哺乳动物精核的制备实验
实验材料哺乳动物组织培养细胞（如 HeLa 细胞）试剂、试剂盒PBS裂解缓冲液缓冲液 B仪器、耗材带有 B 型研磨棒的杜恩斯匀浆器光学显微镜实验步骤1. 培养并收获 3L 1×106 细胞/ml 的哺乳动物组织培养的细胞（如 HeLa）， 用 1L PBS清洗两次。2. 用 20 倍于沉淀体积（40 ml） 的裂解缓冲液重悬细胞沉淀，转移到杜恩斯匀浆器中，用 B 型研磨棒研磨 15 次以裂解细胞。在显微镜下观察裂解液。3. 4℃，3000 g 离心 15 min。4. 使用裂解缓冲液重复重悬及离心两次，再用缓冲液 B 重复一次。在最后一次离心之前，将重悬液用 2 mol/L NaCl 稀释 10～30 倍，测量 A260 值，估计核 DNA 的总量。5. 用 2 倍于沉淀体积的缓冲液 B 重悬得到的核，测量重悬液的总体积。6. 轻轻搅动，一滴一滴地加入 1 体积的缓冲液 B/0.6 mol/L KCl/10％......阅读全文
哺乳动物精核的制备实验
实验材料哺乳动物组织培养细胞（如 HeLa 细胞）试剂、试剂盒PBS裂解缓冲液缓冲液 B仪器、耗材带有 B 型研磨棒的杜恩斯匀浆器光学显微镜实验步骤1. 培养并收获 3L 1×106 细胞/ml 的哺乳动物组织培养的细胞（如 HeLa）， 用 1L PBS清洗两次。2. 用 20 倍于沉淀体积（40
哺乳动物精核的制备实验
实验方法原理 实验材料 哺乳动物组织培养细胞（如 HeLa 细胞）试剂、试剂盒 PBS裂解缓冲液缓冲液 B仪器、耗材 带有 B 型研磨棒的杜恩斯匀浆器光学显微镜实验步骤 1. 培养并收获 3L 1×106 细胞/ml 的哺乳动物组织培养的细胞（如 HeLa）， 用 1L PBS清洗两次。2. 用 2
核纤层和富含核纤层组分的制备实验——哺乳动物组织细胞
实验材料组织试剂、试剂盒溶液 H仪器、耗材尼龙网匀浆器实验步骤组织制备1. 切碎组织，用加 250 mmol/L 蔗糖的 H 溶液清洗组织/组织培养物：溶液 H：15 mmol/L PIPES，pH 7.280 mmol/L KCl15 mmol/L NaCI0.5 mmol/L 精咪0.2 mmo
哺乳动物细胞制备核和细胞质提取物—核提取物制备优化
实验材料转瓶或单层培养的哺乳动物细胞（如HeLa细胞）试剂、试剂盒高盐缓冲液分别含 0.8、1.0、1.2、1.4 及 1.6 mol L KCl仪器、耗材贝克曼 JS4. 2 转子或相当的转子50 mL 圆锥形刻度聚丙烯离心管（对较小体积的提取物也可用 15 mL 的离心管）Dounce 氏玻璃匀
从哺乳动物细胞中制备核和细胞质提取物—核提取物制备
实验材料转瓶或单层培养的哺乳动物细胞（如HeLa细胞）试剂、试剂盒PBS低渗缓冲液高盐缓冲液含1. 2 mol L KCl透析缓冲液液氮仪器、耗材贝克曼 JS4. 2 转子或相当的转子50 mL 圆锥形刻度聚丙烯离心管（对较小体积的提取物也可用 15 mL 的离心管）Dounce 氏玻璃匀浆器（B
核提取物的制备实验
实验材料 哺乳动物试剂、试剂盒 PBS低渗缓冲液低盐缓冲液透析缓冲液仪器、耗材 转子离心机电导计透析膜匀浆机离心管实验步骤 1a. 收集转瓶培养的细胞：将浓度为5~10×108细胞/l 的培养液用1 L 的塑料瓶1 850 g 离心20 min，将细胞收入50 ml 锥形离心管中（每管收2~3 L
核提取物的制备实验
实验方法原理 通过向某些蛋白质溶液中加入某些无机盐溶液后，可以降低蛋白质的溶解度，使蛋白质凝聚而从溶液中析出,这种作用叫作盐析，是物理变化，可复原。对于特定的蛋白质，影响蛋白质盐析的主要因素：无机盐的种类、浓度、温度和PH值。
哺乳动物中制备基因组DNA实验——制备DNA
