小麦黄化苗总mRNA的提取

[实验原理]RNA是一类极易降解的分子,要得到完整的RNA必须最大限度地抑制提取过程中内源性及外源性核糖核酸酶对RNA的降解。本实验以小麦为材料,采用异硫氰酸胍—苯酚—氯仿抽提法或CTAB法提取总RNA。异硫氰酸胍是高浓度变性剂,可溶解蛋白质,破坏细胞结构,使蛋白质与核酸分离,失活RNA酶,所以RNA从细胞中释放出来时不被降解。细胞裂解后,除了RNA,还有DNA、蛋白质和细胞碎片,通过酚、氯仿等有机溶剂处理得到纯化、均一的总RNA。mRNA仅占总RNA的1%-5%,由于大多数真核mRNA 3’端具有多聚腺苷酸结构(polyA),因此可采用寡聚(d丁)纤维素亲和层析柱分离出mRNA。[仪器、材料与试剂](一) 仪器和材料紫外线透射仪、移液枪、琼脂糖凝胶电泳系统、小麦黄化苗(二) 试剂4M异硫氰酸胍、2M NaAc(pH 4.8)、4M LiCl、3M NaAc(pH5.0),以上均用0.1%焦碳酸二乙酯(DEPC)......阅读全文

黄化豌豆幼苗的“三重反应”实验

实验方法原理 乙烯是一种气体激素,它对植物的代谢,生长和发育有着多方面的作用。用乙烯气体处理黄化的豌豆幼苗,可抑制幼苗上胚轴的伸长,并使上胚轴发生膨大及横向生长。黄化幼苗对乙烯的这三种反应被称为“三种反应”,并可作为对乙烯的一种诊断性鉴定方法。这种方法是根据乙烯的主要生理作用建立的。据报导,乙烯可使

组培苗的培养原理

  植物组织培养即植物无菌培养技术,是根据植物细胞具有全能性的理论,利用植物体离体的器官如根、茎、叶、茎尖、花、果实等)组织(如形成层、表皮、皮层、髓部细胞、胚乳等)或细胞(如大孢子、小孢子、体细胞等)以及原生质体,在无菌和适宜的人工培养基及光照、温度等人工条件下,能诱导出愈伤组织、不定芽、不定根,

我国获得黄帝柏克隆苗

  中国林业科学研究院的科研人员近日在温室实验室中,成功采用扦插繁殖将陕西省黄帝陵黄帝柏幼苗从营养杯内移栽至大盆生长,这标志着中国林业科学研究院采用无性繁殖获取与黄帝柏基因一样的新个体取得了突破性进展。   黄帝柏是黄帝陵最有价值的历史遗存之一,传为黄帝亲手所植。成功克隆黄帝柏将为扩大繁

苗勒腺肉瘤临床分析

苗勒腺肉瘤是女性生殖系统少见的恶性肿瘤,约占子宫肉瘤的8%,1974年首次报道。苗勒腺肉瘤是由良性腺上皮和恶性肉瘤成分构成的低度恶性肿瘤。本文对56例苗勒腺肉瘤病例进行分析,现报道如下。1  资料与方法1.1    一般资料    收集2004年7月至2016年11月中国医科大学附属盛京医院

“试管橡胶苗”攻克世界难题

  “这就是橡胶组培苗,长到10公分左右就可以从试管里移栽到大棚,长到30公分就可以到地里定植了!”中国热带农业科学院橡胶研究所博士华玉伟指着试管里嫩绿可人的小树苗怜爱地说,眼里就像看着自己孩子般充满了柔情。   在面积不大的实验室,记者看到铁架上摆满了大小长度一致的试管。每一根试管里都长着一棵小小

发现MHZ9是水稻乙烯信号途径的翻译调控因子

  蛋白质是生命活动的主要承担者,其合成由编码基因的mRNA含量与翻译效率共同决定。翻译调控可在不改变mRNA含量的情况下,快速可逆地调控蛋白合成,有助于生物在感知内外源信号后,迅速做出应变行为。  乙烯信号在植物生长发育与逆境胁迫中发挥重要作用。前期拟南芥研究发现,EIN2通过直接或间接靶向乙烯信

Polyadenylation-of-mRNA

Gene expression requires the coordination and integration of multiple processes, including transcription, splicing, polyadenylation, nucleocytoplasmic

日本发现控制叶子黄化的遗传基因

  科技日报北京12月3日电 (记者陈超)日本一研究小组近日宣布,他们发现了控制长期干燥引起植物叶子黄化的遗传基因。该研究成果有望应用于改良农作物的品质和产量。  植物荷尔蒙之一的脱落酸,在水分不足发生干燥压力时会在叶片中蓄积,在植物获得干燥压力耐性过程中起着重要作用。脱落酸会引发叶绿素分解,促使叶

mRNA差异显示技术(mRNA-differetial-display)(2)

