RFLP技术和RAPD技术1
第一节 概 述DNA分子水平上的多态性检测技术是进行基因组研究的基础。RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphism，限制片段长度多态性)已被广泛用于基因组遗传图谱构建、基因定位以及生物进化和分类的研究。RFLP是根据不同品种（个体）基因组的限制性内切酶的酶切位点碱基发生突变，或酶切位点之间发生了碱基的插入、缺失，导致酶切片段大小发生了变化，这种变化可以通过特定探针杂交进行检测，从而可比较不同品种（个体）的DNA水平的差异（即多态性），多个探针的比较可以确立生物的进化和分类关系。所用的探针为来源于同种或不同种基因组 DNA的克隆，位于染色体的不同位点，从而可以作为一种分子标记(Mark)，构建分子图谱。当某个性状（基因）与某个（些）分子标记协同分离时，表明这个性状（基因）与分子标记连锁。分子标记与性状之间交换值的大小，即表示目标基因与分子标记之间的距离，从而可将基因定位于分......阅读全文
生化分离技术——柱层析(colum－chromatography)分离(1)
常说的过柱子应该叫柱层析分离，也叫柱色谱。我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。由于柱分的经验成分太多，所以下面我就几年来过柱的体会写些心得，希望能有所帮助。柱子可以分为：加压，常压，减压。压力可以增加淋洗剂的流动速度，减少产品收集的时间，但是会减低柱子的塔板数。所以其他条件相同的时候，常压柱
原位杂交组织化学实验技术1
第一节 原位杂交组织化学概述 一、核酸分子杂交技术 1961年Hall开拓了液相核酸杂交技术的研究，其基本原理是利用核酸分子单链之间有互补的碱基顺序，通过碱基对之间非共价键的形成，出现稳定的双链区，形成杂交的双链。自此以后，由于分子生物学技术的迅猛发展，特别是70年代末到80年代初，分子克隆、质
细胞结构成分的离心分离技术1
就像可以把细胞从组织中分离出来进行研究一样，人们也可以把细胞器从细胞中分离纯化出来，以研究它们各自特有的的化学组成、酶活性和代谢特点。尽管在一个世纪前就有人试图分离细胞器，但直到20世纪40年代有了超速离心机和细胞匀浆技术后，才真正建立了细胞器的分离技术。用这一技术可以获得相对纯净的各种细胞器和大分
DNA重组（DNA－recombination）技术：DNA重组的载体1
载体（vector）是携带靶DNA（目的DNA）片段进入宿主细胞进行扩增和表达的运载工具。常用的载体是通过改造天然的细菌质粒、噬菌体和病毒等构建而成。目前已构建成的载体主要有质粒载体、噬菌体载体、病毒载体和人工染色体等多种类型，亦可根据其用途不同分为克隆载体和表达载体二类。载体的构建和选择应考虑以下
前沿显微成像技术专题——超分辨显微成像（1）
从16世纪末开始，科学家们就一直使用光学显微镜探索复杂的微观生物世界。然而，传统的光学显微由于光学衍射极限的限制，横向分辨率止步于 200 nm左右，轴向分辨率止步于500 nm，无法对更小的生物分子和结构进行观察。突破光学衍射极限，一直是科学家们梦想和追求的目标。虽然随着扫描电镜、扫描隧道显微镜及
微生物学检验基本技术(1)
第一节 微生物形态学检查 细菌形态学检查是细菌检验的重要方法之一，它是细菌分类和鉴定的基础，可根据其形态、结构和染色反应性等，为进一步鉴定提供参考依据。 一、显微镜检查 由于细菌个体微小，肉眼不能看到，必须借助显微镜的放大才能看到。一般形态和结构可用光学显微镜观察，其内部的超微结构则需用电
微生物学检验基本技术(1)
随着现代医学及相关科学技术的发展，各学科相互交叉和渗透，医学微生物学检验技术已深入到细胞、分子和基因水平，许多新技术、新方法已在临床微生物实验室得到广泛应用。医学微生物学实验室的基本任务之一是利用微生物学检验技术，准确、快速检验和鉴定临床标本中的微生物，并对引起感染的微生物进行耐药性监测，为临床对感
RAPD分子标记的实验原理及操作流程
RAPD标记RAPD技术的全称是随机扩增多态性DNA(Random Amplified Polymorphic DNA)，此技术建立于PCR基础之上，使用一系列具有10个左右碱基的单链随机引物，对基因组的DNA全部进行PCR扩增，以检测多态性。由于整个基因组存在众多反向重复序列，因此须对每一随机
GFP－和荧光共振能量转移技术测定蛋白质相互作用实验－1