在DNA提取过程中应尽量避免使DNA断裂和降解的各种因素，以保证DNA的完整性，为后续的实验打下基础。一般真核细胞基因组DNA有107-9bp，可以从新鲜组织、培养细胞或低温保存的组织细胞中提取，常是采用在EDTA以及SDS等试剂存在下用蛋白酶K消化细胞，随后用酚抽提而实现的。实验材料动物组织试剂、
核提取物的制备实验（二）
从培养细胞中分离的细胞核制备成的提取物在体外转录和mRNA加工中具有精确的功能，（1）纯化蛋白质（2）核提取物。实验材料细胞核试剂、试剂盒KCl高盐缓冲液仪器、耗材透析膜离心机实验步骤1. 按基本方案中歩骤1~7操作。 2. 将细胞核悬液分成5等份。在冷室内不断搅拌，按如下方法在每份悬液中加入1
核提取物的制备实验（一）
从培养细胞中分离的细胞核制备成的提取物在体外转录和mRNA加工中具有精确的功能，（1）纯化蛋白质（2）核提取物。实验方法原理通过向某些蛋白质溶液中加入某些无机盐溶液后，可以降低蛋白质的溶解度，使蛋白质凝聚而从溶液中析出,这种作用叫作盐析，是物理变化，可复原。对于特定的蛋白质，影响蛋白质盐析的主要因素
哺乳动物中制备基因组DNA实验
实验材料 动物组织试剂、试剂盒 PBS乙酸铵乙醇酚氯仿异戊醇TE仪器、耗材 离心机摇床研钵实验步骤 1. 切下组织并立即剪成小块，置于液氮中冻结。 2. 将200 mg~1 g 的组织用预冷的研钵和研杵研碎，或用锤子将其捣为细粉末，每100 mg 组织用1. 2 ml 消化缓冲液悬浮。 3.
哺乳动物中制备基因组DNA实验
制备DNA 实验材料 动物组织 试剂、试剂盒
核纤层和富含核纤层组分的制备实验
实验材料 组织试剂、试剂盒 溶液 H仪器、耗材 尼龙网匀浆器实验步骤 组织制备1. 切碎组织，用加 250 mmol/L 蔗糖的 H 溶液清洗组织/组织培养物：溶液 H：15 mmol/L PIPES，pH 7.280 mmol/L KCl15 mmol/L NaCI0.5 mmol/L 精咪0.2
核纤层和富含核纤层组分的制备实验
哺乳动物组织/组织培养细胞爪蟾卵母细胞果蝇胚SPISULA实验材料组织 试剂、试剂盒溶液 H
核纤层和富含核纤层组分的制备实验
哺乳动物组织/组织培养细胞 爪蟾卵母细胞 果蝇胚 SPISULA 实验材料 组织
核纤层和富含核纤层组分的制备实验——SPISULA
实验材料海蚌试剂、试剂盒溶液 S仪器、耗材Millipore 滤器离心机实验步骤卵母细胞收集和制备1. 从成年海蚌中剥离卵巢和卵母细胞。然后在 1 g 重力作用下，用经 0.22 μm Millipore 滤器过滤的海水清冼几次卵母细胞。匀浆2. 为了在不激活卵母细胞的情况下使卵黄膜去稳定，将洗过的
哺乳动物细胞中制备核和细胞质提取物—细胞质组分制备
实验材料细胞质提取物试剂、试剂盒10× 细胞质提取缓冲液仪器、耗材Beckman 50型固定角转子或相当的转子实验步骤1) 仔细测量细胞质提取物的体积（见基本方案步骤 7 中的上清）。加入 0.11 倍体积的10×细胞质提取缓冲液，充分混合。2)100 000 g 离心 1 h。3)将上清（± 10
从哺乳动物细胞中制备核和细胞质提取物
实验方法原理 实验材料 转瓶或单层培养的哺乳动物细胞（如HeLa细胞）试剂、试剂盒 PBS低渗缓冲液高盐缓冲液含1. 2 mol L KCl透析缓冲液液氮仪器、耗材 贝克曼 JS4. 2 转子或相当的转子50 mL 圆锥形刻度聚丙烯离心管（对较小体积的提取物也可用 15 mL 的离心管）Doun
从哺乳动物细胞中制备核和细胞质提取物
核提取物的制备 核提取物制备优化 细胞质（S-100)组分的制备 实验方法原理 实验材料
从哺乳动物细胞中制备核和细胞质提取物
核提取物的制备核提取物制备优化细胞质（S-100)组分的制备实验方法原理实验材料转瓶或单层培养的哺乳动物细胞（如HeLa细胞） 试剂、试剂盒PBS
核纤层和富含核纤层组分的制备实验——果蝇胚
