PCR-RFLP分析技术(PolymeraseChainReaction–RestrictionFr...
【实验目的】1.熟悉PCR—RFLP分析技术原理及实验步骤。2.掌握琼脂糖凝胶电泳检测方法。3.了解PCR— RFLP在遗传病基因诊断中的作用。【实验原理】聚合酶链式反应(PCR)是模拟体内DNA复制条件在体外酶促合成特异DNA片段的循环反应,可使目的DNA片段得以迅速扩增。其主要步骤是:将待扩增的模板DNA置于高温(约93℃-95℃)下使之变性解链;人工合成的两个寡核苷酸引物在低温(约50℃-70℃)下分别与目的DNA片段两侧的互补序列复性结合;引物在DNA聚合酶作用(约70℃-75℃)下沿模板按5’→3’方向延伸,合成目的DNA片段的新互补链。如此经过n个周期,理论上扩增2n倍,一般PCR经30-40周期后可获得百万倍以上的目的DNA。聚合酶链式反应—限制性片段长度多态(PCR— RFLP)分析技术是在PCR技术基础上发展起来的。DNA碱基置换正好发生在某种限制性内切酶识别位点上,使酶切位点增加或者消失,利用这一酶切性质......阅读全文
PCR-RFLP分析技术(Polymerase-Chain-Reaction–Restriction-Fr...
【实验目的】1.熟悉PCR—RFLP分析技术原理及实验步骤。2.掌握琼脂糖凝胶电泳检测方法。3.了解PCR— RFLP在遗传病基因诊断中的作用。【实验原理】聚合酶链式反应(PCR)是模拟体内DNA复制条件在体外酶促合成特异DNA片段的循环反应,可使目的DNA片段得以迅速扩增。其主要步骤是:将待扩增的
定量PCR(Polymerase-Chain-Reaction)技术
定量PCR(Polymerase Chain Reaction)技术有广义概念和狭义概念。广义概念的定量PCR技术是指以外参或内参为标准,通过对PCR终产物的分析或PCR过程的监测,进行 PCR起始模板量的定量。广义概念下的定量PCR技术可以分为五种类型:(1)外参法+终产物分析。所谓“外参法”是指
Polymerase-Chain-Reaction-(PCR)-cont.
Polymerase Chain Reaction (PCR) cont.Choice of Polymerases for PCROne of the important advances which allowed development of PCR was the availability
Polymerase-Chain-Reaction-(PCR)-to-Amplify-rRNA-Gene-Fragment
Polymerase Chain Reaction (PCR) to Amplify rRNA Gene FragmentPrepare sufficient master mix for both partners (45 mL/50 mL reaction)10 mL 10x PCR buffe
Polymerase-Chain-Reaction-(PCR)-to-Amplify-rRNA-Gene-Fragment
Polymerase Chain Reaction (PCR) to Amplify rRNA Gene FragmentPrepare sufficient master mix for both partners (45 mL/50 mL reaction)10 mL 10x PCR buffe
酶切反应(Setting-Up-a-Restriction-Endonuclease-Reaction)
一、 建立一个标准的酶切反应目前大多数研究者遵循一条规则,即10个单位的内切酶可以切割1μg不同来源和纯度的DNA。通常,一个50μl的反应体系中,1μl的酶在1X NEBuffer终浓度及相应温度条件下反应1小时即可降解1μg已纯化好的DNA。如果加入更多的酶,则可相应缩短反应时间;如果减少酶
PCR基因扩增仪简介
聚合酶链式反应简称PCR(英文全称:Polymerase Chain Reaction)聚合酶链式反应 聚合酶链式反应,简称PCR。聚合酶链式反应,其英文Polymerase Chain Reaction(PCR)是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法,由高温变性、低温退火及适温延伸等几步反应
Complete-PCR-Guide
In the polymerase chain reaction (PCR), a thermostable DNA polymerase amplifies DNA that is flanked by known sequences. The known sequences correspond
PCR-Primer-Design(三)
References Albert, J., and Fenyo, E.M. 1990. Simple, sensitive and specific detection of human immunodeficiency virus type 1 in clinical speci
PCR产物纯化方法
Purification of PCR Products in Preparation for CloningJoseph SambrookPeter Maccallum Cancer Institute and The University of Melbourne, AustraliaDavid
PCR的原理
聚合酶链式反应简称PCR(英文全称:Polymerase Chain Reaction), 聚合酶链式反应简称PCR。聚合酶链式反应,其英文Polymerase Chain Reaction(PCR)是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法,由高温变性、低温退火(复性)及适温延伸等几步反应组成一个周期
逆转录聚合酶链反应(RTPCR,rtpcr)
逆转录-聚合酶链反应 (Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)可以:(1)分析基因的转录产物;(2)获取目的基因;(3)合成cDNA探针;(4)构建RNA高效转录系统。实验方法原理逆转录-聚合酶链反应 (Reverse Tran
PCR-Primer-Design(一)
Molecular Biology Today 2001. 2(2): 27-32. Vinay K. Singh and Anil Kumar Bioinformatics Sub-centr
中和反应(neutrallzation-reaction)技术
病毒或毒素与相应的抗体结合后,失去对易感动物的致病力,谓之中和试验。本试验主要用于:(1)从待检血清中检出抗体,或从病料中检出病毒,从而诊断病毒性传染病;(2)用抗毒素血清检查材料中的毒素或鉴定细菌的毒素类型;(3)测定抗病毒血清或抗毒素效价;(4)新分离病毒的鉴定和分型,中和试验不仅可在易感的实验
Preparation-of-nucleic-acid-probes
Preparation of nucleic acid probesIn standard nucleic acid hybridization assays the probe is labeled in some way. Nucleic acid probes may be made as s
IHC-Protocol-for-Fr...
