聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)鉴定IgG纯度2
④ 浓缩胶缓冲液：称取1mol/L HCl 48ml，Tris5.98g，TEMED 0.46ml，加重蒸水至80ml,调pH6.7，用重蒸水定容至100ml，置棕色瓶内，4℃贮存。⑤ 浓缩胶贮液：称Acr10g，Bis2.5g 加重蒸水溶解后定容至100ml，过滤后置棕色瓶内，4℃贮存。⑥ 40%蔗糖溶液（W/V）⑦核黄素溶液 核黄素4.0mg，加重蒸馏水溶解，定容至100ml，置棕色试剂瓶内，4℃贮存。 （2）Ph8.3 Tris-甘氨酸电极缓冲液 称Tris6.0g，甘氨酸28.8g,加蒸馏水至 900ml，调pH8.3后，用重蒸水定容至1000ml，置试剂瓶中，4℃贮存，临用前稀释10倍。 （3）0．1%溴酚蓝指示剂 （4）染色液 染色液种类较多，染色方法也不完全相同。本实验采用0.05%考马斯亮蓝R250染色液中，含20%磺基水杨酸，其优点是染色、固定同时进行，背景易脱色。0.5%考马斯亮蓝R250......阅读全文
聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理
聚丙烯酰胺凝胶电泳（英语： polyacrylamide gelelectrophoresis，简称PAGE） 作用：用于分离蛋白质和寡核苷酸。聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺(简称Acr)和交联剂N，N’一亚甲基双丙烯酰胺(简称Bis)在催化剂过硫酸铵(AP)，N，N，N’，N’ 四甲基乙二胺(TEME
非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(NativePAGE)的分类
EcoScan pH 5/6系列酸度计操作说明书 （东南科仪代理产品） 一、基本操作 1． 按ON/OFF键打开仪器，仪器进行自检后进入pH模式。 2． 按MODE键选择您需要的测量模式，在温度模式中，如果没有温度探头将显示25°C时或上次所校正温度时的读数，若有温度探头
电泳分析法聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）操作步骤
样品制备 样品可以是任何包含蛋白质或核酸的材料。 如果需要，可以将分析样品与化学变性剂混合，通常将SDS用于蛋白质，将尿素用于核酸。 SDS是一种阴离子去污剂，可使二级和非二硫键连接的三级结构变性，并根据其质量成比例地对每种蛋白质施加负电荷。尿素打断核酸碱基对之间的氢键，使组成链退火。将样
电泳分析法聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）的应用
测量分子量。肽图分析。蛋白质大小的估计。确定蛋白质亚基或聚集结构。蛋白质纯度的估计。蛋白质定量。监测蛋白质完整性。比较不同样品的多肽组成。多肽亚基的数量和大小的分析。电泳后应用,例如蛋白质印迹。不含有机溶剂和乙酸的考马斯G-250凝胶中的蛋白质染色。通过重复使用商业磁带来浇铸和运行蛋白质凝胶。使用C
非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(NativePAGE)的分类
有三种常用的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳方法：blue native（BN-PAGE），clear native（CN-PAGE），quantitative preparative native continuous（QPNC-PAGE）。 在一个典型的native PAGE方法中，复合物被C
分子生物学常用实验技术（page－2)
一、RNA 制备 模板mRNA 的质量直接影响到cDNA 合成的效率。由于mRNA 分子的结构特点,容易受RNA 酶的攻击反应而降解,加上RNA 酶极为稳定且广泛存在,因而在提取过程中要严格防止RNA 酶的污染,并设法抑制其活性,这是本实验成败的关键。所有的组织中均存在RNA 酶,人
如何通过琼脂糖凝胶来鉴定质粒DNA的纯度
质粒DNA分子具有三种构型：共价闭合环开DNA（cccDNA,SC构型）、开环DNA（OC构型）和线性分子（L构型）.在细菌体内,质粒DNA是以负超螺旋构型存在的.在琼脂糖凝胶电泳中不同构型的的同一种质粒DNA,尽管分子量相同,但具有不同的电泳迁移率.其中跑在最前沿的是共价闭合DNA,其后依次是线性
如何通过琼脂糖凝胶来鉴定质粒DNA的纯度
我硕士专业是分子生物学这方面的,我可以很负责地告诉你,质粒DNA分子具有三种构型：共价闭合环开DNA（cccDNA,SC构型）、开环DNA（OC构型）和线性分子（L构型）.在细菌体内,质粒DNA是以负超螺旋构型存在的.在琼脂糖凝胶电泳中不同构型的的同一种质粒DNA,尽管分子量相同,但具有不同的电泳迁
如何通过琼脂糖凝胶来鉴定质粒DNA的纯度