实验材料果蝇胚试剂、试剂盒溶液 E仪器、耗材研杵匀浆器实验步骤胚收集和制备1. 可用任一种方法收集果蝇胚（Oregon R P2 或任何其他的野生系）。制备匀浆2. 直接在 9 倍体积的抽提缓冲液（溶液 E ) 中融化冻存胚。溶液 E：250 mmol/L 蔗糖50 mmol/L NaCl50 mm
HeLa－细胞核提取物的制备实验
试剂、试剂盒 甘油液氮MgCl2•6 H2O硫酸铵HeLa 细胞磷酸缓冲盐溶液（PBS) 缓冲液 G缓冲液 H 缓冲液 DTM 缓冲液+0.1 ml L KCl实验步骤 材料HeLa 细胞（培养和保存条件见下文。我们也成功地使用过 CellexBiosciences 公司制备并冷冻的 HeLa 细胞
HeLa－细胞核提取物的制备实验
在本实验中，基本上是按Dignam等（1983)所述的方法从HeLa细胞制备核提取物的。这一基本方法大概是制备体外转录和DNA结合实验用因子的最常用的方法。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南，作者：朱厚础。试剂、试剂盒甘油液氮MgCl2•6 H2O硫酸铵HeLa 细胞磷酸缓冲盐溶液（PBS)缓冲液
细胞核连缀分析实验_从组织中制备细胞核
实验材料动物组织试剂、试剂盒PBS蔗糖仪器、耗材电动匀浆器特氟隆研杵实验步骤一、用超速离心法从组织中分离细胞核1. 切下动物组织，放入置于冰上的平皿中，用冰冷的 PBS 冲洗。2. 加少量蔗糖Ⅰ溶液，用剪刀或剃须刀片将组织切碎，转入一个干净试管中，加蔗糖Ⅰ溶液至终体积为每克组织 10 ml。3. 用
核纤层和富含核纤层组分的制备实验——爪蟾卵母细胞
实验材料卵巢试剂、试剂盒NaClKClMgSO4Ca（NO3）2CaCl2NaHCO3苯青霉素硫酸链霉素Na-HEPES仪器、耗材培养皿实验步骤卵母细胞收集和制备1. 从成熟的雌性非洲爪蟾取整个或部分卵巢，在含 88 mmol/L NaCl，1 mmol/L KCl，0.9 mmol/L MgSO4
酵母细胞核制备实验——差速离心法
细胞核（nucleus）是细胞中最大、最重要的细胞器（初中老教材认为细胞核不是细胞器，大学细胞生物学则认为是细胞器，这里以大学教材为准），它是由核膜（nuclear membrane）、核骨架（nuclear scaffold）、核仁(nucleolus) 几部分组成。实验材料酵母菌试剂、试剂盒细胞
哺乳动物细胞瞬时基因转移法制备重组蛋白实验
一、转染方法对于脂质体转染 (Upofection), 可以从商业途径获得许多配方，这些配方都具有单一的ZL化组分，而且毫无疑问，它们中的大部分都能非常有效地将质粒 D N A 转 人 细 胞 。其缺点是价格不菲—- 在使用这些试剂时，对于超出数百毫升规模的瞬时转染，经济上是不可行的。大
哺乳动物细胞瞬时基因转移法制备重组蛋白实验
报道显 TK，在 过 去 的 1 0 年 ，已经开发出 了多种高效的瞬时转染（transient transfection) 方法 ， 它们可 以 满 足 甚 至 超出 了 上 述 需 求 。 目 前 蛋 白 质 的 瞬 转 表 达 主 要 是 在H E K 2 9 3 衍生的细胞系中进行, 而同时
哺乳动物细胞瞬时基因转移法制备重组蛋白实验
实验步骤 一、转染方法 对于脂质体转染 (Upofection), 可以从商业途径获得许多配方，这些配方都具有单一的ZL化组分，而且毫无疑问，它们中的大部分都能非常有效地将质粒 D N A 转 人 细 胞 。其缺点是价格不菲
分离核仁实验——HeLa细胞细胞核或核仁的制备
实验材料HeLa细胞试剂、试剂盒PBS仪器、耗材Teflon-玻璃匀浆器实验步骤1. 准备溶液：PBSRSB-8 10 mmol/L Tris；10 mmoI/L NaCl，8 mmoI/L 乙酸镁，pH 7.4RSB 10 mmol/L Tris；10 mmol/L NaCl，1.5 mmol/L