RAPD分子标记的实验原理及操作流程
RAPD标记RAPD技术的全称是随机扩增多态性DNA(Random Amplified Polymorphic DNA)，此技术建立于PCR基础之上，使用一系列具有10个左右碱基的单链随机引物，对基因组的DNA全部进行PCR扩增，以检测多态性。由于整个基因组存在众多反向重复序列，因此须对每一随机引物单独进行PCR，单一引物与反向重复序列结合，使重复序列之间的区域得以扩增。引物结合位点 DNA序列的改变以及两扩增位点之间DNA碱基的缺失、插入或置换均可导致扩增片段数目和长度的差异，经琼脂糖凝胶电泳分离后通过EB染色以检测DNA片段的多态性。 一、实验材料 不同来源的DNA(30-50ng/ul)。 二、实验设备 PCR仪，PCR管或硅化的0.5ml eppendorf管，电泳装置，凝胶成像仪。 三、试剂 1、RAPD引物：购买成品或根据赛百盛（SBS）公司设计的RAPD引物序列（ht......阅读全文
RAPD分子标记的实验原理及操作流程
RAPD标记RAPD技术的全称是随机扩增多态性DNA(Random Amplified Polymorphic DNA)，此技术建立于PCR基础之上，使用一系列具有10个左右碱基的单链随机引物，对基因组的DNA全部进行PCR扩增，以检测多态性。由于整个基因组存在众多反向重复序列，因此须对每一随机
ISSR分子标记的实验原理及操作流程
ISSR（inter-simple sequence repeat）标记是一种类似RAPD，但利用包含重复序列并在3’或5’锚定的单寡聚核酸引物对基因组进行扩增的标记系统，即用SSR引物来扩增重复序列之间的区域。其原理具体是，ISSR标记根据生物广泛存在SSR的特点，利用在生物基因组常出现的SSR本
RAPD标记技术的原理
RAPD标记（Random amplifiedpolymorphim DNA , RAPD）是由美国人Williams和Welsh等于1990年利用PCR技术发展起来的一种DNA多态性标记。它是利用随机引物对目的基因组DNA进行PCR扩增，产物经电泳分离后显色，分析扩增产物DNA片段的多态性，此即反
RAPD分析的原理及操作技术
1 目的分子标记是一类建立在分子水平上的遗传标记，它同样具有遗传标记的两个特点，即可遗传性和可识别性。广义的分子标记包括同工酶和DNA分子标记两类，狭义的分子标记则仅指后者。DNA分子标记通常是一些小分子量的DNA片段（几十到2000bp左右），它们大量存在于真核生物的基因组内，能够通过特定的技术和
ISSR（intersimple－sequence－repeat）分子标记的实验原理及操作
ISSR标记ISSR（inter-simple sequence repeat）标记是一种类似RAPD，但利用包含重复序列并在 3’或5’锚定的单寡聚核酸引物对基因组进行扩增的标记系统，即用SSR引物来扩增重复序列之间的区域。其原理具体是，ISSR标记根据生物广泛存在 SSR的特点，利用在生
RAPD标记技术
实验概要运用随机引物扩增寻找多态性DNA片段可作为分子标记。这种方法即为RAPD(randomly amplifiled polymorphic DNA,随机扩增的多态性DNA.)该RAPD技术建立于PCR基础上，它是利用一系列(通常数百个)不同的随机排列碱基顺序的寡聚核苷酸单链(通常为十聚体)
分子标记—AFLP原理和操作步骤
AFLP可用于：（1）构建遗传连锁图谱；（2）利用AFLP快速鉴别与目的基因紧密连锁的分子标记；（3）AFLP辅助的轮回选择育种；（4）研究基因表达与调控；（5）分类和进化研究；（6）甲基化研究等。实验方法原理AFLP是通过PCR反应先把酶切片段扩增，然后把扩增的酶切片段在高分辨率的顺序分析胶上进行
分子标记——AFLP原理和操作步骤
一、原理AFLP也是通过限制性内切酶片段的不同长度检测DNA多态性的一种DNA分子标记技术。但AFLP是通过PCR反应先把酶切片段扩增,然后把扩增的酶切片段在高分辨率的顺序分析胶上进行电泳,多态性即以扩增片段的长度不同被检测出来。实验中酶切片段首先与含有与其共同粘末端的人工接头连接,连接后的粘末端顺