质粒DNA分子具有三种构型：共价闭合环开DNA（cccDNA,SC构型）、开环DNA（OC构型）和线性分子（L构型）.在细菌体内,质粒DNA是以负超螺旋构型存在的.在琼脂糖凝胶电泳中不同构型的的同一种质粒DNA,尽管分子量相同,但具有不同的电泳迁移率.其中跑在最前沿的是共价闭合DNA,其后依次是线性
SPA－各种免疫检测试剂制备实验
实验方法原理 SPA 纯品系由含 A 蛋白的 Cowan I 株金黄色葡萄球菌中纯化获得。其制备过程除细菌培养外，主要有提取和纯化这两个工艺组成。提取方法多种，其中溶葡萄球菌素与亲和色谱组合方法最有效。现介绍如下。实验材料 菌苔试剂、试剂盒 Tris · HCl碳酸氢铵溶葡萄球菌素饱和硫酸铵仪器、耗
SPA－各种免疫检测试剂制备实验——SPA－纯品
实验方法原理SPA 纯品系由含 A 蛋白的 Cowan I 株金黄色葡萄球菌中纯化获得。其制备过程除细菌培养外，主要有提取和纯化这两个工艺组成。提取方法多种，其中溶葡萄球菌素与亲和色谱组合方法最有效。现介绍如下。实验材料菌苔试剂、试剂盒Tris · HCl碳酸氢铵溶葡萄球菌素饱和硫酸铵仪器、耗材DE
SDSPAGE电泳的基本原理
SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳原理聚丙烯酰胺凝胶由丙烯酰胺(简称Acr)和交联剂N，N’一亚甲基双丙烯酰胺(简称Bis)在催化剂过硫酸铵(AP)，N，N，N’，N’ 四甲基乙二胺(TEMED)作用下，聚合交联形成的具有网状立体结构的凝胶，并以此为支持物进行电泳。聚丙烯酰胺凝胶电泳可根据不同蛋白质分子所带电
SDSPAGE电泳的基本原理
SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳原理聚丙烯酰胺凝胶由丙烯酰胺(简称Acr)和交联剂N，N’一亚甲基双丙烯酰胺(简称Bis)在催化剂过硫酸铵(AP)，N，N，N’，N’ 四甲基乙二胺(TEMED)作用下，聚合交联形成的具有网状立体结构的凝胶，并以此为支持物进行电泳。聚丙烯酰胺凝胶电泳可根据不同蛋白质分子所带电
辛酸／硫酸铵法提纯IgG
实验概要本实验介绍了辛酸/硫酸铵法提纯IgG的原理和主要步骤。实验原理在酸性条件下( pH4.5)，非1gG的蛋白成份(包括白蛋白，部分Ig)，能被辛酸等短链脂肪酸沉淀，上清中剩余的蛋白主要为IgG，再用硫酸铵沉淀上清，即可获得纯度较高的IgG。辛酸/硫酸铵法比硫酸铵法能够获得更高纯度的IgG。主要
辛酸/硫酸铵法提纯IgG
实验概要本实验介绍了辛酸/硫酸铵法提纯IgG的原理和主要步骤。实验原理在酸性条件下( pH4.5)，非1gG的蛋白成份(包括白蛋白，部分Ig)，能被辛酸等短链脂肪酸沉淀，上清中剩余的蛋白主要为IgG，再用硫酸铵沉淀上清，即可获得纯度较高的IgG。辛酸/硫酸铵法比硫酸铵法能够获得更高纯度的IgG。主要
凝胶电泳仪产品应用
凝胶电泳被广泛用于分子生物学、遗传学和生物化学：1.大的DNA或者RNA分子通常利用琼脂糖凝胶电泳（agarose gel electrophoresis）分离，也可以使用聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）。2.蛋白质的凝胶电泳通常在加入十二烷基硫酸钠的聚丙烯酰胺凝胶中进行（SDS-PAGE），或者非变
凝胶电泳仪的应用
凝胶电泳被广泛用于分子生物学、遗传学和生物化学：1.大的DNA或者RNA分子通常利用琼脂糖凝胶电泳（agarose gel electrophoresis）分离，也可以使用聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）。2.蛋白质的凝胶电泳通常在加入十二烷基硫酸钠的聚丙烯酰胺凝胶中进行（SDS-PAGE），或者
电泳分析法聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）的仪器要求
丙烯酰胺溶液（用于分离和堆叠凝胶）。 异丙醇/蒸馏水。 凝胶上样缓冲液。 运行缓冲区。 染色，脱色溶液。 蛋白质样品 分子量标记。 进行SDS-PAGE所需的设备和用品包括： 电泳仪和电泳仪电源。 玻璃板（短板和顶板）。 铸框 铸造台 梳子
聚丙烯酰胺凝胶电泳法（PAGE）分离血清蛋白质（三）
3）电位梯度的不连续性电位梯度的高低与电泳速度的快慢有关，因为电泳速度等于电位梯度与迁移率的乘积。迁移率低的离子，在高电位梯度中可以与具有高迁移率而处于低电位梯度的离子具有相似的速度。在不连续系统中，电位梯度差异是自动形成的。电泳开始后，由于快离子的迁移率最大，就会很快超过蛋白质，因此在快离子的后边
电泳分析法聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）的优势、缺点
聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）的优势 稳定的化学交联凝胶 更大的分辨能力（尖锐频段） 可以容纳大量DNA，而不会显着降低分辨率 从聚丙烯酰胺凝胶中回收的DNA非常纯净 聚丙烯酰胺凝胶的孔径可以通过改变两种单体的浓度以容易且可控的方式改变。 适合分离低分子量片段 聚丙烯酰胺凝胶电泳（