实验材料 进行转染的细胞株按第二阶段所介绍的方法制备表达了蛋白质探针的细胞试剂、试剂盒 N-二羟乙基甘氨酸消化缓冲液NN-二甲基甲酰胺磷酸钠磷酸盐缓冲溶液TE木瓜蛋白酶Cy3 和 Cy5 OSu 单功能硫代吲哚花菁琥珀酰亚胺酯抗体SDS-聚丙烯酰胺凝胶明胶溶液聚-L-赖氨酸质粒 DNAGFP 融合载
定量PCR技术基本原理和方法以及PCR产物的检测与定量1
聚合酶链反应（polymerase chain reaction, PCR）是微量核酸扩增的有效工具，由于其灵敏、特异、快速等优点，在医学上已广泛应用与病毒、细菌病原体及遗传病、肿瘤的早期诊断。随着PCR技术的发展，特别是病毒或肿瘤的治疗监测、疾病的诊断、机体基因表达调控方面，不仅需要检测其存在
双转盘共聚焦技术：长时间活细胞3D动态观察和分析...1
一、ELISA和流式的痛点 单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅识别某一特定抗原表位的抗体，具有特异性强、灵敏度高、重复性好等众多优点。单克隆抗体技术的问世经历了人鼠嵌合单抗、人源化单抗阶段，这些工程改造抗体不仅为免疫学领域带来了一次革命，而且在生物医学的各个领域得到极广泛的应用。如今在临
三用紫外分析仪工作原理与技术指标
三用紫外分析仪采用不同波长的紫外光对DNA、RNA电泳凝胶样品进行观察拍照、检测蛋白质、核甘酸、，适用于核酸电泳分析、检测，PCR产物检测，DNA指纹图谱分析，纸层分析或薄层分析等。适用于核酸电泳、荧光的分析、检测， PCR 产物检测， DNA 指纹图谱分析，是开展 RFLP 研究， RAPD 产物
紫外分析仪工作原理
采用不同波长的紫外光对DNA、RNA电泳凝胶样品进行观察拍照、检测蛋白质、核甘酸、，适用于核酸电泳分析、检测，PCR产物检测，DNA指纹图谱分析，纸层分析或薄层分析等。适用于核酸电泳、荧光的分析、检测， PCR 产物检测， DNA 指纹图谱分析，是开展 RFLP 研究， RAPD 产物分析的
精密机械技术和光电技术显微维氏和努普硬度测试仪器
显微硬度计 该机器造型新颖，具有良好的可靠性，可操作性和直观性，是采用精密机械技术和光电技术的新型显微维氏和努普硬度测试仪器。 该机采用计算机软件编程，光学测量系统。通过软键输入，可选择维氏和努氏硬度的测量、能调节测量光源的强弱，能选择保荷时间，在LCD显示屏上能显示试验方法、试验力，通过
暗箱紫外分析仪的技术参数和技术性能
技术参数: 1.电源电压：220V 频率50HZ 2.上面折射紫外光源：短波254nm 长波365nm 3.上面折射紫外光源功率：6W 4.折射滤光片：70×200mm 5.底部透射光源：中波308nm 6.光源功率：90W ,15W×6 7.透射滤光片：150×200mm 8.灯
自动顶空气相色谱仪技术特点和技术指标
自动顶空气相色谱仪，通过大屏幕液晶中文显示器直观的显示出仪器参数，通过人性化软件操作界面，极大方便用户设定包括各路温度、程升、检测器、桥流等参数；直观地操作开关桥流，开启关闭控温，开启关闭程升和各个时间事件等功能。 自动顶空气相色谱仪 一、自动顶空气相色谱仪主要技术特点： 1、仪器采用中文
荧光显微镜的技术和拉曼光谱技术原理
环境水中石油类污染物的含量是反映水质的指标之一，本文采用三波长定量测试水中油含量，样品测试方便，数据准确。环境中水中的石油类来自工业废水和生活污水的污染。油类物质在水面形成油膜，影响了空气和水的气体交换；分散于水中以及吸附于颗粒上或以乳化状态存在于水中的油，被微生物分解时，将消耗水中溶氧，容易使
化学发光免疫分析技术和免疫荧光技术的区别
化学发光是利用化学反应产生的能量促使产生能级跃迁，从而发光，典型的如鲁米诺检测血迹；荧光是一种光致发光现象，必须提供光源去激发分子产生能级跃迁，进而发光。使用上述两种方法进行免疫分析时，其区别很明显，化学发光无需外加光源，背景干扰小；而荧光则需要外加光源，在垂直光源的方向上检测，生物样品中的蛋白质、
化学发光免疫分析技术和免疫荧光技术的区别
化学发光是利用化学反应产生的能量促使产生能级跃迁，从而发光，典型的如鲁米诺检测血迹；荧光是一种光致发光现象，必须提供光源去激发分子产生能级跃迁，进而发光。使用上述两种方法进行免疫分析时，其区别很明显，化学发光无需外加光源，背景干扰小；而荧光则需要外加光源，在垂直光源的方向上检测，生物样品中的蛋白质、