分子标记——AFLP原理和操作步骤
一、原理AFLP也是通过限制性内切酶片段的不同长度检测DNA多态性的一种DNA分子标记技术。但AFLP是通过PCR反应先把酶切片段扩增，然后把扩增的酶切片段在高分辨率的顺序分析胶上进行电泳，多态性即以扩增片段的长度不同被检测出来。实验中酶切片段首先与含有与其共同粘末端的人工接头连接，连接后的粘末端顺
分子标记—AFLP原理和操作步骤
实验方法原理 AFLP是通过PCR反应先把酶切片段扩增，然后把扩增的酶切片段在高分辨率的顺序分析胶上进行电泳，多态性即以扩增片段的长度不同被检测出来。实验中酶切片段首先与含有与其共同粘末端的人工接头连接，连接后的粘末端顺序和接头顺序就作为以后
分子标记方法：AFLP原理和操作步骤
AFLP原理：AFLP也是通过限制性内切酶片段的不同长度检测DNA多态性的一种DNA分子标记技术。但AFLP是通过PCR反应先把酶切片段扩增，然后把扩增的酶切片段在高分辨率的顺序分析胶上进行电泳，多态性即以扩增片段的长度不同被检测出来。实验中酶切片段首先与含有与其共同粘末端的人工接头连接，连接后的粘
RAPD操作要点
一、 材料 不同来源的DNA(50ng/ul)。 二、设备 PCR仪，PCR管或硅化的0.5ml eppendorf管，电泳装置。 三、试剂 1、随机引物(10mer) (5umol/L)：购买成品。 2、Taq酶：购买成品。 3、10xPCR 缓冲液：配方见第八章。 4
RFLP和RAPD技术原理和操作步骤
原理：DNA分子水平上的多态性检测技术是进行基因组研究的基础。RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphism,限制片段长度多态性)已被广泛用于基因组遗传图谱构建、基因定位以及生物进化和分类的研究。RFLP是根据不同品种（个体）基因组的限制性内切酶的酶切位点
短程分子蒸馏的操作流程
操作流程： 1、 安装进样器（顺时针旋紧进样器）、一、二、三级接收瓶，打开 冷却水循环按钮； 2、 打开刮膜器转子，调整到指定转速（不得超过400 r/min）； 3、 在液氮达到要求液位（不得少于冷凝柱体积1/2）后打开真空泵； 4、 待压力不再下降，调整真空泵微调阀（不得低于0.5 mbar
短程分子蒸馏的操作流程
操作流程： 1、 安装进样器（顺时针旋紧进样器）、一、二、三级接收瓶，打开 冷却水循环按钮； 2、 打开刮膜器转子，调整到转速（不得超过400 r/min）； 3、 在液氮达到要求液位（不得少于冷凝柱体积1/2）后打开真空泵； 4、 待压力不再下降，调整真空泵微调阀（不得低于0.5 mbar）；
分子实验方法7:－RFLP和RAPD技术
第七章 RFLP和RAPD技术第一节 概 述 DNA分子水平上的多态性检测技术是进行基因组研究的基础。RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphism,限制片段长度多态性)已被广泛用于基因组遗传图谱构建、基因定位以及生物进化和分类的研究。RFLP是根据不同
高温电炉实验操作规则及流程
1．开炉前应检查煤气管道阀门密封性和煤气管路上的压力不能低于规定值。2．空炉试验推杆机构、拉杆机构以及提升机构工作情况。3．把压紧弹簧松开到规定的尺寸范围。4．调节好水封的水位，打开通水封排出燃烧管的阀门，关闭通水封的阀门。5．将进料端的炉门关闭，打开出料端的炉门察看，当煤油喷出形成雾状流动的方向正
AFLP分子标记实验
其基本原理是：以PCR(聚合酶链式反应)为基础，结合了RFLP、RAPD的分子标记技术。把DNA进行限制性内切酶酶切，然后选择特定的片段进行PCR扩增(在所有的限制性片段两端加上带有特定序列的“接头”，用与接头互补的但3-端有几个随机选择的核苷酸的引物进行特异PCR扩增，只有那些与3-端严格配对的片
短程分子蒸馏仪的工作原理及流程分析
短程分子蒸馏仪的工作原理及流程分析当液体混合物沿加热板流动并被加热，轻、重分子会逸出液面而进入气相，由于轻、重分子的自由程不同。因此，不同物质的分子从液面逸出后移动距离不同，若能恰当地设置一块冷凝板，则轻分子达到冷凝板被冷凝排出，而重分子达不到冷凝板沿混合液排出。物料从短程分子蒸馏仪的顶部加入，经转