实验概要The method provides a IHC protocol for free floating brain sections.实验步骤1. Coronal 30-40 µm sections cut on a freezing microtome. Sections colle
沉淀反应技术(Precipitation-reaction-technique)
一、 概述 可溶性抗原(如细菌浸出液、含菌病料浸出液、血清以及其他来源的蛋白质、多糖质、类脂体等)与其相应的抗体相遇后,在电解质参与下,抗原抗体结合形成白色絮状沉淀,出现白色沉淀线,此种现象称为沉淀反应。沉淀反应中的抗原叫沉淀原(precipitinogen),与沉淀原发生反应的抗体称为沉淀
梯度PCR的应用领域
分子生物学、医学、食品工业、司法科学、生物技术、环境科学、微生物学、临床诊断、流行病学、遗传学、基因芯片、基因检测、基因克隆、基因表达等领域以聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction , PCR)为特征的、以检测DNA/RNA为目的的各种病原体检测及基因分析。
PCR基因扩增仪的用途
西安天隆科技有限公司DTC-3G型PCR基因扩增仪适用于分子生物学、医学、食品工业、司法科学、生物技术、环境科学、微生物学、临床诊断、流行病学、遗传学、基因芯片、基因检测、基因克隆、基因表达等领域以聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction , PCR)为特征的、以检测D
Restriction-Digest
Materials:Restriction enzymes of choice, such as BamH1 and EcoRIRestriction enzyme reaction buffer, such as MULTI-CORE (TM) (Promega)70 % Ethanol100 %
Restriction-digestion
Restriction digestionRestriction enzyme digestions are performed by incubating double-stranded DNA molecules with an appropriate amount of restriction
RTPCR技术的定义
RT-PCR,反转录·聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR)是将RNA的反转录(reverse transcription )和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。
什么是PCR聚合酶链式反应-?
PCR即聚合酶链式反应 (Polymerase Chain Reaction,以下简称PCR),是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术,可理解为生物体外特殊的DNA复制。
PCR
PCRPolymerase Chain Reaction1) Add the following to a microfuge tube:10 ul reaction buffer1 ul 15 uM forward primer1 ul 15 uM reverse primer1 ul templ
沉淀反应技术(Precipitation-reaction-technique)(1)
一、 概述可溶性抗原(如细菌浸出液、含菌病料浸出液、血清以及其他来源的蛋白质、多糖质、类脂体等)与其相应的抗体相遇后,在电解质参与下,抗原抗体结合形成白色絮状沉淀,出现白色沉淀线,此种现象称为沉淀反应。沉淀反应中的抗原叫沉淀原(precipitinogen),与沉淀原发生反应的抗体称为沉淀素(pre
沉淀反应技术(Precipitation-reaction-technique)(2)
2.取试管5支(5mm×50mm)置于试管架上,编号。第1、2试管内加炭疽沉淀血清,第3、4试管内加正常血清,第5管内加待检抗原,分别用毛细滴管加至4mm~5mm。3.第1、4、5试管轻轻叠加等量缓冲液,第2、3试管轻轻叠加等量待检抗原。为防止上下两界面破坏,可将小试管从试管架取出,微倾斜,沿试管壁
Realtime-PCR
实验概要The exponential amplification via reverse transcription polymerase chain reaction provides for a highly sensitive technique in which a very low
Quick-and-reliable-method-to-analyze-meiotic-segregation-patterns
It is well known that multiple auxotrophic markers impede fruiting in Coprinus cinereus. Restriction fragment length polymorphisms have been used to a
RNAi实验中双链短RNA(dsRNA)制备过程
RNAi 实验中双链短RNA(dsRNA)制备过程,本实验方法来自于加州大学Jim教授实验,很权威!Procedure for the Generation of dsRNA for use in RNAi1. Design polymerase chain reaction (PCR ) prim
聚合酶链[式]反应
中文名称聚合酶链[式]反应英文名称polymerase chain reaction;PCR定 义通过DNA互补双链解链、退火和聚合延伸的多次循环来扩增DNA特定序列的方法。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)