DNA浓度和纯度的测定（分光光度法和溴化乙锭法）
Ⅰ 分光光度法 一、目的 熟练掌握分光光度法检测DNA纯度和浓度的方法。 二、原理 DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收，其吸收峰在 260nm处。波长为260nm时，DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关，也随构型而有差异。 对标准样品来说，浓度为1μg / ml时，DNA钠盐的OD260＝0.02 当OD260＝1时，dsDNA浓度约为50μg / ml ssDNA浓度约为37μg / ml RNA浓度约为40μg / ml 寡核苷酸浓度约为30μg / ml（youyu底物不同有差异） 当DNA样品中含有蛋白质、酚或其他小分子污染物时，会影响DNA吸光度的准确测定。一般情况下同时检测同一样品的OD260、OD280和OD230，计算其比值来衡量样品的纯度。 经验值： 纯DNA：OD26......阅读全文
桑色素荧光分光光度法的测定原理和应用
本法适用于生活饮用水及其水源水中铍的测定。铍在碱性溶液中与桑色素反应生成黄绿色荧光化合物,测定荧光强度定量。低含量的铍在pH5〜 8与乙酰丙酮形成的络合物可被四氯化碳萃取,予以富集。所用设备、耗材:分液漏斗、蒸发皿、具塞比色管、荧光光度计
水质－钙和镁的测定－原子吸收分光光度法
引言本标准等效采用国际标准ISO 7980-1986《水质－钙和镁的测定－原子吸收分光光度法》。1 主题内容与适用范围1.1主题内容本标准规定了测定水中钙和镁的原子吸收分光光度法。1.2适用范围本标准适用于测定地下水，地面水和废水中的钙、镁。本标准适用的校准溶液浓度范围（见表1）与仪器的特性有关，随
水质－钙和镁的测定－原子吸收分光光度法
本标准等效采用国际标准ISO 7980-1986《水质－钙和镁的测定－原子吸收分光光度法》。 1 主题内容与适用范围 1.1主题内容 本标准规定了测定水中钙和镁的原子吸收分光光度法。 1.2适用范围 本标准适用于测定地下水，地面水和废水中的钙、镁。本标准适用的校准溶
水质－钙和镁的测定－原子吸收分光光度法
水质 钙和镁的测定 原子吸收分光光度法GB 11905—89 引言本标准等效采用国际标准ISO 7980-1986《水质－钙和镁的测定－原子吸收分光光度法》。1 主题内容与适用范围1.1主题内容本标准规定了测定水中钙和镁的原子吸收分光光度法。1.2适用范围本标准适用于测定地下水，地面水和废水中的钙
紫外分光光度法检测物质的纯度－乙醇中微量苯的测定
一、实验目的： 1、学习利用紫外可见分光光度计检查物质纯度的原理和方法。2、熟练紫外可见分光光度计的操作。三、实验原理 紫外吸收光谱法是有机分析中一种常用的方法，具有仪器设备简单、操作方便、灵敏度高的特点，已广泛应用于有机化合物的定性、定量和结构鉴定。由于紫外吸收光谱的吸收峰通常很宽，峰的数目也很少
火焰原子吸收分光光度法:测定原理和应用
火焰原子吸收分光光度法:本法适用于生活饮用水及水源水中铜、铁、镒、锌、镉、铅、钾、钠的测定。水样中金属离子被原子化后,吸收来自同种金属元素空心阴极灯发出的共振线,吸收共振线的量与样品中该元素的含量成正比。在其他条件不变的情况下,根据测量被吸收后的谱线强度,与标准系列比较定量。所用设备、耗材:各元素空
DNA印迹法的起源和原理
这种方法最初是由Southern于1975年建立的。方法中DNA转移的方式和复印的过程一样,比较准确地保持了特异DNA顺序在电泳图谱中的位置,也可将变性的凝胶负压干燥后与特定的DNA探针进行原位杂交。它把电泳分离和杂交结合起来,不但能检测出特异的DNA序列片段,而且能进行定位和测定分子量。即先以电泳
DNA的Tm值测定实验_紫外分光光度法
当DNA 的稀盐溶液加热到80～100 ℃ 时, 双螺旋结构即发生解体, 两条链分开, 形成无规线团。一系列物化性质也发生改变: 260 nm区紫外吸收值增高(增色效应) , 粘度降低, 浮力密度降低等。本实验旨在准确理解DNA 的Tm 值的定义及测定Tm 值的意义，掌握DNA 的Tm 值的测定方法
核酸纯度、浓度与分子量测定实验
