组织固定

一、固定的目的和意义活体组织一旦停止血液循环和物质代谢就会因物质代谢障碍产生一系列的生物化学和组织化学改变,并导致形态学上可见的细胞器变化和细胞组织的形态改变直至腐 败自溶。固定的目的就是要通过使用化学和物理的方法,尽可能地保存组织细胞离体时具有的生理和病理形态结构及生物化学和免疫化学成分。良好的固定是制作优秀病理切片的基础,也是特殊染色、组织化学、免疫组织化学和组织原位分子杂交等技术方法赖以成功的基础。因此,在病理技术工作中必须高度重视固定的质量。二、组织固定的注意事项1.及时取材:由于甲醛对组织的平均穿透速度只有0.8 mm/h,因此手术切除的送检标本应及时切开进行取材,以便保证重要的镜检部位能及时地得到固定。2.及时固定:完成取材的组织块应立即投入固定液以便尽可能地保存组织细胞的形态结构和抗原性。3.液量充分:一般情况下要求固定液的量应为组织体积的6~10倍。4.适度固定:现代固定的要求是,在良好保存组织细胞形态结构的......阅读全文

酶固定化技术固定化方法交联法

交联法是用多功能试剂进行酶蛋白之间的交联,使酶分子和多功能试剂之间形成共价键,得到三向的交联网架结构,除了酶分子之间发生交联外,还存在着一定的分子内交联。多功能试剂制备固定化酶方法可分为:( 1) 单独与酶作用;( 2) 酶吸附在载体表面上再经受交联;( 3) 多功能团试剂与载体反应得到有功能团的载

酶固定化技术固定化方法吸附法

吸附法是利用物理吸附法,将酶固定在纤维素、琼脂糖等多糖类或多孔玻璃、离子交换树脂等载体上的固定方式。显著特点是:工艺简便及条件温和,包括无机、有机高分子材料,吸附过程可同时达到纯化和固定化;酶失活后可重新活化,载体也可再生。但要求载体的比表面积要求较大,有活泼的表面。

什么是固定液?固定液的使用要求?

一般是一种高沸点的有机物的液膜,通过对不同组份的不同分子间的作用,使组份在色谱柱中得到分离。对气相色谱用的固定液,一般有如下几点要求:1、在操作温度下蒸气压低,热稳定性好,与被分析物理或载气不产生不可逆反应;2、在操作温度下呈液态,而且粘度愈低愈好。物质在高粘度的固定液中传质速度慢,柱效率因而降低。

酶固定化技术固定化方法包埋法

包埋固定化法是把酶固定聚合物材料的格子结构或微囊结构等多空载体中,而底物仍能渗入格子或微囊内与酶相接触。这个方法比较简便,酶分子仅仅是被包埋起来,生物活性被破坏的程度低,但此法对大分子底物不适用。1) 网格型将酶或包埋在凝胶细微网格中,制成一定形状的固定化酶,称为网格型包埋法。也称为凝胶包埋法。2)

酶固定化技术固定化方法吸附法

吸附法是利用物理吸附法,将酶固定在纤维素、琼脂糖等多糖类或多孔玻璃、离子交换树脂等载体上的固定方式。显著特点是:工艺简便及条件温和,包括无机、有机高分子材料,吸附过程可同时达到纯化和固定化;酶失活后可重新活化,载体也可再生。但要求载体的比表面积要求较大,有活泼的表面。

色谱固定液

色谱固定液固定液大概有几百种,一般常按其极性和化合物结构进行分类。按固定液极性可分为非极性、中等极性和强极性三种,用相对极性表示。非极性固定液的相对极性在 0 、 1之间,例如常用的固定液有角鲨烷、阿皮松类及甲基硅氧烷类等;中等极性固定液的相对极性在 2 、 3之间,这类固定液适宜分离中等极性物质,

色谱固定液

色谱固定液固定液大概有几百种,一般常按其极性和化合物结构进行分类。按固定液极性可分为非极性、中等极性和强极性三种,用相对极性表示。非极性固定液的相对极性在 0 、 1之间,例如常用的固定液有角鲨烷、阿皮松类及甲基硅氧烷类等;中等极性固定液的相对极性在 2 、 3之间,这类固定液适宜分离中等极性物质,

灌注固定实验

实验方法原理 实验材料 实验动物试剂、试剂盒 无水乙醇二甲苯酒精甘油生理盐水等仪器、耗材 灌注瓶针管剪刀摄子止血钳组织钳咬骨钳等实验步骤 1灌注固定用1%戊巴比妥钠(80mg/kg)麻醉动物,沿胸骨柄剪开胸腔,剪开心包膜,暴露心脏,与心尖成30°-45°夹角剪开左心室,再剪开右心耳,将灌注针头从左心