使用实时定量－PCR技术验证cDNA和差异显示PCR技术（一）
采用通过监测产物积累进行的实时反转录聚合酶链式反应（ RT － PCR ）可以用来验证基因表达的差异。我们在此报道了一种基于 SYBR Green I 染料进行的实时 PCR 定量方法并通过产物的融解曲线来确定在基因表达谱方法中确定的基因表达差异的重复性。因为 SYBR Green I
化学发光免疫分析技术和免疫荧光技术的区别
化学发光是利用化学反应产生的能量促使产生能级跃迁，从而发光，典型的如鲁米诺检测血迹；荧光是一种光致发光现象，必须提供光源去激发分子产生能级跃迁，进而发光。使用上述两种方法进行免疫分析时，其区别很明显，化学发光无需外加光源，背景干扰小；而荧光则需要外加光源，在垂直光源的方向上检测，生物样品中的蛋白质、
变性梯度凝胶电泳技术的主要应用和技术特点
DGGE/TGGE已广泛用于分析自然环境中细菌、蓝细菌, 古菌、微型真核生物、真核生物和病毒群落的生物多样性。这一技术能够提供群落中优势种类信息并同时分析多个样品，具有可重复和操作简单等特点, 适合于调查种群的时空变化, 并且可通过对条带的序列分析或与特异性探针杂交分析鉴定群落组成。DGGE和TGG
化学发光免疫分析技术和免疫荧光技术的区别
化学发光是利用化学反应产生的能量促使产生能级跃迁，从而发光，典型的如鲁米诺检测血迹；荧光是一种光致发光现象，必须提供光源去激发分子产生能级跃迁，进而发光。使用上述两种方法进行免疫分析时，其区别很明显，化学发光无需外加光源，背景干扰小；而荧光则需要外加光源，在垂直光源的方向上检测，生物样品中的蛋白质、
使用实时定量－PCR技术验证cDNA和差异显示PCR技术（二）
实时 RT-PCR 与 DNA 阵列结果的比较G3PDH 是在大多数细胞中表达的含量丰富的看家基因，但在某些条件下的表达发生改变（ 11 ），通过 DNA 阵列杂交发现， G3PDH 的转录本在亚克隆 20863 和 20861 中的表达相同。实时定量 RT-PCR 也发现在两个亚克隆中有着
DNA纤维荧光原位杂交技术技术的特点、分类和应用
FISH的分辨率取决于载体DNA的浓缩程度，如何提高分辨率一直是一个重要课题。Wiegant等和Heng等首先利用化学方法对染色体进行线性化，再以此为载体进行FISH，使其分辨率显著提高，这就是最初的纤维-FISH。纤维-FISH应用各种不同技术，将待研究细胞的全部遗传物质即DNA在载玻片上制备出D
化学发光免疫分析技术和免疫荧光技术的区别
化学发光是利用化学反应产生的能量促使产生能级跃迁，从而发光，典型的如鲁米诺检测血迹；荧光是一种光致发光现象，必须提供光源去激发分子产生能级跃迁，进而发光。 使用上述两种方法进行免疫分析时，其区别很明显，化学发光无需外加光源，背景干扰小；而荧光则需要外加光源，在垂直光源的方向上检测，生物样品中的蛋白质
技术基础篇：侧向流层析技术的分类和优缺点
在POCT的技术中，应用最为广泛的是侧向流层析技术也是lateral flow assay.分类：按照检测物的类别2大类分为免疫层析和核酸层析，在免疫 层析中分为抗体检测和其他检测（抗原、激素等）2个子类。也有按照出结果的方式不同，分为定性和定量两种。还有根据显色物或信号物质不同分为：有色侧流层析、
化学发光免疫分析技术和免疫荧光技术的区别
化学发光是利用化学反应产生的能量促使产生能级跃迁，从而发光，典型的如鲁米诺检测血迹；荧光是一种光致发光现象，必须提供光源去激发分子产生能级跃迁，进而发光。使用上述两种方法进行免疫分析时，其区别很明显，化学发光无需外加光源，背景干扰小；而荧光则需要外加光源，在垂直光源的方向上检测，生物样品中的蛋白质、
HLA基因分型方法：PCR－RFLP法
PCR－RFLP法1）提取细胞总DNA方法同前。 2）PCR扩增引物的设计1．引物长度一般为15～30bp，G＋C含量应在45％～55％之间。2．应避免连续出现4个以上的单一碱基。3．不能含有自身互补序列。4．两个引物之间不应有多于4个的互补或同源碱基，不然会形成引物二聚体。5．与非特异扩增序列的同
阵列构筑技术的原理和特点
基于氧化铝模板，通过气相法、电沉积、原位溶胶－凝胶等技术，构筑了各种纳米线、纳米管、异质结纳米线等的有序排列的阵列体系。发展了催化诱导CVD技术，在孔内预先置入金属纳米颗粒作为催化剂，通过CVD过程沿孔内生长出单晶Si，GaN,等纳米线阵列体系；发展了基于模板的电沉积技术，成功地获得了一系列铁磁－非