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酶标抗体和酶抗酶复合物的应用于斑点ELISA(dotELISA)

操作简便,不需要特殊仪器(酶联检测仪)。【试剂及配制】(1) 稀释液:为1%A的0.01mol/L pH7.4的。(2) 封闭液:为2% A的0.01mol/L pH7.4的。(3) 洗涤液:为0.5% Tween 20的0.01mol/L pH7.4的。(4) 底物溶液:见附录。【操作方法】(1) 取适当大小NC膜(0.3mm、0.45mm和0.65mm均可),用铅笔画好5mm´5mm的加样方格,并作好相应标记(2) 将NC膜浸入0.01mol/L pH7.4的中15~30min,取出用滤纸吸干;(3) 将标准抗原和待检样本点加于NC膜,室温干燥;若估计待检样本抗原量较少,可重复点加。有条件者可用dot-blot点膜器点样;(4) 将NC膜浸入封闭液中振摇封闭30min。此步骤至关重要,不可省略;(5) 将NC膜浸入洗涤液中振荡洗涤3次,每次30min,取出用滤纸吸干;(6) 将NC膜浸入酶标抗体溶液中,振摇反应30min;(......阅读全文

酶标抗体和酶-抗酶复合物的应用于斑点ELISA(dot-ELISA)

操作简便,不需要特殊仪器(酶联检测仪)。【试剂及配制】(1) 稀释液:为1%A的0.01mol/L pH7.4的。(2) 封闭液:为2% A的0.01mol/L pH7.4的。(3) 洗涤液:为0.5% Tween 20的0.01mol/L pH7.4的。(4) 底物溶液:见附录。【操作方法】(1)

酶标抗体和酶-抗酶复合物的应用于细胞ELISA

应用酶标抗体进行免疫测定的方法较多,非均相酶免疫测定是目前应用最广泛的一类酶免疫检测技术,其中以酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent aay,ELISA)最常用,它可用于测定抗体,也可测定可溶性抗原及细胞抗原。而酶-抗酶复合物多用于免疫组织化学。以下

酶标抗体和酶-抗酶复合物的应用于双抗体夹心法ELISA

该法多用于检测多价大分子抗原,但不能用于检测半抗原等小分子物质。 【试剂及配制】 (1) 包被液(pH 9.6 碳酸盐缓冲液) Na2CO3 0.16g NaHCO3 0.29g 蒸馏水加至 100ml (2)稀释液(pH 7.4 -Tween 20) KH2PO4 0.

酶标抗体和酶-抗酶复合物的应用于免疫酶组化技术

酶标抗体和酶-抗酶复合物的应用于免疫酶组化技术(APAAP法)【基本原理】 碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶桥联酶染色法(APAAP法),是一种免疫组化技术。用兔抗鼠IgG起搭桥作用,其中一个Fab段连接McAb ,另一个Fab段连接APAAP复合物,再通过复合物中的碱性磷酸酶催化底物显色来判断

斑点-酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA)

Hawkes等(1982)根据某些固相载体具有较强吸附蛋白质能力的特点,研究建立了斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA),目前在医学及兽医工作中得以广泛应用。该试验以硝酸纤维素薄膜(NC)作固相载体,代替了聚苯乙烯反应板,从而克服了ELISA方法中包被好的酶标板保存运送不便及检测需仪器等缺点,

人纤溶酶-抗纤溶酶复合物(PAP)ELISA试剂盒

人纤溶酶-抗纤溶酶复合物(PAP)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗人 PAP 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 PAP与单抗结合,加入生物素化的抗人PAP,形

大鼠凝血酶-抗凝血酶复合物(TAT)ELISA检测法

大鼠凝血酶-抗凝血酶复合物(TAT)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 TAT 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的TAT与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠TAT,形成免疫

ELISA方法的基本类型、用途及操作程序

酶联免疫吸附试验 (以下简称ELISA) :是酶免疫测定技术中应用最广的技术。其基本方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体 ( 聚苯乙烯微量反应板 ) 表面,使酶标记的抗原-抗体反应在固相表面进行,用洗涤法将液相中的游离成分洗除。常用的 ELISA 法有双抗体夹心法和间接法,前者用于检测大分子抗原,

ELISA方法的基本类型、用途及操作程序(二)

4、竞争ELISA     此法主要用于测定小分子抗原及半抗原,其原理类似于放射免疫测定。其基本程序为:① 抗体包被 → 4℃过夜,洗涤三次、抛干② 加入待检抗原及一定量的酶标抗原(对照孔仅加酶标抗原)→ 37℃ 60分钟,洗涤三次、抛干③ 加底物液 → 37℃ 20分

小鼠凝血酶-抗凝血酶复合物(TAT)ELISA试剂盒

小鼠凝血酶-抗凝血酶复合物(TAT)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗小鼠 TAT 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 TAT与单抗结合,加入生物素化