聚丙烯酰胺凝胶电泳法（PAGE）分离血清蛋白质(二)
在盘状电泳过程中有三种物理效应：①样品的浓缩效应，②凝胶的分子筛效应，③一般电泳分离的电荷效应。由于这三种物理效应,使样品分离效果好，分辨率高。例如人血清用纸电泳（PH8.6）可以分成5～7个成分，而用盘状电泳也可分成20～30个条带清晰的成分（参看图15-3）。若采用不连续的浓度梯度凝胶柱，则可增
NativePAGE(非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳)实验方法
非变性聚丙烯酰胺凝胶和变性sds-page电泳在操作上基本上是相同的，只是非变性聚丙烯酰胺凝胶的配制和电泳缓冲液中不能含有变性剂如SDS 等。一般蛋白进行非变性凝胶电泳要先分清是碱性还是酸性蛋白。分离碱性蛋白时候，要利用低pH凝胶系统，分离酸性蛋白时候，要利用高pH凝胶系统。酸性蛋白通常在非变性
NativePAGE(非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳)的分类1
有三种常用的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳方法：blue native（BN-PAGE），clear native（CN-PAGE），quantitative preparative native continuous（QPNC-PAGE）。在一个典型的native PAGE方法中，复合物被CN-PA
聚丙烯酰胺凝胶电泳法（PAGE）分离血清蛋白质（图）
一、目的： 1．学习聚丙烯酰胺凝胶电泳原理。2．掌握聚丙烯酰胺园盘电泳的操作技术。3．比较醋酸纤维薄膜电泳与本法分离血清蛋白质的效果。二、原理： （一）盘状电泳原理盘状电泳是在区带电泳原理的基础上，以孔径大小不同的聚丙烯酰胺凝胶作为支持物，采用电泳基质的不连续体系（即凝胶层的不连续性、缓冲液离子成分
非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的简介
非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)或称为活性电泳是在不加入SDS 和疏基乙醇等变性剂的条件下，对保持活性的蛋白质进行聚丙烯酰胺凝胶电泳，常用于酶的鉴定、同工酶分析和提纯。未加SDS的天然聚丙烯酰胺凝胶电泳可以使生物大分子在电泳过程中保持其天然的形状和电荷，它们的分离是依据其电泳迁
非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的定义和原理
非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)或称为活性电泳是在不加入SDS 和疏基乙醇等变性剂的条件下，对保持活性的蛋白质进行聚丙烯酰胺凝胶电泳，常用于酶的鉴定、同工酶分析和提纯。未加SDS的天然聚丙烯酰胺凝胶电泳可以使生物大分子在电泳过程中保持其天然的形状和电荷，它们的分离是依据其电泳迁移率
蛋白非变性电泳为什么跑出来的条带
变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)是在不加入SDS 疏基乙醇等变性剂的条件下， 对保持活性的蛋白质进行聚丙烯酰胺凝胶电泳，常用于同工酶的鉴定和提纯。未加SDS的天然聚丙烯酰胺凝胶电泳可以使生物大分子在电泳过程中保持其天然的形状和电荷，它们的分离是依据其电泳迁移率的不同和凝胶的分子筛作用
非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的实验原理介绍
非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)或称为活性电泳是在不加入SDS 和巯基乙醇等变性剂的条件下,对保持活性的蛋白质进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,常用于酶的鉴定、同工酶分析和提纯。未加SDS的天然聚丙烯酰胺凝胶电泳可以使生物大分子在电泳过程中保持其天然的形状和电荷,它们的分离是依据其电泳迁
重组人表皮细胞生长因子的主要用途
英文名：Recombinant Human Epidermal Growth Factor 英文缩写：EGF或rhEGF中文名：重组人表皮细胞生长因子EGF由53个氨基酸组成的相对分子量为6222的小分子多肽。采用基因工程技术和独特的色谱技术分离纯化、冻干制备。来源：大肠杆菌（Escherichia
重组人表皮细胞生长因子（EGF）的基本信息
英文名：Recombinant Human Epidermal Growth Factor 英文缩写：EGF或rhEGF中文名：重组人表皮细胞生长因子EGF由53个氨基酸组成的相对分子量为6222的小分子多肽。采用基因工程技术和独特的色谱技术分离纯化、冻干制备。来源：大肠杆菌（Escherichia