短程分子蒸馏仪的工作原理及流程分析
短程分子蒸馏仪的工作原理及流程分析当液体混合物沿加热板流动并被加热，轻、重分子会逸出液面而进入气相，由于轻、重分子的自由程不同。因此，不同物质的分子从液面逸出后移动距离不同，若能恰当地设置一块冷凝板，则轻分子达到冷凝板被冷凝排出，而重分子达不到冷凝板沿混合液排出。物料从短程分子蒸馏仪的顶部加入，经转
分子蒸馏设备工作原理及工作流程
分子蒸馏设备工作原理： 分子蒸馏设备是一种特殊的液--液分离技术，它不同于传统蒸馏依靠沸点差分离原理，而是靠不同物质分子运动平均自由程的差别实现分离。 当液体混合物沿加热板流动并被加热，轻、重分子会逸出液面而进入气相，由于轻、重分子的自由程不同，因此，不同物质的分子从液面逸出后移动距离不
暗室实验的操作流程
1.新鲜配制1-2ml工作液(A液与B液1:1或1:40混合配制)2. 进入暗室,在黑暗的条件下,加入1μl未稀释的二抗(HRP连接物)3. 混合后,可立即在暗室中观察到蓝色光
ELISpot实验操作流程
ELISPOT全名为酶联免疫斑点检测，英文：Enzyme-linked Immunospot Assay。它结合了细胞培养技术与酶联免疫吸附技术（即ELISA技术），能够在单细胞水平检测细胞因子的分泌情况。其技术原理，一句话概括就是：用抗体捕获培养中的细胞分泌的细胞因子，并以酶联斑点显色的方式将其表
实验电炉操作流程
1. 本仪器额定功率为12千瓦，高可控温度为1000度，升温速率必须小于120度/分钟（否则功率过大，影响仪器正常使用）。 2. 箱式电阻炉配套使用的电炉温度控制器可直接调控箱式电阻炉的电源开关、温度控制等测量参数。打开绿色电源开关【ON】,开关变绿，仪器右边的仪表盘上的【指示】灯亮，通过左右拨动
智能COD消解仪的工作原理及操作流程
一、根据COD快速消解分光光度法，利用COD标准浓度溶液，绘制出吸光度与COD值之间的标准曲线。二、学习COD快速消解分光光度法的原理，掌握其测定方法。在已知浓度的COD标准溶液试样中，加入已知量的重铬酸钾溶液，在强硫酸介质中，以硫酸银作为催化剂，经过高温消解后，用分光光度法可以测定COD值。1.1
实验室乳化机的操作及流程
各项准备工作完毕以后，接通电源，便可按规定要求进行工作。运转部件有主锅搅拌系统、主锅均质系统，主锅升降系统，副锅搅拌系统，真空泵系统。控制通过面板上的按钮进行，可控制照明灯的照明与熄灭，控制主锅搅拌的运转，控制主锅均质的运转，控制副锅搅拌的运转，控制真空泵的运转以及主副锅的加热。 ①打开电源→
消解仪的实验操作流程
1.试验前准备： 检查仪器运行正常。检查转子是否干净，容器是否已经清洗。 2.称样： 用万分之一天平准确称取制备好的样品，一般称样量为0.05-0.5g，(根据试验情况确定称样量)。称样量取原则与注意事项： ①确保无样品粘附于内管与密封或O形圈处； ②未知样品初次试验称样量控制在0.1
银染实验的操作流程
实验目的检测聚丙烯酰胺凝胶中的蛋白质。实验原理在碱性条件下，用甲醛将蛋白带上的硝酸银（银离子）还原成金属银，以使银颗粒沉积在蛋白带上。染色的程度与蛋白中的一些特殊的基团有关，不含或者很少含半胱氨酸残基的蛋白质有时候呈负染。银染的详细机制还不是非常清楚。试剂：乙醇、冰醋酸（纯乙酸）、乙酸钠、硫代硫酸钠
箱式实验电炉操作流程
1. 本仪器额定功率为12千瓦，高可控温度为1000度，升温速率必须小于120度/分钟（否则功率过大，影响仪器正常使用）。 2. 箱式电阻炉配套使用的电炉温度控制器可直接调控箱式电阻炉的电源开关、温度控制等测量参数。打开绿色电源开关【ON】,开关变绿，仪器右边的仪表盘上的【指示】灯亮，通过左右拨动
实验室操作流程
一、目的： 本规程旨在为微生物实验室操作提供一个标准化规程； 二、适用范围： 微生物实验室； 三、责任人： 实验室、微生物检测员； 四、安全注意事项： 严格遵循无菌操作，防止微生物污染；操作人员进入微生物实验室应先关掉紫外灯。 五、微生物实验室标准化操作规程： 1.微生物实验室