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酶标抗体的质量鉴定与保存

1. 酶活性和抗体效价测定 采用双向免疫扩散法(稀释抗体)和DAB-H2O2显色反应检测结合物中抗体效价和免疫沉淀线中的酶促反应。 2. 酶量和IgG量 酶量(mg/ml)=OD403´0.4 IgG量(mg/ml)=(OD280-OD402´0.42)´0.94´0.62 其中,0.42为酶蛋白本身(0.3)及结合戊二醛后增加的OD值,0.94为抗体蛋白与醛化酶结合后,OD280约增加6%,故乘以0.94。兔IgG的OD280=1.0时为0.62. 过碘酸钠标记法IgG量(mg/ml)=(OD280-OD402´0.3)´0.94´0.62 标记率= OD403/ OD280=0.3-0.6,即一个抗体分子上结合1-2个HRP分子.标记率可以大于0.6-0.9。OD403/ OD280=0.4,约相当于E/P=1.0。 酶标抗体的保存 经鉴定合格的酶标抗体,由于硫化物及叠氮化物等可与酶......阅读全文

酶标抗体的质量鉴定与保存

1.酶活性和抗体效价测定: 采用双向免疫扩散法(稀释抗体)和DAB-H2O2 显色反应检测结合物中抗体效价和免疫沉淀线中的酶促反应。 2.酶量和IgG量: 酶量(mg/ml)=OD403 ′0.4 IgG量(mg/ml)=(OD280- OD402 ′0.42)′0.94

酶标抗体的质量鉴定与保存

1. 酶活性和抗体效价测定采用双向免疫扩散法(稀释抗体)和DAB-H2O2 显色反应检测结合物中抗体效价和免疫沉淀线中的酶促反应。2. 酶量和IgG量酶量(mg/ml)=OD403 ′0.4IgG量(mg/ml)=(OD280- OD402 ′0.42)′0.94′0.62其中,0.42为酶蛋白本身

酶标抗体的质量鉴定与保存

1. 酶活性和抗体效价测定 采用双向免疫扩散法(稀释抗体)和DAB-H2O2显色反应检测结合物中抗体效价和免疫沉淀线中的酶促反应。 2. 酶量和IgG量 酶量(mg/ml)=OD403´0.4 IgG量(mg/ml)=(OD280-OD402´0.42)´0.94´0.62

酶标抗体结合物的纯化

在酶标记的溶液中,出现的是各种交联物的混合物,有酶-抗体、酶-抗体-酶、抗体-抗体、酶-酶,甚至还有游离的酶和抗体。在这中间,除了抗体-酶和酶-抗体-酶外,其它都应该给予除去。1、50%饱和硫酸铵沉淀法。此法只能除去游离的酶及酶-酶聚合体。而不能除去其它不需要者。但是此法对酶标抗体的损耗少。2、过S

酶标抗体标记效果测定

酶标抗体标记效果测定:测定内容包括酶和抗体活性、结合物中酶含量和IgG含量、酶与IgG摩尔比值以及结合率。

抗血清的鉴定与保存-生化检验

抗血清的鉴定与保存:一、特异性抗体的鉴定1.抗体特异性鉴定:常采用双向免疫扩散法。2.抗体的效价的鉴定:常采用双向免疫扩散法。一是仅稀释抗血清,与同一浓度抗原反应;另一种是抗血清、抗原同时稀释作棋盘滴定。3.抗体的纯度鉴定:常用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法鉴定医|学教育网整理。二、抗血清的保存动物血

RNA质量检测与鉴定

方法一、检测RNA溶液的吸光度280、320、230、260nm下的吸光度分别代表了核酸、背景(溶液浑浊度)、盐浓度和蛋白等有机物的值。一般的,我们只看OD260/OD280(Ratio,R)。1.82.0时,我们认为RNA中蛋白或者时其他有机物的污染是可以容忍的,不过要注意,当你用Tris作为缓冲

实验室准则:抗体质量的金标

  几乎所有实验室都会用到抗体,抗体不仅是生命科学研究的重要工具,在免疫学诊断领域也是不可或缺的。市面上的抗体种类繁多同时也良莠不齐,由于缺乏评估抗体质量的标准方法,人们过去只能依赖于生产厂家的信用。   做过免疫荧光、免疫沉淀(IP)或者Western blot实验的人都知道,抗体优劣对实验结果有

抗体的保存

腹水:腹水重组后可加入少量叠氮纳等来阻止细菌生长。腹水应当冻存。单抗最好能够小包装保存以避免反复冻融。若要保存较长时间,则不要在4℃。和血清不同,腹水中含有蛋白酶,会使抗体效价下降,因此加入蛋白酶抑制剂可以选择。纯IgG:不要稀释抗体后来保存,除非加入羊血清,BSA等后。IgG会和玻璃,塑料等粘附。

抗体的保存

一、腹水 腹水重组后可加入少量叠氮纳等来阻止细菌生长。腹水应当冻存。单抗最好能够小包装保存以避免反复冻融。若要保存较长时间,则不要在4℃。和血清不同,腹水中含有蛋白酶,会使抗体效价下降,因此加入蛋白酶抑制剂可以选择。 二、纯IgG 不要稀释抗体后来保存,除非加入羊血清,BSA等后。IgG会和玻璃,塑