色谱固定液

色谱固定液固定液大概有几百种,一般常按其极性和化合物结构进行分类。按固定液极性可分为非极性、中等极性和强极性三种,用相对极性表示。非极性固定液的相对极性在 0 、 +1 之间,例如常用的固定液有角鲨烷、阿皮松类及甲基硅氧烷类等;中等极性固定液的相对极性在 +2 、 +3之间,这类固定液适宜分离中等极

灌注固定法

实验概要出于多种考虑,将小组织片段简单浸泡在固定液中便能得到合适的固定,而且对大多数组织来说这可能是唯一的固定模式。然而更快、更均一的固定方法是将固定液通过管道系统如心主动脉或腹部主动脉灌输到组织中。下面介绍一下用 4% 多聚甲醛固定大鼠大部分器官的操作过程。主要试剂0.9% 生理盐水500 ml

常用固定液

一、非极性1、100%Dimethyl polysiloxane,100%聚二甲基硅氧烷,商品名:AC1,OV-101,OV-1,DB-1,SE-30,HP-1,RTX-1,BP-1二、弱极性2、5%Phenyl dimethyl polysiloxane, 5%二苯基(95%)二甲基聚硅氧烷,商品

灌注固定法

实验概要出于多种考虑,将小组织片段简单浸泡在固定液中便能得到合适的固定,而且对大多数组织来说这可能是唯一的固定模式。然而更快、更均一的固定方法是将固定液通过管道系统如心主动脉或腹部主动脉灌输到组织中。下面介绍一下用 4% 多聚甲醛固定大鼠大部分器官的操作过程。主要试剂0.9% 生理盐水500 ml

灌注固定实验

实验材料实验动物试剂、试剂盒无水乙醇二甲苯酒精甘油生理盐水等仪器、耗材灌注瓶针管剪刀摄子止血钳组织钳咬骨钳等实验步骤1灌注固定用1%戊巴比妥钠(80mg/kg)麻醉动物,沿胸骨柄剪开胸腔,剪开心包膜,暴露心脏,与心尖成30°-45°夹角剪开左心室,再剪开右心耳,将灌注针头从左心室插入主动脉,固定针头

固定化细胞的固定化原理及方法简介

  细胞的种类多种多样,大小和特性个不相同,故此细胞固定化的方法有很多种。归结起来,主要可以分为吸附法和包埋法两大类。  吸附法  利用各种吸附剂,将细胞吸附在其表面而使细胞固定的方法称为吸附法。  用于细胞固定化的吸附剂主要有硅藻土、多孔陶瓷、多孔玻璃、多孔塑料、金属丝网、微载体、和中空纤维等。 

什么是固定液?对固定液有哪些要求?

一般是一种高沸点的有机物的液膜,通过对不同组份的不同分子间的作用,使组份在色谱柱中得到分离。对气相色谱用的固定液,一般有如下几点要求:1、在操作温度下蒸气压低,热稳定性好,与被分析物理或载气不产生不可逆反应;2、在操作温度下呈液态,而且粘度愈低愈好。物质在高粘度的固定液中传质速度慢,柱效率因而降低。

股骨内固定术后17年发生骨恶性纤维组织细胞瘤病例分析

临床资料患者,男,61岁,农民,因在搬运约120kg重物过程中突然出现左大腿剧烈疼痛、不能站立,于2015年7月27日入苏州市相城人民医院就诊。患者入院前2个月无明显诱因下出现左大腿远端酸痛不适,每天低热,体温37.5~38.0℃,无典型夜间痛,在外院行针灸治疗病情无明显好转。近2个月来患者饮食、睡

什么是固定液?固定液的选择原则有哪些?