6.技术路线 mRNA 差异显示技术 The fluoroDD System •Builds on the HIEROGLYPH™ system –TMR-labeled anchored primers –Increased primer concentrations –I

mRNA差异显示技术(mRNA-differetial-display)(1)

1.概 述mRNA差异显示技术(mRNA differetial display)是一种快速有效的克隆差异性表达基因的方法。 方法建立:1992年 Liang P和Pardee首次应用DD技术对比人类乳腺癌细胞与正常细胞所表达的mRNA,以此来克隆癌细胞所特有的基因 目前已应用于个各领域:

mRNA工艺技术平台之mRNA制剂

  mRNA疫苗或药物的生产工艺,主要分为质粒DNA原液制备、mRNA原液制备、mRNA制剂制备三个阶段。本文讨论第三阶段的工艺平台,也是当前挑战最大的环节。  关键的制剂技术突破解决了mRNA的成药性问题,使其从60年的科研之路走向临床商业化应用,并在此次新冠疫苗应用中大放异彩。据公开信息, BN

关于组培苗的培养调控

  (1)光照:光照对离体培养物的生长发育具有重要的作用。通常对愈伤组织的诱导来说,暗培养 比光培养更合适。但器官的分化需要光照,并且随着试管苗的生长,光照强度需要不断地加强,才能使 小苗生长健壮,并促进它从“异养”向“自养”转化,提高移植后的成活率。  (2)温度:离体培养中对温度的调控要比光照显

愈伤组织与试管苗培养

愈伤组织的培养   一般来说,从接种外植体到出现愈伤组织,需要经过2周时间。2周之内就可以看到外植体上逐渐长出乳白色或黄白色的瘤状愈伤组织。首次培养愈伤组织时,恒温箱的门应该关闭,不必见光,因为在无光条件下愈伤组织长得更快。2周以后,由于培养基中的营养成分已接近耗尽,必须更换培养基,进行继代

草莓苗放入光照培养箱

 把培育好的草莓苗放入可控制温度、光照培养箱内,并保持空气       实践证明,经过脱毒等一系列育苗程序培育出的草莓无病毒苗,生长旺盛,单果重增加,产量比普通草莓提高30%左右,且植株抗性强,果实品质好。近几年来生产上特别是保护地栽培中应用无病毒苗越来越广泛。       茎尖培养法:接种时取长度

怎样预防组培苗的虫害?

  (一)加强检疫和消毒,防止外来病源侵染。  (二)提高栽培管理技术,提升兰苗质量,增加兰苗的自然抗逆性。整个栽培环境做到清洁、通风、偏强光照,促使兰苗生长旺盛,自然会提高兰苗抵御病虫侵扰的能力。  (三)加强日常巡视,发现有病害的组苗应及时销毁,并进行药物防治,将病害消灭在萌芽状态。药物防治可单

苗泰健脾糖浆的成分介绍

  党参、白术(炒)、枳实(炒)、陈皮、山楂(炒)、麦芽(炒)。

关于组培苗的培养类型

  (一)愈伤组织培养  愈伤组织培养就是将外植体接种在人工培养基上,由于植物生长调节剂的存在,使细胞脱分化形成 愈伤组织,然后通过再分化形成再生植株。  (二)器官和组织培养  器官和组织培养是通过培养器官和组织的类别来分类的。如果培养的是花药,称为花药培养;如果 是胚珠,称为胚珠培养;如果培养的

香蕉苗组培培养的过程

香蕉是我国南方四大佳果之一。其为草本果树,速生快长,投产年限短,产量高,经济效益 好,深受各香蕉生产国及蕉农的重视。香蕉组织快繁与传统吸芽繁殖相比,具有无病毒、变异率小、生长一致、果实商品性好、种苗便于运输等优点,自推广以来,需求日益增大,生产香蕉组培苗的厂家也与日俱增。而在香蕉工厂化育苗过程中,由

制备cDNA的基本介绍

  制备互补DNA,往往需要先分离从目的基因转录来的mRNA.如果该基因编码的蛋白质是细胞中的主要蛋白质,则此基因的产物是总mRNA的主要组成部分 [2] 。就胰岛B细胞而论,此细胞含有高水平胰岛素前体mRNA,后者有时可以沉淀正在翻译的mRNA的核糖核蛋白体,如果用特异抗体结合所表达的蛋白质(抗原