实验方法原理 溴化乙锭是一种荧光染料，在凝胶电泳中，EB分子可嵌入核酸双链的碱基对之间，在紫外线激发下发出荧光，其强度与DNA量成正比。同时核酸最大吸收波长在260 nm，在此波长下，吸光度1 A相当于一定浓度的核酸，可以通过A260/A
核酸纯度、浓度与分子量测定实验
实验方法原理 溴化乙锭是一种荧光染料，在凝胶电泳中，EB分子可嵌入核酸双链的碱基对之间，在紫外线激发下发出荧光,其强度与DNA量成正比。同时核酸最大吸收波长在260 nm，在此波长下，吸光度1 A相当于一定浓度的核酸，可以通过A260/A280 的比值，来测定所得核酸的纯度。实验材料 DNA试剂
工业用异戊烯纯度和烃类杂质含量的测定－气相色谱法
本标准规定了用气相色谱法测定工业用异戊烯试样纯度和烃类杂质含量。 本标准适用于异戊烯试样中的烃类组分含量的测定，其最低检测浓度为0.005%(质量分数)。 方法提要 在本标准规定的条件下，将适量试样注入色谱仪，使各待测组分在色谱柱中被有效分离，用氢火焰离子化检测器(FID)检测
COD低浓度和高浓度标线以及水样的测定
一、实验目的： 1、熟悉快速消解分光光度法测定水质化学需氧量过程中的设备。 2、掌握测定水质化学需氧量的方法以及不同浓度水样的测定方法。 3、学会处理实验数据、分析误差产生的原因、并找出解决方法。 二、实验原理： 试样中加入已知量的重铬酸钾溶液，在强硫酸介质中，以硫酸银作为
测定溶液的旋光率和浓度
工作原理： 线偏振光通过某些物质后，偏振光的振动面将旋转一定的角度ϕ ，这种现象称为旋光现象。旋转的角度ϕ 称为旋转角或旋光度，能够使线偏振光振动面发生旋转的物质，称为旋光物质。面向光源，如果旋光物质使偏振光的振动面沿逆时针方向旋转，称为左旋物质。反之，若使偏振光的振动面沿顺时针方向旋转，称
水质钾和钠的测定－火焰原子吸收分光光度法
水质 钾和钠的测定 火焰原子吸收分光光度法B 11904－89 1 主题内容与适用范围本标准规定了用火焰原子吸收分光光度法测定可过滤态钾和钠。他适用于地面水和饮用水测定。测定范围钾为0.05～4.00m8／L；钠为0.01～2.00mg／L。对于钾和钠浓度较高的样品，应取较少的试料进行分析，或采用
水质－钾和钠的测定－火焰原子吸收分光光度法
1 主题内容与适用范围本标准规定了用火焰原子吸收分光光度法测定可过滤态钾和钠。他适用于地面水和饮用水测定。测定范围钾为0.05～4.00m8／L；钠为0.01～2.00mg／L。对于钾和钠浓度较高的样品，应取较少的试料进行分析，或采用次灵敏线测定。2 原理原子吸收光谱分析的基本原理是测量基态原子对共
水质钾和钠的测定－火焰原子吸收分光光度法
水质 钾和钠的测定 火焰原子吸收分光光度法 B 11904－89 1 主题内容与适用范围 本标准规定了用火焰原子吸收分光光度法测定可过滤态钾和钠。他适用于地面水和饮用水测定。测定范围钾为0.05～4.00m8／L；钠为0.01～2.00mg／L。对于钾和钠浓度较高的样品，应取较少的试料进行
水质钾和钠的测定－火焰原子吸收分光光度法
水质 钾和钠的测定 火焰原子吸收分光光度法 B 11904－89 1 主题内容与适用范围 本标准规定了用火焰原子吸收分光光度法测定可过滤态钾和钠。他适用于地面水和饮用水测定。测定范围钾为0.05～4.00m8／L；钠为0.01～2.00mg／L。对于钾和钠浓度较高的样品
核酸分离与纯化的设计与原则（二）
（四）核酸的浓缩、沉淀与洗涤随着核酸提取试剂的逐步加入，以及去除污染物过程中核酸分子不可避免的丢失，样品中核酸的浓度会逐渐下降，及至影响到后面的实验操作或不能满足后继研究与应用的需要时，需要对核酸进行浓缩。沉淀是核酸浓缩最常用的方法，其优点在于核酸沉淀后，可以很容易地改变溶解缓冲液和调整核酸溶液至所
DNA序列测定的技术和策略
目前应用的两种快速序列测定技术是Sanger等（1977）提出的酶法及Maxam和Gilbert(1977)提出的化学降解法。虽然其原理大相径庭，但这两种方法都是同样生成互相独立的若干组带放射性标记的寡核苷酸，每组寡核苷酸都有固定的起点，但却随机终止于特定的一种或者多种残基上。由于DNA上的每一个碱
DNA的定量
一、 实验原理核酸分子（DNA或RNA）由于含有嘌吟环和嘧啶环的共轭双键，在260 nm波长处有特异的紫外吸收峰，其吸收强度与核酸的浓度成正比，这个物理特性为测定核酸溶液浓度提供了基础。1 OD260相当于dsDNA 50 ug/ml，ssDNA 33 ug/ml和ssRNA 40 ug/ml。可以
