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RNAi的实验原理和操作实用技术(2)

2.体外转录以DNA Oligo为模版,通过体外转录合成siRNAs,成本相对化学合成法而言比较低,而且能够比化学合成法更快的得到siRNAs。不足之处是实验的规模受到限制,虽然一次体外转录合成能提供足够做数百次转染的siRNAs,但是反应规模和量始终有一定的限制。而且和化学合成相比,还是需要占用研究人员相当的时间。值得一提的是体外转录得到的siRNAs毒性小,稳定性好,效率高,只需要化学合成的siRNA量的1/10就可以达到化学合成siRNA所能达到的效果,从而使转染效率更高。最适用于:筛选siRNAs,特别是需要制备多种siRNAs,化学合成的价格成为障碍时。不适用于:实验需要大量的,一个特定的siRNA。长期研究。3.用RNase III 消化长片断双链RNA制备siRNA其他制备siRNA的方法的缺陷是需要设计和检验多个siRNA序列以便找到一个有效的siRNA。而用这种方法——制备一份混合有各种siRNAs “......阅读全文

RNAi的实验原理和操作实用技术(2)

2.体外转录以DNA Oligo为模版,通过体外转录合成siRNAs,成本相对化学合成法而言比较低,而且能够比化学合成法更快的得到siRNAs。不足之处是实验的规模受到限制,虽然一次体外转录合成能提供足够做数百次转染的siRNAs,但是反应规模和量始终有一定的限制。而且和化学合成相比,还是需要占

RNAi的实验原理和操作实用技术

  几十年来生物学上最重要的进展,也许是关于RNA分子能调节基因表达的发现。RNA干涉(RNAi)是指双链RNA分子使基因表达沉寂的现象,是在线虫中发现的,在 1998年的一篇Nature论文中被公诸于众。    此后,科学家们明白,RNAi还有其他形式,它既

RNAi的实验原理和操作实用技术(1)

几十年来生物学上最重要的进展,也许是关于RNA分子能调节基因表达的发现。RNA干涉(RNAi)是指双链RNA分子使基因表达沉寂的现象,是在线虫中发现的,在 1998年的一篇Nature论文中被公诸于众。此后,科学家们明白,RNAi还有其他形式,它既是一种了解基因功能的强大工具,又是很多生物的基因组所

RNAi的实验原理和操作实用技术(3)

3.DEAE-葡聚糖和polybrene带正电的DEAE-葡聚糖或polybrene多聚体复合物和带负电的DNA分子使得DNA可以结合在细胞表面。通过使用DMSO或甘油获得的渗透休克将DNA复合体导入。两种试剂都已成功用于转染。DEAE-葡聚糖仅限于瞬时转染。4.机械法转染技术也包括使用机械的方法,

RNA干扰(RNAi)实验原理与方法(2)

dsRNA消化法的主要优点在于可以跳过检测和筛选有效siRNA序列的步骤,为研究人员节省时间和金钱(注意:通常用RNAse III通常比用Dicer要便宜)。不过这种方法的缺点也很明显,就是有可能引发非特异的基因沉默,特别是同源或者是密切相关的基因。现在多数的研究显示这种情况通常不会造成影响。最

多家公司入围重点环保实用技术名录

  中国环保产业协会8日发布2013年国家重点环境保护实用技术及示范工程(第一批)名录。共有44项技术列入公示名录,42个项目列入示范工程公示名录。   经中国证券报记者粗略统计,44项环保实用技术中,有3家上市公司的三项技术入围。分别是永清环保的重金属污染土壤离子矿化技术,盛运股份下属盛运环保工

哈希两项技术被评为“水利先进实用技术”

哈希“ecolog500地下水位记录仪”和“SLD固定式声学多普勒流量计”两项先进技术被成功列入《2014年度水利先进实用技术重点推广指导目录》,并被认定为水利先进实用技术,这将成为水利建设与管理部门采用先进技术的重要依据。技术一:ecolog500地下水位记录仪Ecolog500型地下水记录仪采用

干式复合故障排除指导秘籍超实用技术

  一、复合膜外观不良   1、有气泡   ①薄膜润湿不良,应进步胶的浓度和涂布量,(MST、KPT)外表不易潮湿,易产生气泡,特别在冬天。油墨上的气泡,用进步胶的用量的办法去除。   ②油墨外表凹凸和起泡,应把复合膜的复合温度和复合压力进步。   ③油墨外表上的胶涂布量少,应增加复合辊的压

麻皮蝽——梨园防治病虫害的实用技术

  麻皮蝽又称黄斑蝽、麻蝽象、麻纹蝽、臭大姐,主要以成虫和若虫刺吸为害果实,果实整个生长期均可受害,影响果实的产量及品质。除梨树外,该虫还可以为害桃、李、杏、枣等果树,在我国各梨产区均有发生。  田间症状  果实受害处表面凹陷,内部组织石细胞增多,局部停止生长,果面凹凸不平,果实变硬、畸形,形成疙瘩

阿拉伯国家赴甘肃学习清洁能源实用技术

  兰州7月25日电(记者 冯志军)受中国商务部委托,阿拉伯国家太阳能和风能应用技术培训班25日在甘肃自然能源研究所开幕。未来56天里,来自突尼斯、阿尔及利亚、也门等十余阿拉伯国家的官员学者将在此接受风能、太阳能等清洁能源实用技术培训。   甘肃自然能源研究所所长喜文华介绍,此次培训将进行专业