核酸凝胶电泳4
5、室温下聚合至少30min，若聚合完全，梳齿下可见二条折光线，小心拔出梳子，用水冲洗样品孔。6、在电泳槽中加入1×TBE缓冲液，使缓冲液覆盖样品孔，并用缓冲液稍淋洗样品孔。7、加上1/6体积6×上样缓冲液与DNA样品及DNA分子量标准液中混合，用微量进样器吸取，小心快速地加入加样孔中（一般加样量3~5μl）。8、接上电极，以5V/cm（1~8V/cm）的电压进行电泳。9、参照染料迁移至所需位置时，切断电源，取出凝胶床，小心撬去上面的玻璃板，检查凝胶是否完好地附在下面的玻璃板上，按下列方法之一进行染色或显影，检测DNA的位置：①溴化乙锭染色法：聚丙烯酰胺凝胶能抑制EB的荧光量，故用该法时，DNA量须大于10ng，将凝胶和玻璃板一起放入含0.5μl EB的1×TBE缓冲液中，30~45min后取出，水洗，紫外灯下观察并照相。②银盐染色法：灵敏度很高，适用于聚丙烯酰胺凝胶中DNA和RNA的染色。凝胶先在50%甲醇、10%乙酸中浸泡3......阅读全文
核酸凝胶电泳-3
3、电泳：电压＜10V/cm，电泳至溴酚兰移出样品槽到凝胶板的2/3距离时，关闭电源。4、取出凝胶块，置紫外透射反射分析仪上观察，即可见桔红的DNA区带。【注意事项】1、加样时枪头不要碰坏孔壁，否则DNA带型不整齐。大多情况下，加样时不必更换枪头，可在阴极槽中反复吸打电泳缓冲液清洗，但对Southe
核酸凝胶电泳-4
5、室温下聚合至少30min，若聚合完全，梳齿下可见二条折光线，小心拔出梳子，用水冲洗样品孔。6、在电泳槽中加入1×TBE缓冲液，使缓冲液覆盖样品孔，并用缓冲液稍淋洗样品孔。7、加上1/6体积6×上样缓冲液与DNA样品及DNA分子量标准液中混合，用微量进样器吸取，小心快速地加入加样孔中（一般加样量3
核酸凝胶电泳-1
核酸是带均匀负电荷的分子，在电场中向正极移动，不同大小和构象的核酸分子的电荷密度大致相同，在自由泳动时，各核酸分子的迁移率区别很小，难以分开。以适当浓度的凝胶介质作为电泳支持介质，具有分子筛效应，使得分子大小和构象不同的核酸分子泳动率出现较大差异，达到分离的目的。此为分离、鉴定、纯化核酸片段的标准方
核酸凝胶电泳-2
二、核酸电泳的指示剂与染色剂【指示剂】电泳过程中，常使用一种有颜色的标记物以指示样品的迁移过程，核酸电泳常用的指示剂有两种：溴酚兰，呈蓝紫色；二甲苯青，呈蓝色。溴酚蓝分子量为670道尔顿，在不同溶液凝胶中，迁移速度基本相同，其分子筛效应小，近似自由电泳。在0.6%、1%、2%的琼脂糖凝胶电泳中，溴酚
核酸凝胶电泳染料的选择
凝胶电泳是我们最基本的分子实验。其基本原理是电泳分子在电场作用下移动，因此它同电场的强度、电泳分子本身所带的净电荷数成正比。由于在电泳中使用了无反应活性的稳定的支持介质，从而降低了对流运动，故电泳的迁移率又同分子的摩擦系数成反比的。目前实验室中最常用的琼脂糖凝胶电泳染料有EB、GeneFinderT
核酸凝胶电泳观察法
实验原理：琼脂糖是海藻中提取的线状高聚物，不同浓度的琼脂糖密度不同，一般PCR产物使用2%浓度，0.5Kb-10Kb的DNA使用1%浓度，基因组DNA使用0.3%-0.7%浓度；不同大小的核酸在同一浓度的凝胶中迁移率不同，因为分子越大其受琼脂糖的阻力越大，迁移率与碱基对的对数值成反比；同分子量不同构
核酸凝胶电泳染料该如何选择？
凝胶电泳是我们基本的分子实验。其基本原理是电泳分子在电场作用下移动，因此它同电场的强度、电泳分子本身所带的净电荷数成正比。由于在电泳中使用了无反应活性的稳定的支持介质，从而降低了对流运动，故电泳的迁移率又同分子的摩擦系数成反比的。目前实验室中常用的琼脂糖凝胶电泳染料有EB、GeneFinder
琼脂糖凝胶电泳的制备及核酸检测
一. 实验目的1、掌握琼脂糖凝胶电泳的原理;2、学习琼脂糖凝胶电泳的操作。二. 实验原理琼脂糖是一种天然聚合长链状分子，沸水中溶解，45℃开始形成多孔性刚性滤孔，凝胶孔径的大小决定于琼脂糖的浓度。DNA分子在碱性环境中带负电荷，在外加电场作用下向正极泳动。DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时，有电荷效应与
琼脂糖凝胶电泳对核酸的分离方法介绍
1．核酸分子大小与琼脂糖浓度的关系（1）DNA分子的大小 在凝胶中，DNA片段迁移距离（迁移率）与碱基对的对数成反比，因此通过已知大小的标准物移动的距离与未知片段的移动距离时行比较，便可测出未知片段的大小。但是当DNA分子大小超过20kb时，普通琼脂糖凝胶就很难将它们分开。此时电泳的迁移率不再依赖于
为什么琼脂糖凝胶电泳可以分离和鉴定核酸
可以，琼脂糖凝胶电泳可以通过限制性酶切多态性（rflp）或者扩增片断多态性（aflp）来鉴定检测的dna。就是不同dna被特定的限制性内切酶切出来的片断大小是不一样的，在琼脂糖凝胶电泳跑出来的条带也不一样，如果是相同的dna，结果就一样。