DNA印迹法的实验器材和试剂
器材 1、电热真空干燥箱 2、硝酸纤维素滤膜或尼龙膜 3、大方瓷盘、带盖方盘、玻璃板 4、滤纸、吸水纸、保鲜膜、蜡膜Parafilm、一次性手套等 5、刀片、刻度吸管、镊子、剪刀、lkg重物 二、材料 电泳分离DNA的琼脂糖凝胶 试剂 1、酸变性液:0.25mol/L HCl， 用
DNA酶足迹法的原理和应用
DNA酶足迹法是一种用来测定DNA-蛋白质专一性结合的方法。用于检测与特定蛋白质结合 的DNA序列的部位,可展示蛋白质因子同特定DNA片段之间的结合区域。其原理为：DNA和蛋白质结合以后便不会被DNAase分解，在测序时便出现空白区(即蛋白质结合区)，从而了解与蛋白质结合部位的核苷酸对数目。在用酶移
食用油中油脂纯度和含量的测定试验
目前，在市场上销售的食用油质量参差不齐，良莠混杂。油脂的种类和掺杂与油脂的质量及食用者的身体健康关系密切。快速鉴别油脂的真伪、掺杂是当前我国食用油市场监管的重要难题之一。目前对食用油品种的识别取得了一些研究进展。例如电子鼻技术是近十年来针对复杂介质和含协同作用的样品而发展起来的一门新技术，可用于
DNA的定量实验原理和步骤
一、 实验原理核酸分子（DNA或RNA）由于含有嘌吟环和嘧啶环的共轭双键，在260 nm波长处有特异的紫外吸收峰，其吸收强度与核酸的浓度成正比，这个物理特性为测定核酸溶液浓度提供了基础。1 OD260相当于dsDNA 50 ug/ml，ssDNA 33 ug/ml和ssRNA 40 ug/ml。可以
分光光度法和紫外分光光度法有何区别
分光光度法是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内的光吸收度，对该物质进行定性和定量分析的方法。 1. 基本原理 单色光辐射穿过被测物质溶液时，被该物质吸收的量与该物质的浓度和液层的厚度（光路长度）成正比，即朗伯 - 比尔定律，这是吸收光谱法定量的理论依据，其关系式如式 3-1 ： A = E
紫外分光光度法和荧光分析法的区别和各自的优缺点
1、原理不同： （1）紫外分光光度计，就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。（2）荧光分光光度法是根据物质的荧光谱线位置及其强度进行物质鉴定和含量测定。可根据不同的物质其组成与结构调整所吸收的紫外-可见光波长和发射光的波长。2、应用范围不同：（1）紫外分光光度计主要用
紫外分光光度法和荧光分析法的区别和各自的优缺点
1、原理不同： （1）紫外分光光度计，就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。（2）荧光分光光度法是根据物质的荧光谱线位置及其强度进行物质鉴定和含量测定。可根据不同的物质其组成与结构调整所吸收的紫外-可见光波长和发射光的波长。2、应用范围不同：（1）紫外分光光度计主要用
紫外分光光度法和荧光分析法的区别和各自的优缺点
1、原理不同： （1）紫外分光光度计，就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。（2）荧光分光光度法是根据物质的荧光谱线位置及其强度进行物质鉴定和含量测定。可根据不同的物质其组成与结构调整所吸收的紫外-可见光波长和发射光的波长。2、应用范围不同：（1）紫外分光光度计主要用
紫外分光光度法和荧光分析法的区别和各自的优缺点
1、原理不同： （1）紫外分光光度计，就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。（2）荧光分光光度法是根据物质的荧光谱线位置及其强度进行物质鉴定和含量测定。可根据不同的物质其组成与结构调整所吸收的紫外-可见光波长和发射光的波长。2、应用范围不同：（1）紫外分光光度计主要用
紫外分光光度法和荧光分析法的区别和各自的优缺点
1、原理不同： （1）紫外分光光度计，就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。（2）荧光分光光度法是根据物质的荧光谱线位置及其强度进行物质鉴定和含量测定。可根据不同的物质其组成与结构调整所吸收的紫外-可见光波长和发射光的波长。2、应用范围不同：（1）紫外分光光度计主要用