制备互补DNA的方法和过程

制备互补DNA,往往需要先分离从目的基因转录来的mRNA.如果该基因编码的蛋白质是细胞中的主要蛋白质,则此基因的产物是总mRNA的主要组成部分。就胰岛B细胞而论,此细胞含有高水平胰岛素前体mRNA,后者有时可以沉淀正在翻译的mRNA的核糖核蛋白体,如果用特异抗体结合所表达的蛋白质(抗原),则可从沉淀

互补脱氧核糖核酸的制备方法

制备互补DNA,往往需要先分离从目的基因转录来的mRNA.如果该基因编码的蛋白质是细胞中的主要蛋白质,则此基因的产物是总mRNA的主要组成部分 。就胰岛B细胞而论,此细胞含有高水平胰岛素前体mRNA,后者有时可以沉淀正在翻译的mRNA的核糖核蛋白体,如果用特异抗体结合所表达的蛋白质(抗原),则可从沉

制备互补DNA的方法过程

制备互补DNA,往往需要先分离从目的基因转录来的mRNA.如果该基因编码的蛋白质是细胞中的主要蛋白质,则此基因的产物是总mRNA的主要组成部分   。就胰岛B细胞而论,此细胞含有高水平胰岛素前体mRNA,后者有时可以沉淀正在翻译的mRNA的核糖核蛋白体,如果用特异抗体结合所表达的蛋白质(抗原),则可

关于互补DNA的制备方法介绍

  制备互补DNA,往往需要先分离从目的基因转录来的mRNA.如果该基因编码的蛋白质是细胞中的主要蛋白质,则此基因的产物是总mRNA的主要组成部分 [2] 。就胰岛B细胞而论,此细胞含有高水平胰岛素前体mRNA,后者有时可以沉淀正在翻译的mRNA的核糖核蛋白体,如果用特异抗体结合所表达的蛋白质(抗原

制备互补DNA的方法

制备互补DNA,往往需要先分离从目的基因转录来的mRNA.如果该基因编码的蛋白质是细胞中的主要蛋白质,则此基因的产物是总mRNA的主要组成部分。就胰岛B细胞而论,此细胞含有高水平胰岛素前体mRNA,后者有时可以沉淀正在翻译的mRNA的核糖核蛋白体,如果用特异抗体结合所表达的蛋白质(抗原),则可从沉淀

动物所揭示槟榔黄化病关键病原及传播方式

近日,中国科学院院士康乐与动物研究所研究员张晓明团队,在《科学通报》(Science Bulletin)上发表了题为The phytoplasma (Candidatus Phytoplasma arecae) is the crucial pathogen to cause areca palm

叶绿素计对樟树正常叶片与黄化叶片的分析

樟树一种常见的四季常青的树种,其树形十分美观,而且具有很强的抗病驱虫能力,对于二氧化硫和臭氧有着十分强烈的抗性。这种树多生长于我国的南方。樟树的生长主要受到温度,光照,降水以及大气湿度等环境因素的影响。杭州滨海地区石灰性土壤 樟树失绿黄化主要是因为土壤pH高,HCO3–浓度高,有机质含量低,从而影响

mRNA的分离

与rRNA和tRNA不同的是,哺乳动物细胞的绝大部分mRNA在其3'端均有一poly(A)尾,因此可以用 oligo(dT)-纤维素亲和层析法从大量的细胞RNA中分离mRNAdmonds等,1971;At Leder,1972)。在构建cDNA文库时, 必须经上述纯化步骤制备mRNA

如何提取mrna

1 细胞总RNA的提取1)、6孔板细胞(CNE-2)汇合度为90-100%时,取出无菌室,去其上清,用PBS洗两次后,每孔加TRIZOL试剂(Gibco公司) 1 ml,摇匀,无菌罩内消化3-5分钟(观察:液体变粘稠,细胞脱壁).2)、将各孔内消化好的细胞裂解液吸到一DEPC处理过的1.5 ml E

mRNA的纯化

实验概要本文介绍了mRNA的纯化方法。实验原理mRNA的分离方法较多,其中以寡聚(dT)-纤维素柱层析法最为有效,已成为常规方法。此法利用mRNA  3‘末端含有Poly(A  )的特点,在RNA流经寡聚(dT)纤维素柱时,在高盐缓冲液的作用下,mRNA被特异地结合在柱上,当逐渐降低盐的浓度时或在低

mRNA的分离

与rRNA和tRNA不同的是,哺乳动物细胞的绝大部分mRNA在其3'端均有一poly(A)尾,因此可以用oligo(dT)-纤维素亲和层析法从大量的细胞RNA中分离mRNAdmonds等,1971;At Leder,1972)。在构建cDNA文库时, 必须经上述纯化步骤制备mRNA模板。进行