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辛酸/硫酸铵法提纯IgG

实验概要本实验介绍了辛酸/硫酸铵法提纯IgG的原理和主要步骤。实验原理在酸性条件下( pH4.5),非1gG的蛋白成份(包括白蛋白,部分Ig),能被辛酸等短链脂肪酸沉淀,上清中剩余的蛋白主要为IgG,再用硫酸铵沉淀上清,即可获得纯度较高的IgG。辛酸/硫酸铵法比硫酸铵法能够获得更高纯度的IgG。主要试剂1. 辛酸(caprylic acid,CA),化学纯2. 硫酸铵,分析纯3. 60mmo1/ L醋酸缓冲液(pH4.0)4. NaOH5. PBS(0.lmol/L,pH7.4)6. 0.lmol/ L柠檬酸(pH4.0)主要设备1. SPA Sepharose 4FF亲合层析柱2. 紫外分光光度计3. 高速离心机4. 透析袋5. 蛋白电泳装置6. 酶标板实验材料动物腹水实验步骤1. 蛋白含量测定紫外分光光度法测样品在波长260nm,280nm处的I及收光度(A 260,A 280),蛋白含量按以下公式计算蛋白量(g/L)=(1......阅读全文

辛酸/硫酸铵法提纯IgG

实验概要本实验介绍了辛酸/硫酸铵法提纯IgG的原理和主要步骤。实验原理在酸性条件下( pH4.5),非1gG的蛋白成份(包括白蛋白,部分Ig),能被辛酸等短链脂肪酸沉淀,上清中剩余的蛋白主要为IgG,再用硫酸铵沉淀上清,即可获得纯度较高的IgG。辛酸/硫酸铵法比硫酸铵法能够获得更高纯度的IgG。主要

抗体纯化方法介绍

抗体制备制备出效价高,特异性强,稳定性好的抗体是免疫学实验取得成功的基础,抗体质量的好坏直接影响着研究者研究的成败,不同的免疫学实验方法(如ELISA,IHC,IP,ICC,SDS-PAGE, WB等)对抗体的效价,浓度和纯度有不同的要求。我们知道,一般免疫血清中含有特异性抗体和非特异性抗体