常用的一种固相支持物。PVDF膜是疏水性的，膜孔径有大有小，随着膜孔径的不断减小，膜对低分子量的蛋白结合就越牢固。大于20000的蛋白选用0.45um的膜，小于20000的蛋白选用0.2um的膜。PVDF膜在
PVDF膜活化处理完后不转膜能保存吗
PVDF膜即聚偏二氟乙烯膜（polyvinylidene fluoride）是蛋白质印迹法中常用的一种固相支持物。PVDF膜是疏水性的，膜孔径有大有小，随着膜孔径的不断减小，膜对低分子量的蛋白结合就越牢固。大于20000的蛋白选用0.45um的膜，小于20000的蛋白选用0.2um的膜。PVDF膜在
请教western转膜封闭后怎么办
western blot中封闭主要是起去除非特异性吸附的作用在western blot转膜时，PVDF膜在甲醇活化后是带电的，因而在转膜时会将蛋白吸附。封闭的目的就是要将PVDF膜上无蛋白的部分空隙用奶粉填满，以免孵抗体的时候一抗二抗与之结合，产生非特异条带或者是背景杂乱。所以western blo
170KD蛋白转膜用多大电压
电流通过导体（或用电器）的时候，会受到一定的阻力，但在电压的作用下，电流能够克服这种阻力顺利通过导体（或用电器），但遗憾的是，流过串联电阻（或用电器）后，电位（电势）再也没有以前那么高了，它的电位（电势）下降了。而且电阻越大，它两端电位（电势）的变化就越大。所以，把电流流过电阻（或用电器）时，在电阻
western－blot转膜是怎么做的
蛋白免疫印迹( Western Blot) 是将电泳分离后的细胞或组织总蛋白质从凝胶转移到固相支持物NC膜或PVDF 膜上。目前主流方法是电转印法，分为湿式转印与半干转印。湿式转印是将胶块垂直方向夹在湿式转印槽内进行电转印。以E-Blotter湿转槽为例，一般使用垂直电泳槽的缓冲液槽体，将内部垂直电
western转膜之后，封闭之前要不要洗
westernblot中封闭主要是起去除非特异性吸附的作用在westernblot转膜时，pvdf膜在甲醇活化后是带电的，因而在转膜时会将蛋白吸附。封闭的目的就是要将pvdf膜上无蛋白的部分空隙用奶粉填满，以免孵抗体的时候一抗二抗与之结合，产生非特异条带或者是背景杂乱。所以westernblot中封
blot－转膜是应该加甲醇还是不该加
westernblot中封闭主要是起去除非特异性吸附的作用在westernblot转膜时，PVDF膜在甲醇活化后是带电的，因而在转膜时会将蛋白吸附。封闭的目的就是要将PVDF膜上无蛋白的部分空隙用奶粉填满，以免孵抗体的时候一抗二抗与之结合，产生非特异条带或者是背景杂乱。所以westernblot中封
10分钟读懂转膜甲醇的作用
VDF膜一定要在纯甲醇里浸润的！不然蛋白结合不上去。 在100%甲醇里短暂浸润,其目的是为了活化PVDF膜上面的正电基团，使它更容易跟带负电的蛋白质结合。小分子及大分子量的蛋白转移时，多加或不加甲醇也是这个目的。因为小分子不容易和膜结合而大分子更容易。 转膜的过程，是一个恒定电场下，电荷转移
电泳仪电泳槽半干转印电泳槽
电泳仪，半干转（半干转印电泳槽）一、两块胶电泳和四块胶电泳Mini P-4小型垂直电泳槽
电泳仪电泳槽半干转印电泳槽
电泳仪，半干转（半干转印电泳槽） 一、两块胶电泳和四块胶电泳 Mini P-4小型垂直电泳槽
转印到膜上的蛋白质检测实验
实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 PBSTween印度墨汁仪器、耗材 摇床实验步骤 1. 将转印膜置于塑料容器中，在旋转摇床中于37℃用Tween 20溶液洗涤3次，每次30 min，然后再于室温用Tween 20溶液洗2次，每次30 min。2. 用印度墨汁溶液染膜3 h或过夜。 3. 在Twe