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mRNA差异显示技术(mRNAdifferetialdisplay)(1)

1.概 述mRNA差异显示技术(mRNA differetial display)是一种快速有效的克隆差异性表达基因的方法。 方法建立:1992年 Liang P和Pardee首次应用DD技术对比人类乳腺癌细胞与正常细胞所表达的mRNA,以此来克隆癌细胞所特有的基因 目前已应用于个各领域: 农业、植物 动物 医学 • 胚胎发育 • 遗传病 • 药物 • 肿瘤 2.mRNA差异显示原理 是分离差异表达基因的一个重要方法。人类大约含有三万个不同的基因。在不同的单个细胞中只有10%的基因处于表达状态。 生物体在不同的生理,病理状态下,基因的表达水平不同。 生命过程中选择性表达的基因主要有:发育与分化、体内平衡、对攻击的应答、细胞周期调节、老化和程序性细胞死亡等。 差异显示获得的只是某个基因的片段,而不是直接获得全长cDNA克隆。 3.基本程序 选择表型特性差异显著对象 ......阅读全文

mRNA差异显示技术(mRNA differetial display)(1)

1.概 述mRNA差异显示技术(mRNA differetial display)是一种快速有效的克隆差异性表达基因的方法。 方法建立:1992年 Liang P和Pardee首次应用DD技术对比人类乳腺癌细胞与正常细胞所表达的mRNA,以此来克隆癌细胞所特有的基因 目前已应用于个各领域:

mRNA差异显示技术(mRNA differetial display)(2)

6.技术路线 mRNA 差异显示技术 The fluoroDD System •Builds on the HIEROGLYPH™ system –TMR-labeled anchored primers –Increased primer concentrations –I

荧光标记mRNA差异显示技术

mRNA差异显示技术(differential display,DD)是用于研究基因的差异表达的新方法。该技术自1992年被首次报道后,即以其不可替代的优势被广泛应用于生物医学领域。在应用过程中不断得到改进,并产生了诸多衍生技术如RPA(RNA finger printing by arbitrar

单细胞mRNA差异显示实验

目前有几种方法可以显示生理刺激下组织样本中未知基因的表达水平变化。然而, 很多组织内的细胞又存在形态和功能上的异质性,因此常常需要从单个细胞水平研究基因表达的差异。现在,我们介绍一种新方法,它常规用来在单细胞水平考察未知基因的差异性表达。 现代神经科学研究技术 作者:U.Windhorst & H

mRNA 的 PCR 差异显示实验

对应于 mRNA 的 DNA 序列,可以被回收、克隆、测序,可以用作杂交或筛库的探针。 来源:《精编分子生物学实验指南(第五版)》 实验材料 人的细胞总 RNA 或 poly(A)+ RNA 试剂、试剂盒 人胎盘 RNase 抑制剂DNase ITris·ClKClMgC

mRNA 的 PCR 差异显示实验

            实验方法原理 实验材料 人的细胞总 RNA 或 poly(A)+ RNA 试剂、试剂盒

单细胞mRNA差异显示实验

            实验方法原理 ##流程图 试剂、试剂盒 溶液和缓冲液 仪器、耗材

mRNA 的 PCR 差异显示实验

实验方法原理 实验材料 人的细胞总 RNA 或 poly(A)+ RNA试剂、试剂盒 人胎盘 RNase 抑制剂DNase ITris·ClKClMgCl23:1 (V V) 苯酚 氯仿乙酸钠乙醇DEPC 处理的水简并锚定 oligo(dT) 引物组合MoMuLV 逆转录酶缓冲液DTT4dN

单细胞mRNA差异显示实验

实验方法原理 ##流程图试剂、试剂盒 溶液和缓冲液仪器、耗材 水浴槽PCR热循环仪微量离心机塑料制品和滤器实验步骤 一、RNA 的分离收集对照组和实验组细胞,放入含 45ul2 mmol/L DTT 的 1.5 ml 微量离心管中。95℃ 水浴热解 2 min。每管加入以下物质:37℃ 温育 30

差示反转录PCR[mRNA差异显示技术]

mRNA差异显示技术是由美国波斯顿Dena-Farber癌症研究所的Liang Peng博士和Arthur Pardee博士在1992年创立的。它也称为差示反转录PCR(differential display of reverse transcriptional PCR)简称DDRT-PCR。mR