一般是一种高沸点的有机物的液膜,通过对不同组份的不同分子间的作用,使组份在色谱柱中得到分离。根据被分离组分和固定液分子间的相互作用关系,固定液的选择一般根据所谓的“相似性原则”,即固定液的性质与被分离组分之间的某些相似性,如官能团、化学键、极性、某些化学性质等,性质相似时,两种分子间的作用力就强,被

精索固定加阴囊皮下睾丸固定术治疗隐睾

手术方法及步骤: 作患侧腹股沟斜切口或腹横纹横切口长约2-3cm,顺肌纤维方向切开腹外斜肌腱膜至皮下环,在腹股沟管处或腹膜后找到睾丸,切断睾丸引带,游离精索时注意保存其周围筋膜和结缔组织,高位结扎鞘状突或疝囊,如精索较短可切断部分腹内斜肌及腹横肌向腹膜后分离,如仍不能将睾丸牵至阴囊底部时,

关于酶固定化技术的新型固定化方法介绍

  1、光耦联法  光偶联法是使用光敏性单体聚合物包埋具有光敏基团载体的共价固定化酶或者普通的固定化酶,在温和的条件下实现转化,因此获得的固定化酶往往有着比较高的酶活力。  2、等离子体法  等离子体可以修饰载体材料表面,从而实现活性基团引入,达到固定化的目的。

固定相的简介

固定相的选择对样品的分离起着重要作用,有时甚至是决定性的作用。不同类型的色谱采用不同的固定相,如气-固色谱的固定相为各种具有吸附活性的固体吸附剂;气-液色谱的固定相是载体表面涂渍的固定液,液相色谱中的固定相为各种键合型的硅胶小球,离子交换色谱中的固定相为各种离子交换剂,排阻色谱中的固定相为各种不同类

冰冻切片固定实验

实验材料 冰冻组织试剂、试剂盒 PFAPBS乙醇仪器、耗材 加湿盒实验步骤 1.  将承有切片的载玻片放入加湿盒中,加4%PFA覆盖整个切片,盖上加湿盒,如为预先未固定过的组织,则于室温放置20 min,如是固定过的组织则放置5 min。2.  吸去固定液,用毛细吸管或用喷水瓶以3×PBS冲冼切片,

固定相的特点

在色谱分离中固定不动、对样品产生保留的一相。 柱色谱或平板色谱中既起分离作用又不移动的那一相。

什么是固定相?

在色谱法中,静止不动的一相(固体或液体)称为固定相(stationary phase) ;运动的一相(一般是气体或液体)称为流动相(mobile phase)。

怎样固定悬浮细胞

如何判断悬浮细胞培培养时,细胞是死的还是活的将在动物细胞凋亡研究中应用的Hoechst-PI双重荧光染色 法与琥珀酸脱氢酶(SDH)染色法相结合,建立了一种更加完善的、能同时鉴别和研究悬浮培养的植物细胞凋亡及坏死的新方法——Hoechst-PI- SDH三重染色法(H-P-S法)。该方法可直接用于红

固定相的选择

如果不确定要使用哪种固定相,可从DB-1或DB-5开始。气密性好的(ms)色谱柱通常惰性较强并且温度上限较高。使用极性与溶质极性类似的固定相。这一方法通常很有效,但使用这一方法并非始终能找到最佳固定相。如果被分离混合物具有不同的偶极或氢键力,请改为使用具有不同偶极或氢键作用力(不一定要更大)的固定相

流动相-固定相

流动相 ——色谱分离过程中携带组分向前移动的物质。固定相 ——色谱分离过程中不移动的具有吸附活性的固体或是涂渍在载体表面的液体。

免疫固定电泳

  免疫固定电泳是一种包括琼脂凝胶蛋白电泳和免疫沉淀两个过程的操作。血清IFE可检测IgG、IgM、IgA等及κ轻链、λ轻链。原理是将样本在琼脂平板上作区带电泳,分离后其上覆盖抗血清滤纸,滤纸分别含抗κ轻链、抗λ轻链,或抗各类重链抗血清,当抗体与某区带中的单克隆Ig结合,可形成免疫复合物沉淀,即固定

实验动物捉拿、固定

捉拿和保定是动物实验操作技术中最基本最简单而又很重要的一项基本功。捉拿和保定各种动物的原则是:保证实验人员的安全,防止动物意外性损伤,禁止对动物采取粗暴动作。动物一般都是害怕陌生人接触其身体的,对于非条件性的各种剌激则更是进行防御性反抗。在捉拿、保定时,首先应慢慢友好地接近动物,并注意观察其表情,让

固定相的作用

固定相的选择对样品的分离起着重要作用,有时甚至是决定性的作用。不同类型的色谱采用不同的固定相,如气-固色谱的固定相为各种具有吸附活性的固体吸附剂;气-液色谱的固定相是载体表面涂渍的固定液,液相色谱中的固定相为各种键合型的硅胶小球,离子交换色谱中的固定相为各种离子交换剂,排阻色谱中的固定相为各种不同类

固定相的概念

在色谱分离中固定不动、对样品产生保留的一相。 柱色谱或平板色谱中既起分离作用又不移动的那一相。